Электроды лэз мр 3с: Сварочный электрод ЛЭЗ МР-3С d2,0 купить в Москве — низкая цена

Электроды ЛЭЗ МР-3С синие d4,0мм (упаковка 5кг)

Электроды ЛЭЗ МР-3С синие d4,0мм (упаковка 5кг)

Для увеличения картинки нажмите на изображение

Артикул:

Цена за: кг 131.99 ₽ 0 ₽ экономия 0 ₽

упаковка кгупаковка (5 кг)

Количество кг	5
Количество упаковка	1
Объем	~ 0 м3
Вес	~ кг

Итоговая сумма:

659. 95 ₽ 0 ₽ экономия 0 ₽

В наличиимного

Диаметр, мм: 425342,5

Электроды Лосиноостровский Электродный Завод (ЛЭЗ) из коллекции МР-3С выпускаются в цвете синий и имеют диаметр 4мм. Они используются в ручной дуговой сварке различных конструкций из углеродистой стали. Электроды МР-3С подходят для ответственных конструкций. Сварку можно проводить под разными углами. Изготавливаются в России и фасуются в упаковка 5кг.

Электроды ЛЭЗ МР-3С предназначены для ручной дуговой сварки рядовых и ответственных конструкций из углеродистых сталей, когда к формированию швов в различных пространственных положениях предъявляют повышенные требования. Сварка проводится во всех пространственных положениях постоянным током обратной полярности и переменным током от источников питания с напряжением холостого хода (50±5)В.

Общие характеристики ?

Размеры и вес ?

Диаметр, мм ? :4

Упаковка и доставка ?

Упаковка ? :упаковка 5кгКоличество кг в упаковке ? :5

Модификации

Электроды Лосиноостровский Электродный Завод (ЛЭЗ) из коллекции МР-3С выпускаются в цвете синий и имеют диаметр 2,5мм. Они используются в ручной дуговой сварке различных конструкций из углеродистой стали. Электроды МР-3С подходят для ответственных конструкций. Сварку можно проводить под разными углами. Изготавливаются в России и фасуются в упаковка 5кг.

Электроды Лосиноостровский Электродный Завод (ЛЭЗ) из коллекции МР-3С выпускаются в цвете синий и имеют диаметр 2мм. Они используются в ручной дуговой сварке различных конструкций из углеродистой стали. Электроды МР-3С подходят для ответственных конструкций. Сварку можно проводить под разными углами. Изготавливаются в России и фасуются в упаковка 1кг.

Электроды Лосиноостровский Электродный Завод (ЛЭЗ) из коллекции МР-3С выпускаются в цвете синий и имеют диаметр 3мм. Они используются в ручной дуговой сварке различных конструкций из углеродистой стали. Электроды МР-3С подходят для ответственных конструкций.

Сварку можно проводить под разными углами. Изготавливаются в России и фасуются в упаковка 5кг.

Электроды Лосиноостровский Электродный Завод (ЛЭЗ) из коллекции МР-3С выпускаются в цвете синий и имеют диаметр 3мм. Они используются в ручной дуговой сварке различных конструкций из углеродистой стали. Электроды МР-3С подходят для ответственных конструкций. Сварку можно проводить под разными углами. Изготавливаются в России и фасуются в упаковка 1кг.

Электроды Лосиноостровский Электродный Завод (ЛЭЗ) из коллекции МР-3С выпускаются в цвете синий и имеют диаметр 4мм. Они используются в ручной дуговой сварке различных конструкций из углеродистой стали. Электроды МР-3С подходят для ответственных конструкций. Сварку можно проводить под разными углами. Изготавливаются в России и фасуются в упаковка 5кг.

Список просмотренных товаров пуст

Список сравниваемых товаров пуст

Список избранного пуст

Ваша корзина пуста

AlfaSystems GoPro GP261D21

1 кг), цена и фото – Компания Октайс-Техника

Профессиональные сварщики знают, что качество сварного шва во многом зависит от правильного выбора электродов. Например, для углеродистых сталей с небольшим содержанием легирующих элементов лучше приобрести сварочные электроды МР 3. Они имеют оптимальные технологические показатели, соответствующие требованиям ГОСТ и международных стандартов. При использовании этих расходных материалов обеспечивается высокая производительность и чистота сварки, поскольку во время процесса металл практически не разбрызгивается, и шов получается ровный и качественный.

Эти универсальные электроды для сварки используют при работе от источников переменного и постоянного тока. Кроме того, они обладают рядом неоспоримых достоинств:

Возможность использования в любом пространственном положении
Возможность работы удлиненной дугой
Минимальное выделение газа и дыма
Возможность применения низких токов с сохранением высокого качества шва
Легкость удаления шлаковой рубашки
Низкая стоимость

Все вышеперечисленные достоинства данных электродов достигаются, благодаря специально разработанному химическому составу покрытия, куда входит марганец, сера, фосфор, кремний и углерод.

Также имеется небольшой процент присадок, снижающих количество выделяемых газов и разбрызгивание металла.

Свойства электродов и особенности выбора

Напомним основное правило, которое следует соблюдать при работе: электрод сварочный МР 3С перед использованием необходимо прокалить. Оптимальные условия этого процесса – температура 170-2100С, поддерживаемая в течение одного часа.

Еще одно важное свойство, о котором нельзя забывать: сварочные электроды МР 3С 3 мм могут работать по окисленному металлу, а также с деталями, на которых имеются загрязнения и краска. Качества шва при этом остается на высоком уровне. Однако не стоит использовать эти расходники при варке трубопроводов, по которым подается мазут или маслосодержащие вещества. В этом случае вам потребуются электроды со специальным покрытием.

Диапазон размеров достаточно широк. Наибольшей популярностью пользуются электроды 2,5-6 мм. Однако если вам необходимо купить электроды другого диаметра, то свяжитесь с нашими менеджерами, и мы легко подберем вам требуемый товар.

Характеристика электродов для сварки МР-3С:

Рутил-целлюлозное покрытие.
Коэффициент наплавки – 8,5 г/А·ч.
Производительность наплавки при диаметре 4мм) – 1,4 кг/ч
Расход 1 кг шва – 1,7 кг.

Свойства шва для электродов МР-3 С:

Временное сопротивление sв, МПа — 480
Предел текучести sт, МПа — 390
Относительное удлинение d5, % — 25li>
Ударная вязкость aн, Дж/см2 — 130

Химический состав шва, %:

C — 0,10
Mn — 0,58
Si — 0,17
S — 0,025
P — 0,035

Особенности эксплуатации

Электроды МР-3С совершенно не требовательны к качеству и чистоте свариваемых поверхностей. Они отлично варят по ржавчине, плохо очищенной поверхности. Избыточная влажность для них тоже не является препятствием для того, чтобы хорошо делать свою работу.

Технологические особенности сварки МР-3С:

Возможна сварка удлиненной дугой
Дуга с облегченным повторным зажиганием
Нерихотливость к качеству псвариемых поверхностей — допустима ржавчина
Обязательна прокалка в течение часа при температуре 120 – 160°С.

Лосиноостровские электроды МР-3С (отзыв сварщика)

В сегодняшней публикации хотелось бы рассказать о небезызвестных электродах для ручной дуговой электросварки МР-3С производства ОАО «Лосиноостровский электродный завод». Реализуются они в килограммовой картонной упаковке, покрытой полиэтиленом для защиты от влаги.  Так же на ней написано приблизительно следующее: что данные электроды рекомендуются для сварки различных конструкций как ответственного, так и обычного назначения из «черных» сталей и применять их следует, когда  требуется получить визуально ровный и качественный  шов в различных пространственных положениях, например, когда приходится проходить вертикальные швы или потолочные.

С этими рекомендациями можно согласиться, но только отчасти. Потому что приходилось варить электродами и гораздо лучшего качества. Что имеется ввиду: заявляется, что МР-3С рассчитаны на ток АС/DC, но на самом деле «на переменке» они вообще не зажигаются! А флюс (обмазка) излишне зашлаковывают металл шва -это субъективное мнение,но основанное на личном опыте. Сам металл шва – мягкий, поддается обработке напильником и режется ножовкой, с низким содержанием углерода, что не позволяет его упрочнить закалкой. Для бытовых работ это подходит, насчет ответственных конструкций – нужно применять очень аккуратно.  Нельзя так же не отметить, что благодаря «мягкости» шва, он не склонен к трещинообразованию (испытано  на образцах, которые были погнуты).

И еще несколько замечаний:

• После того как вы оторвали электрод и он уже успел «застыть», то зажечь его снова будет сложно, придется постукивать, чтобы отбить шлак с кончика.
• При сварке двойкой производитель рекомендует ток 40-60А.  На самом деле 30А вполне достаточно. На рекомендованных параметрах электрод сгорает очень быстро и сильно брызгает, по крайней мере, если варить Ресантой.

Вывод: ЛЭЗ МР-3С среднего качества исполнения, по пятибалльной шкале они заслуживают твердую оценку «четыре».

Категории : Сварочные электроды Метки: лэз мр 3с, МР-3С, электроды мр 3, электроды мр 3с

Электроды ЛЭЗ МР-3С d2.

5мм (5кг)

Электроды ЛЭЗ МР-3С d2.5мм (5кг) предназначены для ручной дуговой сварки рядовых и ответственных конструкций из углеродистых сталей, когда к формированию швов в различных пространственных положениях предъявляют повышенные требования. Сварка проводится во всех пространственных положениях постоянным током обратной полярности и переменным током от источников питания с напряжением холостого хода (50±5)В. Вес упаковки: 5 кг 

Производитель оставляет за собой право изменять страну производства, характеристики товара, его внешний вид и комплектность без предварительного уведомления продавца. Уточняйте информацию у менеджеров!

1. Способы доставки

	Легковой транспорт (до 300 кг)	Грузовой транспорт (крупногабарит)	Постаматы и ПВЗ  PickPoint
Москва	500 руб	от 1700 руб**	200 руб
МО, область	500 руб*	от 1700 руб*	200 руб
Регионы, РФ			450 руб
Самовывоз	Выдача товара до 20:00, Раменский район, Михайловская слобода, Старорязанская улица, д. 4. (при оплате – резерв товара) Пункт выдачи по адресу: Москва, Рязанский проспект, д.79 (пн-вс с 09:00 до 20:00)

* каждый 1 км за МКАД дополнительно 20 руб (легковой транспорт) или 50 руб (грузовой транспорт)

** полная информация по доставке крупногабаритных грузов смотрите в разделе Доставка и оплата

2. Способы оплаты

      Банковской картой онлайн на сайте             ЮMoney (Я.Деньги)

     Наличными курьеру                                                    QIWI кошелек

     Сбербанк-онлайн                                                           WebMoney

     Безналичный расчет

Вы можете вернуть товар, если был обнаружен производственный брак, дефекты и прочие повреждения. Срок возврата осуществляется в течение 14 дней с даты покупки товара. 

Возврат товара осуществляется в полном соответствии с законодательством РФ, включая Закон о Правах Потребителя.

Подробная информация о возратах и обмене

Сварочные электроды ЛЭЗ МР 3С

Сварочные электроды ЛЭЗ МР 3С

Подробности

Категория: Сварочные электроды

Сварочные электроды марки ЛЭЗ МР ЗС Тип Э46 (свидетельство НАКС, Речной Регистр) предназначены для ручной дуговой сварки рядовых и ответственных конструкций из углеродистых сталей, когда к формированию швов в различных пространственных положениях предъявляют повышенные требования. Сварка во всех пространственных положениях постоянным током обратной полярности и переменным током от источников питания с напряжением холостого хода (50±5)В.

Рекомендуемое значение тока (А)

Диаметр, мм	Положение шва				Условное обозначение положения сварки
	нижнее	вертикальное	потолочное	сверху вниз
2,5	70-90	60-100	60-100	100-120
3,0	90-130	80-110	80-110	140-170
4,0	140-180	120-160	120-160	–
5,0	170-220	150-190	–	–
6,0	240-300	–	–	–

Характеристики плавления электродов МР-3С

• Коэффициент наплавки: 8,5 г/Ач
• Расход электродов на 1 кг наплавленного металла: 1,7 кг

Механические свойства металла шва (не менее)

• Временное сопротивление разрыву: 460 МПа
• Относительное удлинение: 20%
• Ударная вязкость: 80 Дж/см²

Химический состав наплавленного металла

• Углерод, не более: 0,12%
• Марганец: 0,35%-0,70%
• Кремний: 0,09%-0,25%
• Сера, не более: 0,040%
• Фосфор, не более: 0,045%

Сварочные электроды марки ЛЭЗ МР-ЗС: свидетельство НАКС, Речной Регистр

ГОСТ 9466-75, ГОСТ 9467-75, ТУ 1272-075-01055859-2003, AWS:E6013, EN499:Е382RС12, Э46-ЛЭЗМР-3С-Ø-УД / Е 431(3)-РЦ13

Сварочные электроды МР-3С

Характеристики сварочных электродов ЛЭЗ МР-3С
Назначение	Ручная дуговая сварка рядовых и ответственных конструкций из углеродистых сталей. Повышенные требования к формированию швов
Положение сварки	Все пространственные положения
Ток	Переменный; постоянный, обратной полярности. От источников питания с напряжением холостого хода 50±5В.
Коэффициент наплавки Расход электродов на 1кг наплавленного металла 8,5 г/Ач 1,7 кг
Допустимое содержание влаги в покрытии перед употреблением	Не более 0,7% ! В случае превышения содержания влаги в покрытии, электроды необходимо прокалить при температуре 120-160°С в течение 1 часа.
Масса	В коробке – 20 (12-18) кг В пачке – 5 (1; 2,5) кг

 

Рекомендуемые значения силы тока, А

Ø, мм	Положение шва
	нижнее	вертикальное снизу вверх	потолочное	вертикальное сверху вниз
2,0	40-60	40-60	40-60	40-60
2,5	70-90	60-100	60-100	100-120
3,0	90-130	80-110	80-110	140-170
4,0	140-180	120-160	120-160	—
5,0	170-220	150-190	—	—
6,0	240-300	—	—	—

Механические свойства металла шва:

• Временное сопротивление разрыву, не менее: 460 МПа
• Относительное удлинение, %: 20
• Ударная вязкость, Дж/см²: 80

Электроды МР-3С для сварки ЛЭЗ (синяя обмазка)

Наименование  –  Электроды  МР-3С  ( ЛЭЗ )
Применение  –  электроды  МР-3С  используются  для  ручной  дуговой  сварки  сталей
Производитель  –  Лосиноостровский  электродный  завод  ( Россия )
Регламентирующий  документ  –  ГОСТ 9466-75
Тип  –  Э46
Вид  тока  –  переменный  и  постоянный
Покрытие  –  рутиловое
Цвет  –  синий
Коэффициент  наплавки  =  8 г/А*ч
Временное  сопротивление  –  не  менее  460 МПа
Относительное  удлинение  –  не  менее  22 %
Ударная  вязкость  =  не  менее  80 Дж / см²
Вес  пачки  =  5 кг
Вес  короба  =  20 кг
Сертификат  /  паспорт  ( по  запросу )
Цена  /  прайс  ( по  запросу )

Технические  характеристики  и  размеры

Наименование	Диаметр (мм)	Длина (мм)	Ток (А)	Стоимость за 1 кг
Электроды МР-3С Ø 3 мм (синяя обмазка) ЛЭЗ	3	350	90÷130	цена по запросу
Электроды МР-3С Ø 4 мм (синяя обмазка) ЛЭЗ	4	450	140÷180	цена по запросу

Возврат  в  on-line  каталог   >>

Получить  консультацию,  узнать  цены  или  оформить  заявку,  чтобы  купить
этот  товар  Вы  cможете,  прислав  запрос  по  электронной  почте  на  адрес:
proton. lm@mail.ru  или  позвонив  по  телефону  в  Москве:  +7 ( 495 ) 641 16 85

ООО “ПРОТОН”,  Россия,  Москва,  проспект  Андропова,  д. 38
Официальный  сайт:  www.proton-st.ru,  тел.: +7 (495) 641 16 85

заводов производителей сварочных электродов. Сварочные электроды, маркировка электродов, какие электроды выбрать

В последние 3-5 лет на российском рынке, как и на мировом рынке в целом, наблюдается тенденция к снижению доли сварочных электродов в общем объеме использования металлообрабатывающего оборудования. Наблюдаемая тенденция связана с увеличением доли сварки сварочной проволокой вольфрамовой контактной сваркой, как более экономичной и качественной.В то же время, в связи с повышенным спросом на сварные соединения, связанным с динамичным развитием строительной отрасли, ВПК, железной дороги, нефтегазового комплекса, в абсолютном выражении потребность в сварочных электродах у российских потребителей ежегодно. увеличивается на 10-20% (см.). Доля сварочных электродов в общем производстве сварочных материалов составляет около 20% (см. Рисунок 1) (см. Http://www.wwr.ru/publications/13092005_1.asp).
Основным преимуществом использования сварочных электродов по сравнению с другими сварочными материалами и методами, в частности – порошковой проволокой, сваркой в ​​среде защитных газов, является невысокая стоимость оборудования.

Рисунок 1.
Доля производства электродов для ручной дуговой сварки в общем производстве сварочных материалов в России,%

Источник: http://www.wwr.ru/publications/13092005_1.asp

По данным По мнению экспертов, перспективы развития российского рынка электродов в краткосрочной и среднесрочной перспективе связаны с дальнейшим снижением доли сварочных электродов в общем объеме металлосварочного оборудования, используемого потребителями, а также с незначительным увеличение объема рынка электродов в абсолютном выражении.
Среди электродов общего назначения российские предприятия в наибольших объемах производят электроды с рутиловым (марки МР-3, АНО-21, ОЗС-12) и ильменитовым (марка АНО-6) покрытиями. На долю таких электродов приходится около 60% от общего объема производства (см. Рисунок 2). Они пользуются наибольшим спросом на рынке, так как подходят для сварки как переменным, так и постоянным током практически во всех положениях, сварка доступна даже сварщику с низкой квалификацией. В меньших объемах выпускаются электроды с покрытием основного типа (марки УОНИ-13/45, УОНИ-13/55), их доля составляет около 36%.Эти электроды используются для сварки ответственных конструкций и требуют наличия высококвалифицированного сварщика … Сварка обычно выполняется постоянным током обратной полярности.

Среди производителей и поставщиков сварочных электродов на российском рынке можно выделить три основные группы, ориентированные на разные сегменты потребительского рынка (см. Http://www.msouz.ru/novost_one_new.asp?ind=3834):
– Крупные отечественные производители электродов, обеспечивающие основную часть потребностей российских потребителей.В эту группу входят 20-25 производителей, среди которых ведущими являются: ОАО «Новочеркасский электродный завод», ОАО «Челябинский электродный завод», ЗАО «Новосибирский электродный завод», находящиеся под управлением ЗАО «Энергопром Менеджмент»; ОАО «Лосиноостровский электродный завод»; ОАО «Спецэлектрод» – в прошлом опытный сварочный завод-разработчик, сумел создать мощное производство с собственной научной базой; ОАО «Орловский сталепрокатный завод», ОАО «Череповецкий сталепрокатный завод», входящие в Группу «Северсталь Инвест»; ОАО «Ленинградский электродный завод» и некоторые другие.
– Производители или поставщики электродов “импортного” качества. В эту группу входят 5-10 компаний, ее доля на российском рынке стабильно растет за счет растущего спроса на качественную сварку среди потребителей.
– Небольшие фабрики, работающие в Москве, Краснодаре, Курске, Самаре и других городах. Предприятия, входящие в эту группу, производят в основном нержавеющие и специальные электроды. Их востребованность во многом обусловлена ​​наличием на рынке достаточно большого количества «разовых» потребителей и потребителей, не имеющих постоянного поставщика.
Крупнейшими отечественными производителями электродов в настоящее время являются три предприятия: Новочеркасский электродный завод (НЭЗ), Челябинский электродный завод (ЧЭЗ) и Новосибирский электродный завод (НовЭЗ). По данным заводов, около 35,2% российского рынка электродов контролируется НовЭЗ, доля НЭЗ – 26,8%, ЧЗО – 23,2% (см. График 3).

Представьте себе краткое описание производителей – лидеров российского рынка сварочных электродов.
ЗАО «Новосибирский электродный завод» (НовЭЗ) – специализируется на производстве графитовых электродов марок ЭГСП, ЭГП и ЭГ, угольных электродов, катодных блоков, прокаленного нефтяного кокса и электродной массы.Продукция соответствует мировому уровню качества. Годовой оборот по основным видам продукции ЗАО «НовЭЗ» в 2006 году составил 3 075 млн руб. (в том числе экспорт – 886 млн руб.). Инвестиционная программа на 2006 год по техническому перевооружению завода превысила 216 миллионов рублей. В текущем году, как и в 2008 году, на заводе будет реализована масштабная программа реконструкции и модернизации технологического оборудования, цель которой – увеличение производства основных видов продукции.
ОАО «Новочеркасский электродный завод» (НЭЗ) – специализируется на производстве высококачественных графитовых электродов марок ЭГСП, ЭГП и ЭГ. Разработкой новых материалов и технологий занимается собственный научно-исследовательский центр с привлечением отраслевых научно-исследовательских и инженерных российских и зарубежных компаний. На базе завода создано совместное предприятие с SGL Carbon GmbH (Германия) по производству химического оборудования на основе графита. ОАО «НЭЗ» обеспечило в 2006 году объем производства товарной продукции в размере 2 717 млн ​​руб.По основным видам продукции объем производства составил: электроды графитовые – 35 987,4 тонны, масса анода – 15 030 тонн. Объем экспорта продукции в 2006 году составил 1 059,5 млн руб. Объем инвестиционной программы НЭЗ в 2006 году оценивался в 160 млн рублей, в этом году планируется увеличить эти средства вдвое. Инвестиции будут направлены на капитальный ремонт и внедрение новой техники, строительство новых объектов. В частности, будет введена в эксплуатацию новая печь, будет реконструирована печь для графитизации и пресс-смесительный процесс, начата подготовка к строительству нового поколения экспериментальных печей для графитизации.
ОАО «Челябинский электродный завод» (ЧЭЗ) – специализируется на производстве графитовых электродов, катодных блоков, доменных блоков, конструкционных графитов общего назначения. Завод оснащен современным высокопроизводительным оборудованием, некоторые агрегаты, используемые на предприятии, уникальны и разработаны специально для завода. По качественным характеристикам ряд товарных продуктов находится в одном ряду и даже превосходит зарубежные аналоги. ОАО «ЧЭЗ» обеспечило в 2006 году объем производства товарной продукции в размере 1 706 млн руб.По основным видам продукции объем производства составил: электроды графитовые – 11 477 тонн, изделия углеродные конструкционные – 168,5 млн руб. Объем реализации продукции в 2006 году составил 2 163 млн рублей. Объем экспорта продукции в 2006 году достиг 136,9 млн рублей. В 2006 году ОАО «ЧЭЗ» запустило программу повышения эффективности предприятия. Объем инвестиций в развитие завода в 2006 году составил 54 миллиона рублей. По итогам 2006 года экономический эффект только от реализации мероприятий по оптимизации основного производства достиг 70 млн рублей.
Среди ведущих российских производителей сварочных электродов необходимо отметить ОАО «Лосиноостровский электродный завод», которое специализируется на производстве высококачественных электродов для ручной дуговой сварки, резки и наплавки металлов различного назначения. По оценкам специалистов завода, его доля в объеме продаваемой электродной продукции на внутреннем рынке России составляет около 20%. Завод производит широкий ассортимент электродной продукции, продукция экспортируется в ряд стран ближнего и дальнего зарубежья.Завод модернизирует и интенсифицирует производственные мощности, формирует дилерскую сеть и сеть собственных региональных складов. Работа в этом направлении обеспечила 40% -ный рост производства готовой продукции в 2006 году по отношению к 2005 году. ОАО «Лосиноостровский электродный завод» включено в международный каталог производителей электродов, продукция которых производится в соответствии с европейскими стандартами качества.
Три ведущих отечественных производителя электродов – Новосибирский, Новочеркасский и Челябинский электродные заводы – находятся под управлением Энергопром Менеджмент.Примечательно, что более 50% своей продукции «Энергопром Менеджмент» поставляет на мировой рынок. Усилиями управляющей компании на заводах НовЭЗ, НЭЗ, ЧЭЗ проводится комплексная модернизация и реконструкция мощностей, ведется строительство новых мощностей по выпуску перспективных видов продукции, способных обеспечить потребности металлургических предприятий. использование новейших способов производства металлов, а также растущий мировой спрос на углеграфитовые изделия (см. http: // www.energoprom.ru/about).
В целях оптимизации и координации сбытовой политики несколько российских электродных заводов в 2001 году объединились в Ассоциацию «Углеграфит». Инициатором создания объединения выступила компания «Энергопром». Членами ассоциации являются: ОАО «Новочеркасский электродный завод», ЗАО «Новосибирский электродный завод», ОАО «Челябинский электродный завод», ЗАО «Сибирский антрацит», а также ОАО «Углеродпром», ОАО «Уральский электродный институт» и ФГУП «НИИГрафит». В рамках ассоциации представители электродных заводов достигли договоренности о специализации предприятий.НЭЗ сосредоточился на производстве графитовых электродов для черной металлургии, НовЭЗ – для алюминиевой промышленности, Челябинский завод – на производстве блоков доменных печей. Это подразделение преследовало задачу помочь фабрикам более оптимально загружать свои мощности и совместно привлекать инвестиции (см. Http://www.metaltorg.ru/analytics/publication/index.php?id\u003d1011).

По вопросу экспортно-импортных операций на российском рынке сварочных электродов следует отметить, что в последние годы наблюдается тенденция к увеличению импортных закупок сварочных электродов и снижению объемов экспорта.Так, в 2006 г. объем импорта сварочных электродов превысил аналогичный показатель 2002 г. почти в 3 раза. Объемы экспорта за тот же период снизились в 2,8 раза (по материалам исследований компании «InfoMine Research»). Среди экспертов электродного рынка высказывается мнение, что в связи с ориентацией мирового производства электродов на удешевление себестоимости, наблюдаемой в настоящее время, российская продукция на мировом рынке вполне может составить конкуренцию основным экспортерам – Китаю, Индия – по соотношению цена-качество.В ближайшее время можно ожидать активного роста экспорта российских электродов на уровне 15-20% в год (см. Http://www.renova.ru/press/publications/1022/print/).
Однако более распространенным остается мнение, что качество электродов, производимых российскими предприятиями, в некоторых случаях остается неадекватным международным стандартам. Проблема качества сварочных электродов очень актуальна для российских производителей и тесно связана с необходимостью модернизации оборудования, а также применяемой технологии производства на предприятиях отрасли.Доли различных групп потребителей с точки зрения востребованности продукции сварочных электродов и их привлекательности для производителей электродов распределяются следующим образом: наибольшую долю занимают крупные машиностроительные заводы или ассоциации, дилеры – 30-40%; строительные, торговые компании и т. д. следуют с небольшим отставанием. – 25-30%; Далее идут «мелкие» покупатели, характеризующиеся высокой текучестью и волатильностью – 15-25%, а также ряд потребителей, получающих разовые поставки (см. Рисунок 4) (см. Http: // www.msouz.ru/novost_one_new.asp? инд = 3834).

Рисунок 4.
Структура потребительского рынка по привлекательности для производителей сварочных электродов,%

Современный рынок сварочных электродов предлагает множество решений для сварочных работ с различными металлами. Сегодня стали абсолютно доступны любые марки не только отечественных производителей электродов, но и зарубежных. Востребованы электроды таких марок, как ОК ЭСАБ «Эсаб» (Швеция), Phoenix K 50 и Kessel 5520 Mo «Klockner» (Германия), LB 52U «Kobe Steel» (Япония).

Шведские электроды с основным типом и низким содержанием водорода OK 53.70 заслужили хорошую репутацию благодаря своему высокому качеству. Эти электроды были специально разработаны для односторонней сварки трубопроводов. Также они используются для сварки с другими ответственными конструкциями из низкоуглеродистых и низколегированных сталей.

ОК 53.70 дает большую глубину проплавления, с его помощью получается ровный шов с легко удаляемым шлаком. Эта марка электродов гарантирует качественную сварку корневого шва с образованием обратного валика.Система шлака достаточно хорошо сбалансирована, чтобы обеспечить стабильное горение дуги и легкую сварку во всех пространственных положениях … Эта марка шведских электродов хорошо зарекомендовала себя при работе на Крайнем Севере благодаря тому, что она сохраняет высокие механические и ударные свойства. при низких температурах.

Электроды

ОК 53.70 предназначены для сварки и ремонта корневого слоя стыков труб из сталей со стандартным пределом прочности на разрыв до 588 МПа (API X 70) или заполнения и облицовки слоев стыка труб из сталей со стандартным пределом прочности на растяжение. прочность до 529 МПа (API X 60).

Применение электродов данных марок разрешено на территории России ВНИИСТ и ВНИИГАЗ.

Для сварки низколегированных высокопрочных сталей используются электроды с основным типом ОК ЭСАБ 74.70. Их назначение – односторонняя сварка трубопроводов и других ответственных конструкций из сталей классов прочности по API X 60, X 65, X 70. Эти электроды также показали отличные результаты при работе на Крайнем Севере.

С помощью ОК 74.70 осуществляется сварка и ремонт заполняющих и облицовочных слоев шва стыков труб из сталей с нормативным пределом прочности от 539 МПа до 588 МПа (APIX 70).Использование электродов данной марки одобрено ВНИИСТ.

German Phoenix K 50 – основной тип покрытых электродов для односторонней сварки труб. Отличаются высокими сварочными характеристиками при формировании корневых слоев шва при сварке трубопроводов. Электроды этой марки привлекают качественным переносом металлических капель, чистым химическим составом и высокой прочностью при температуре -30 ° C (-22 ° F).

Применение К 50 рекомендуется для сварки труб, котельного железа, трубопроводов, мелкозернистой конструкционной стали.Такие электроды были разработаны специально для сварки корневого слоя шва неповоротных стыков труб из сталей стандартной прочностью до 588 МПа и сварки заполняющих и облицовочных слоев шва стыков труб из сталей с стандартная прочность до 530 МПа. Phoenix K 50 одобрен ВНИИСТ.

Высококачественные электроды Kessel 5520 Mo с основным типом покрытия для сварки низколегированных высокопрочных сталей предназначены для односторонней сварки трубопроводов и других ответственных конструкций из сталей классов прочности по API X 60, X 65, Х 70.

Такие сварочные электроды используются при ручной дуговой сварке ответственных конструкций из углеродистых и низколегированных сталей со стандартной прочностью до 640 МПа. Электродом Kessel 5520 Mo можно выполнять качественные сварные швы даже в такую ​​погоду. условия, при которых другие электроды не гарантируют хорошего качества сварки. Электрод сваривает швы, заполняющие и облицовочные слои стыков труб из сталей со стандартным пределом прочности на разрыв от 539 МПа до 588 МПа (APIX 70). Его использование одобрено ВНИИСТ.

Японские электроды LB 52U «Kobe Steel» относятся к низководородной группе с основным типом покрытия. Они востребованы при дуговой сварке труб, морских конструкций и конструкций, таких как резервуары, которые требуют односторонней сварки. LB 52U обеспечивает превосходный сварной металл и аккуратный гребневой шов без дефектов при сварке с одной стороны стыка.

Электроды этой марки обладают высокой вязкостью, стойкостью к растрескиванию, стабилизацией дуги и проплавлением. Б 52У «Кобе Стил» применяется для сварки и ремонта корневого слоя шва неподвижных соединений труб из сталей со стандартным пределом прочности на разрыв до 588 Н / мм². Также с помощью этих электродов сваривают и ремонтируют заполняющий и облицовочный слои шва неповоротных стыков стальных труб со стандартной прочностью на разрыв до 530 Н / мм². LB 52U также востребован при усилении сварных швов обратной стороны.

Одно из главных условий получения качественного и правильного сварного шва – качественные, правильно подобранные электроды для сварки инверторным аппаратом.
На современном рынке очень большой ассортимент для электросварки.Все они различаются по типу, материалу покрытия и другим характеристикам. Ниже предлагаем вам ознакомиться с доступными вариантами и выбрать наиболее подходящий.

Виды электродов для сварки инверторным аппаратом

Все существующие электроды для электросварки делятся на расходные и неплавящиеся. В основе расходуемого электрода лежит катанка из металлической проволоки, покрытая снаружи специальным покрытием. Благодаря покрытию сварочная дуга может гореть стабильно, а также покрытие обеспечивает хорошую защиту шва от газа и шлака.

Электроды, предназначенные для сварки сталей неопределенного состава, а также меди, нержавеющей стали, чугуна и других металлов, изготавливаются из определенного сплава. При аргонной сварке чаще всего используются неплавящиеся виды электродов.

Рабочие сварочные элементы доступны разной длины и диаметра. Длина электрода зависит от легирующих свойств катанки изделия и может составлять от 30 до 45 сантиметров.
Вне зависимости от диаметра широко используются все типы электродов. Единственное исключение – диаметр 1,6 мм. Этот тип электрода доступен только по запросу. Они практически не используются российскими сварщиками.

Наиболее распространенная классификация всех существующих электродов – по назначению. По этому параметру электроды делятся на:

Предназначен для работы с элементами из углеродистых и низколегированных сталей.
Для работы с высокопрочными жаропрочными сталями.
«Электроды из нержавеющей стали» – для работы с высоколегированной сталью.
«Электроды для алюминия».
Электроды для сварки медных деталей и изделий на их основе.
Электроды чугунные.
Для ремонта и наплавки.
Для сварочных работ с металлами, состав которых не определен.
Также довольно часто используется классификация по типу покрытия электродов. Существует четыре основных типа покрытий, но широко используются только два.

Электроды основного типа.

Свое название они получили из-за того, что стержень электрода имеет так называемое основное покрытие. Наибольшей популярностью среди основных электродов пользуется модель SONI 13/55. Использование этого продукта позволяет получать швы высокого качества с высокой ударопрочностью, прочностью и пластичностью. К тому же на таких швах редко появляются хрустальные трещины, они плохо «стареют». Электроды SSSI обычно используются для сварки в тяжелых условиях и для изделий, которые будут работать в суровых условиях.К недостаткам электродов этого типа можно отнести удлинение дуги, неустойчивость покрытия к влаге и ржавчине, появление накипи или масла в области сварного шва. В совокупности все это может привести к появлению микропор. Кроме того, основные электроды могут работать только с обратным постоянным током.

Второй тип электродов – с рутиловым покрытием.

Эти изделия используются для сварки деталей из металла с низким содержанием углерода.Чаще всего используется марка МП-3. Эти электроды отличаются хорошими технологическими качествами, а именно:

Электрическая дуга горит постоянно как на постоянном, так и на переменном токе.
Чугун практически не распыляется.
Качественные швы в любом положении свариваемых деталей.

Шлак очень хорошо отделяется.
Электроды можно использовать для обработки грязных и ржавых поверхностей.
Готовые сварные швы имеют очень хороший внешний вид, без пор и пустот.
Хорошо подходит для сварки деталей из низкоуглеродистой стали.

Выбор электрода с учетом материала и режима работы

Правильный выбор электрода для работы, конечно, играет большую роль, однако, кроме того, вам еще нужно знать, с какой полярностью и силой тока вам нужно работать в каждом конкретном случае. Практически все инверторы в своей работе используют постоянный ток. Работая на постоянном токе, электродная часть может быть подключена несколькими способами, а именно:

Если полярность прямая, электрод подключается к «минусу», а часть – к «плюсу».

При работе с обратной полярностью, наоборот, электрод подключается к «плюсу», а заготовка – к «минусу».

В процессе работы на прямой полярности больше тепла по сравнению с такими же значениями при работе на обратной полярности. Следовательно, работа с обратной полярностью имеет смысл в следующих случаях:

Если необходимо сваривать тонколистовой металл. Поскольку температура на обратной полярности ниже, заготовка не пригорит.

При работе с высоколегированной сталью. «Возврат» в этом случае значительно снижает вероятность перегрева детали.

При прямой полярности лучше работать с массивными заготовками, которые необходимо хорошо прогреть для качественной сварки.

В сварке есть три основных характеристики, которые напрямую влияют на качество работы:

Сварочный ток.
Диаметр заготовки.
Толщина рабочего материала.

Для начала нужно определиться с зависимостью диаметра рабочего элемента и толщины детали, с которой нужно работать.Например, сталь толщиной до 1,5 мм. его почти всегда готовят с помощью полуавтомата или аргонной сварки.

Электродуговая сварка для этого практически не применяется. Сталь толщиной 2 мм сваривается электродами диаметром 2,5 мм. Для сварки стали толщиной 3 мм потребуются электроды диаметром 2,5-3 мм.

Для стали толщиной 5 мм – электрод 3,2-4 мм.
В работе с изделиями толщиной от 6 до 12 мм. используются рабочие элементы диаметром 4-5 мм.
Для стали толщиной более 13 мм. используйте электрод 5 мм.

Важный момент: чем больше диаметр электрода, тем меньше рабочая плотность тока. В результате дуга начинает колебаться, «блуждать», менять длину и вести себя нестабильно. Из-за этого глубина шва уменьшается, а ширина наоборот увеличивается. В большинстве случаев производители таких электродов указывают на упаковке требуемые значения сварочного тока. Если производитель не предоставил необходимую информацию, необходимо ориентироваться на следующие показатели:

Для электрода диаметром 2 мм требуется ток 55-65 А.
Для электрода шириной 2,5 мм – 65-80 А.
Для 3 мм – 70-130 А.
Для 4 мм – 130-160 A.
Для 5 мм – 180-210 A.
Для 6 мм – 210-240 A.

Исходя из вышесказанного, при выборе рабочего элемента определенного диаметра для сварки необходимо в первую очередь обращать внимание на толщину заготовки. Если вы будете работать с тонким металлом электродом большого диаметра или превысите сварочный ток, то в шве будут поры.

Маркировка сварочного электрода

Самая распространенная торговая марка среди зарубежных производителей электродов – ЭСАБ.

Название каждого типа электродов этой марки начинается с ОК, за которым следует 4-значное обозначение. На рынке существует множество вариаций, но наиболее распространенными являются следующие:

ОК 46.00 – электрод практически аналогичен по свойствам марке МР-3. Отлично подходит для низколегированных и углеродистых сталей. Подходит для приложений переменного и постоянного тока. Обеспечивает качественный шов.

ОК 48.00. Предназначен для работы с критическими конструкциями.Работают только на постоянном токе.

ОК 61.30 и ОК 63.20. Применяется для сварки «нержавейки» практически всех марок. Перед покупкой обязательно поинтересуйтесь у продавца, подходят ли эти электроды для работы с той или иной маркой нержавеющей стали.

ОК 68.81. Отличная модель. Отлично подходит для сварки сталей неопределенной формы и трудно свариваемых деталей.

ОК 92.60. Электроды для чугуна и для соединения чугунных деталей с разными типами сталей.

ОК 96.20. Алюминиевые электроды.

Критерии выбора подходящих электродов

Проанализировав все вышесказанное, можно определить несколько основных моментов, на которые необходимо обратить внимание при выборе электродов для электросварки. Во-первых, нужно точно определить, с каким металлом вам предстоит работать, и выбрать электрод по типу металла. Если приходится работать с ответственным дизайном, лучше не экономить и покупать продукцию известного производителя.Например, упомянутые выше шведские продукты очень хорошо себя зарекомендовали. При сварке деталей из углеродистой стали убедитесь, что поверхность остается чистой. Если он замасленный, влажный или ржавый, следует приобрести электроды с рутиловым покрытием. Если вам предстоит работать на ответственных конструкциях, рекомендуется использовать рабочие элементы с основным покрытием.

Однако в любой ситуации нужно помнить, что все изделия требуют предварительной подготовки поверхности. Кроме того, необходимо точно определить толщину заготовки, на основании которой подобрать оптимальный сварочный ток.
К процессу отбора нужно подойти максимально ответственно. Если электроды подобраны правильно, то даже самый дешевый инвертор сваривает практически любой металл на высшем уровне.

Концерн ESAB , Швеция, является одним из старейших производителей сварки и резки в мире. Его история восходит к 1904 году, когда основатель компании Оскар Челлберг получил патент на электрод с покрытием для электродуговой сварки. Теперь его инициалы – ОК – нанесены на все сварочные материалы компании ESAB . ЭСАБ имеет 40-летний опыт работы на российском рынке и все эти годы поставляет свою продукцию на многие предприятия нефтегазовой, судостроительной, машиностроительной, химической и многих других отраслей.

VICTOR TECHNOLOGIES (торговая марка ESAB)

VICTOR TECHNOLOGIES – семейство премиальных брендов из США

Имея более чем 100-летнюю историю, Виктор объединил ряд премиальных предприятий в области резки, сварки и пайки металлов, а также в газовой промышленности.

В ближайшем будущем ассортимент ESAB будет расширен продуктами Victor Technologies … Некоторые из новых продуктов будут носить название ESAB , а некоторые сохранят текущее название, но с учетом нового владение брендом.

STOODY (торговая марка ESAB)

STOODY – глобальный новатор и ведущий производитель сварочной проволоки и сварочных электродов, используемых для борьбы с различными видами износа и коррозии. STOODY разработала полный ассортимент сварочных материалов для удовлетворения особых требований клиентов в области наплавки твердым сплавом.Широкий ассортимент продукции STOODY включает сплавы железа, никеля, кобальта, вольфрама, хрома, ниобия и ванадия.

ОЭЗ (ЭСАБ)

Сычевский электродный завод , имеющий полувековой опыт производства электродов для различных отраслей промышленности, является современным и стабильно развивающимся предприятием, обеспечивающим самые высокие показатели качества и уровень потребительских характеристик продукции.

Традиционное стремление компании к качеству – ключ к нашему прогрессу.Сычевский электродный завод, созданный в 1957 году на базе межрайонного моторно-ремонтного цеха, в 1992 году стал акционерным обществом, затем в 1999 году отдельное предприятие Сычевский электродный завод преобразовано в филиал ООО «Мострансгаз» Сычевский электродный завод, а в 2000 году – в ООО «Сычевский электродный завод». Последнее изменение статуса предприятия произошло в марте 2011 года – завод вошел в состав концерна ESAB, мирового лидера по производству сварочных материалов и оборудования для сварки и резки.

LEZ

Компания включена в международный каталог производителей электродов , продукция которых производится в соответствии с европейскими стандартами качества. Электроды производства Лосиноостровского электродного завода сертифицированы Госстандартом России, НАКС, Госатомнадзора РФ, имеют свидетельство УКРСЕПРО (Украина), БелСТ (Беларусь), Морского Регистра, Речного Регистра, Гигиеническое свидетельство РФ. «TUV» (Германия), что подтверждено соответствующими сертификатами, в том числе сертификатом качества производителя на соответствие ГОСТ РФ.Предприятие продлило сертификат соответствия системы менеджмента качества ISO 9001: 2000.

HYUNDAI WELDING

Hyundai Welding Co., LTD – компания, которая предлагает своим клиентам передовые решения в области сварочных технологий … На протяжении 40 лет Hyundai Welding поддерживает самые быстрорастущие отрасли в Южной Корее: автомобилестроение, судостроение, морские платформы. & Строительный сектор. Hyundai Welding вступил в партнерские отношения с такими компаниями, как Hyundai Motors и Kia Motors, чтобы помочь повысить производительность и сократить расходы за счет разработки и внедрения оптимальных технологических решений для сварки. Кроме того, Hyundai Welding тесно сотрудничает с крупнейшими в мире верфями и заводами тяжелого машиностроения, а именно Hyundai Heavy Industries, Samsung Heavy Industries, DSME, Doosan Heavy Industries, что позволяет нам разрабатывать конкурентоспособные и новые решения в области сварочных технологий.

KOBELCO

Kobe Steel, Ltd. – одна из ведущих японских металлургических компаний. В сегменте нержавеющей стали компания занимает 4-е место в Японии. Помимо основной деятельности, компания также производит изделия из алюминия и меди, строительную технику.Компания работает под брендом Kobelco.

Амурский кабельный завод

Амурский кабельный завод – единственное предприятие в Дальневосточном регионе, обеспечивающее кабельно-проводниковую продукцию различных отраслей промышленности, работающее как на российском, так и на внешнем рынках. В настоящее время завод производит широкий ассортимент кабелей и проводов – более 8 тысяч типоразмеров, в том числе экспортного, тропического и негорючего исполнения.

Череповецкий завод сварочных материалов

Технология производства сварочной проволоки на ООО «ЧЗСМ» позволяет производить качественный продукт для сварки металлоконструкций с минимальным процентным разбрызгиванием металла при больших токах (высокая производительность).Производство сварочной проволоки существующего качества стало возможным благодаря интеграции ООО «ЧЗСМ» в производственный цех стальной проволоки.

Сварог

С 2007 года Сварог поставляет на российский рынок различное сварочное оборудование и генераторы, а также комплектующие и аксессуары к ним. Техника «Сварог» уже зарекомендовала себя более чем ста тысячам конечных потребителей в промышленности, строительстве, на транспорте и в быту.

Optrel

Sperian Protection Group – ранее Bakou-Dalloz – специализируется на разработке, производстве и продаже средств индивидуальной защиты (СИЗ).Группа Sperian Protection Group, состоящая из 6000 профессионалов по всему миру, использует свое технологическое лидерство для постоянного развития и предложения комплексных и инновационных решений для защиты людей на рабочем месте.

SpecElectrode – крупнейший разработчик, производитель и поставщик высококачественных сварочных электродов Торговая марка «СпецЭлектрод», г. в том числе для сварки, наплавки и резки металла различного назначения. Доля компании в объеме реализованной продукции на внутреннем рынке страны составляет более тридцати двух процентов.

СпецЭлектрод – крупный производственный комплекс с полным технологическим циклом, начиная с подготовки сырья; сложные порошковые покрытия; плавление жидкого стекла; разделочный цех, заканчивающийся непосредственно производством электродов. SpecElectrode производит самый широкий ассортимент сварочных электродов (более 200 марок) среди предприятий стран бывшего СССР. Продукция СпецЭлектрод экспортируется во многие страны мира и СНГ.

Мощности завода позволяют получать продукцию высочайшего качества. Сегодня они составляют более 100 тысяч тонн электродов в год. Научный коллектив компании СпецЭлектрод постоянно работает над созданием новых марок сварочных электродов для различного промышленного назначения, а также улучшением сварочных и технологических свойств существующих марок. Многие из самых популярных электродов – разработки специалистов Special Electrode. Это марки ОЗС-12, ОЗС-6, ОЗС-4, МР-3С, СЕОК-46, СЕОК-48, СЕЛБ-52У, МР-3, ОЗЛ-6, ОЗЛ-8, и другие марки. электроды.На заводе внедрена система качества, соответствующая международному стандарту ISO 9001: 2010. Устойчивый спрос на качественные сварочные электроды позволяет «СпецЭлектроду» осуществлять их серийное производство и гарантировать потребителям надежные долгосрочные поставки и высочайшее качество. География поставок сегодня охватывает не только территорию России: Москву и Московскую область, регионы Урала, Сибири и Дальнего Востока. Продукция «СпецЭлектрод» пользуется спросом у потребителей электродов в Армении, Беларуси, Казахстане, Кыргызстане, Узбекистане, Туркменистане, странах Балтии, Молдове.Наша продукция закупается в Турции, Китае, Монголии, Иране, Чехии, Сирии, Индии, Сербии, Австрии, Алжире.

Сварочные электроды поставляются оптом и мелкими партиями со складов в Москве, Московской области, Екатеринбурге и Санкт-Петербурге на гибких условиях. Поставки осуществляются в 20-тонных ж / д контейнерах, вагонах, автотранспортом.

Завод имеет давние традиции работы с заказчиками и широко известен как один из основных поставщиков сварочных материалов для нефтегазовой промышленности, черной и цветной металлургии, авиационной промышленности и космонавтики, сельского хозяйства и промышленности. комплекс обороны, в т.ч.судостроение, РЖД.

Электроды СпецЭлектрод широко применяются в промышленном и гражданском строительстве, в легкой, пищевой, химической и других отраслях промышленности. Продукция «СпецЭлектрод» использована при реконструкции монастырей Оптина Пустынь и Алатырь. Получила отличную оценку при строительстве моста через Керченский пролив и моста через Волгу на трассе Нижний Новгород – Шахуня – Киров, Богучанская ГЭС и Бурейская ГЭС, при восстановлении Саяно-Шушенской ГЭС, в период проведения работ. строительство олимпийских объектов в Сочи, объектов Универсиады в Казани и Красноярске, космодромов в Свободном, Плесецке и Байконуре, а также в Москве по реконструкции и строительству МКАД, третьего и четвертого транспортных колец. Широкий ассортимент, традиционно высокое, стабильное качество сварочных материалов, доступные цены, внимательное и бережное отношение к покупателям – вот незыблемые правила компании «СпецЭлектрод».

FAD: Журналы

«Непрерывное и проточное впрыскивание вольтамперометрическое определение серебра (I), ртути (II) и висмута (III) на электроде с объемной модифицированной графитовой трубкой»
Электроанализ 1997 Том 9, Выпуск 6 Страницы 481-489
Руидонг Йе, Су Бенг Кху *

Аннотация: При непрерывном поточном анализе (CFA) раствор образца [дюйм 0.1 М ацетатную среду с pH 4,32, 0,1 М фосфатный буфер с pH 5,5 и буфер Бриттона-Робинсона с pH 3,8 для Ag (I), Hg (II) и Bi (III) соответственно] прокачивали через проточную ячейку для 10 мин при 1,41 мл / мин, накопление проводили в условиях разомкнутого контура. Затем деаэрированный раствор для отгонки [70 мМ HCl, 75 мМ KBr, 100 мМ HNO3 и 1 М HCl для Ag (I), Hg (II) и Bi (III) соответственно] пропускали через ячейку со скоростью 0,72 мл / мин. и через 15 с был приложен соответствующий потенциал осаждения [-0.15, -0,20 и -0,50 В (относительно Ag / AgCl) для Ag, Hg и Bi соответственно] в течение 15 с. Наконец, проводилась анодная зачистка дифференциальным импульсом, начиная с потенциала осаждения металла. Для FIA (подробности приведены), анализ был очень похожим, и калибровочные графики (CG) были линейными для 5 нМ – 1 мкМ-Ag (I), 10 нМ – 2 мкМ-Hg (II) и 100 нМ – 5. мкМ-Bi (III). Соответствующие пределы обнаружения (DL) составляли 0,18, 1,9 и 9,5 нМ; RSD (n = 6) составило 2,53-10,5, 2,57-5,77 и 5,97-7,9% соответственно. Для FIA CG были линейными от 50 нМ до 5 мкМ-Ag (I), от 100 нМ до 5 мкМ-Hg (II) и 5-50 мкМ-Bi (III), а соответствующие DL составляли 11, 20. и 1200 нМ.RSD (n = 6) составили 6,32, 6,44 и 7,9% соответственно.

Серебро (I) Меркурий (II) Висмут (3+) Море Моча Вольтамперометрия Электрод Электрод

% PDF-1.

ò3N7zI% Jaa *% I% l7 ݪ AWPVm-`@ I & ٪ [l6Ã $ JH $ Cm | ɹOvg`Ui $ l0aǾVA I4m “F; H $ vlU? V $ ;.p ݶ 0 МПИ% ֓ m Ն H & mA h’l6 mI% @B Eml $ a F6l0klPNI / m $ L} VmI / Kml4Nvmô / CaGaVm۱% ꭽwXC ۻ mI I6Ŷ: JMl; ma ݷ ASa0En% k $ hv ݑ nl0p “+ d [nAoI & g0 ˆG`Ho KIl6-H% m $ MaKl60ШH & mmvk ꒆ l0h {vmWIS ݷ TE $ Mv + g? A6I8zHG ޭ llw_J6aBý ] m ~ USSQXA m ݷ nB] $ I {`/ mZA6E; ÓamtxkHЂP @ # nmI gaU * DQ28l_m @ I $ aU6 ސ мА R “H & mumTc8E # (DP mi + GWC # nB9 # u 鵿 F ݾ; R

Pl7 J | Q} {% 8 zmS – $ a .C0B “Hhim6 ~ amU9H’ | PH6? I [m Q gZ б.! IaFP8l6l $ vV $ #PBni! _TRTm ؊ Ö9 “8_A% I $$ mdt bb {GD $ & uI% V X 볽 {N | 7vJAmI ݮ “” QjϨH? * Mo1; Ñ4) $ l`A $ mE88; al-V $ vWi0aL1Dwl) T * ނ I%: t 697-yYXV۴AM ~ -% M ۆ “Vw` َ A 6- $ L6i, VUKI $ l0Nr ([ $ LE IRL6mev “oI oUJVaÿmiI I * m; S4XPO`I ۝ uJA $ o * Mi1n & ݻ mBITJR0 ##; 7 $ AJH # | ~ I $ .O ݽ H $ 8 $ * ZH0b ت I% Tt E “a $! UI $ {# ެ7 wtH $ * I% I! F * $ t I $ I $ JUBIvwHmI Ij5I * mnI + mtA $ Ih * | I $ nJqSIû $ $$ xACl9k ׊ AKmI $ TJ $ mƇƇ + wwa $ JZȖo # { #u} AZ ПИ [mJIRI $ D -! ($ M XbqϤA & ݸ H $ IRI- & o0zRnRSH 1mA-RH = & 65Ǧ * Im $ I * TNHpIl ~ ahÏlP $% I $ LFm i # C ) zm AI $ TmAÔIPI $$ 6 {Z`D: * m% I * 3Ian0J + u $$ 6 ݷ zA% UI $ Gmv91! m $ IvI $ IjVa%. oe * 6n) HIC L $ I a ؤ nPe “4IUai-6dtI *! mjW & ˆ @ Bd + (Jm (QRTa ֒} F8d} NMw \ Ua $ ѹ $ L $ Twj! W ګ T’a4mU! ҤwwtK5THi $ RKlU * Wl H & SluIAoI * KKm $ / \ w? T HB! I ֒ Q ߻ V Tm ך zTI $ _mp}) + lZ $ e) P7 “Al6ICI% T $ X; yB”: 5 “uDJ>% l43Ft> D! CW> 4fB! #A l3BpTHm & K # $ T ݉ a NΑr $ C $$ L \ U $ 8

Мембраны | Бесплатный полнотекстовый | С-конец перилипина 3 демонстрирует отчетливое связывание липидов на интерфейсах фосфолипид-масло-водный раствор

1.Введение

Липидные капли (LD) представляют собой очень сложные динамические органеллы, которые имеют решающее значение для регуляции клеточной энергии. Эти органеллы обнаруживаются почти во всех типах клеток, но наиболее заметны в адипоцитах. Размер, распределение, а также липидный и белковый состав каждой LD различаются в зависимости от типа клеток. ЛД похожи по структуре на частицы внеклеточных липопротеинов, с нейтральным липидным ядром (три-, ди-, моноацилглицерины и сложные эфиры стерола), окруженным фосфолипидным монослоем [1,2]. Конкретный состав этого гидрофобного ядра зависит от специализированной функции типа клеток, например, звездчатые клетки содержат ЛД, заполненные ретиниловыми эфирами [3,4]. Ядро LD и состав монослоя сложны и не совсем установлены из-за сложности выделения отдельных LD [2,5,6,7,8,9], а также наблюдения, что существуют различные популяции LD в одной клетке [10, 11]. Похоже, что консенсус состоит в том, что монослой LD содержит преимущественно фосфатидилхолин (PC), но также наблюдаются значительные количества фосфатидилэтаноламина (PE) и небольшие популяции других липидов [2,5,6,7,8,12,13,14 ].LD образуются из эндоплазматического ретикулума (ER), где синтезируются нейтральные липиды; линзовидные структуры (~ 40-60 нм) начинают отпочковываться от внешнего листка ER [15]. Это образование хрусталика очень чувствительно к составу мембраны ЭР и связанным с ним белкам, особенно к сейпину и прометину [16,17,18]. Новая убедительная модель биогенеза LD предполагает, что LD образуются посредством разделения фаз жидкость-жидкость (LLPS), при этом жировая линза с ядрами рассматривается как конденсированная фаза, свободные нейтральные липиды внутри ER как разбавленная фаза, а мембрана ER как растворитель [19,20]. Эта структура позволяет отрастанию LDs управляться равновесной концентрацией триглицеридов, потому что среда мембраны ER и окружающие белки сами по себе не могут полностью объяснить энергетику накопления триглицеридов. Триацилглицерин и сложные эфиры стерола образуются посредством ацилирования и диспергируются между листочками ER, пока не достигнут критической концентрации и не начнут отрастать наружные листочки ER [15,17,21,22]. После биогенеза некоторые LDs остаются рядом с ER и «стыковываются» с мембраной ER посредством неизвестного механизма, но большинство распространяются по клетке посредством неслучайного процесса [17,23].Из-за структурной сложности и неоднородности LD внутри клетки крайне важно понять, как отдельные липидные компоненты, такие как состав липидного монослоя и физико-химические свойства, влияют на функцию LD и его способность привлекать связывающие белки. на два общих класса: сорт I и сорт II. Связывающие белки класса I LD происходят из ER и содержат структуру шпильки плюс положительно заряженный домен [24]. Белки, связывающие LD класса II, обычно содержат более сложные физические структуры (например,g., амфипатические α-спирали) и рекрутируются из цитозоля на поверхность LD. Некоторые из этих белков класса II остаются тесно связанными с LD, тогда как другие обмениваются между LD и другими органеллами или цитозолем по всей клетке. Белки, связывающие LD класса II, имеют много общего с аполипопротеинами [24,25,26,27,28,29]; например, оба содержат длинные амфипатические α-спирали, некоторые из которых образуют пучки спиралей, которые растворимы в растворе, как обнаружено в перилипине 3 и апоЕ [30]. Аполипопротеины обычно делятся на две группы: незаменяемые и обменные.Невозможные или связанные с липидом аполипопротеины наиболее похожи на LD-связывающие белки класса II, которые остаются связанными с липопротеидной частицей. Обмениваемые аполипопротеины, такие как обмен апоЕ между кровью и липопротеиновой частицей, аналогичны обменным связывающим белкам класса II LD, которые обмениваются между клеточным цитозолем и LD [31]. Перилипины представляют собой семейство LD-связывающих белков, которые все более тщательно исследуются из-за возможна связь между перилипин-опосредованным метаболизмом липидов и метаболизмом в организме [32].Это семейство состоит из пяти представителей млекопитающих (перилипин 1–5) и является наиболее распространенным семейством LD-ассоциированных белков, экспрессируемых у людей [33,34]. Это семейство белков формируется на свободных рибосомах в клеточном цитозоле, и некоторые его члены, как известно, стабильны в водной среде [25,34,35]. Пучок амфипатической α-спирали обнаруживается на С-конце перилипинов 2, 3 и 5. Пучки амфипатической α-спирали функционируют, скрывая гидрофобные белковые остатки от водной клеточной среды. Этот пучок α-спирали имеет сходство с липид-связывающими доменами хорошо охарактеризованных аполипопротеинов, apoE и apoLp-III [36,37,38,39].В отличие от apoLp-III, этот С-концевой амфипатический пучок α-спирали, по-видимому, не требуется для нацеливания на LD. Кроме того, в этих белках также присутствует область 11-мерного повтора на N-конце, которая также может образовывать амфипатические α-спирали. Было хорошо установлено, что только этой области достаточно для нацеливания и связывания LD [23,25,29,34,40,41,42,43]. Интересно, что как С-конец перилипина 3, так и полноразмерный белок ведут себя как апоЕ в анализах DISC, что приводит к гипотезе, что перилипин 3 может обладать аполипопротеиноподобными свойствами in vitro и in vivo [42].Такое поведение предполагает, что этот амфипатический пучок α-спирали также может участвовать в связывании липидов, но его точная функция в клетках до сих пор не выяснена. Мы сообщили в Mirheydari and Rathnayake et al. 2016, что усеченный С-концевой пучок α-спирали перилипина 3 демонстрирует большую вставку в липидные монослои на границе воздух-вода по сравнению с полноразмерным белком [44]. Мы также обнаружили, что С-конец перилипина 3 показывает предпочтительную вставку в 1-пальмитоил-2-олеоил-sn-глицеро-3-фосфохолин (POPC) по сравнению с 1,2-диолеоил-sn-глицеро-3-фосфохолином (DOPC ).В этом исследовании мы расширяем нашу предыдущую работу по перилипину 3 более физиологически релевантной модельной системой. Тензиометрия висячей капли использовалась для характеристики множества аполипопротеинов и LD-связывающих белков [11,23,44,45,46,47], но в целом это недостаточно используемый метод в области белок-липидных взаимодействий. Здесь мы используем тензиометрию висячей капли, чтобы охарактеризовать перилипин 3 полной длины и усечение С-конца на границах раздела масло-фосфолипид-вода. Мы обнаружили, что С-конец перилипина 3 обладает высокой поверхностной активностью, причем предпочтение отдается ненасыщенным липидам на границе раздела масло-вода.Мы обнаружили, что добавление PE увеличивает сродство С-конца перилипина 3 к границе раздела фосфолипид-масло. Для полноразмерного белка такой зависимости от ПЭ не наблюдается. Мы также показываем здесь, что С-конец перилипина 3 имеет отличное связывание с липидами по сравнению с 11-мерной повторяющейся областью. Мы предполагаем, что С-концевой амфипатический пучок α-спирали перилипина 3 может помочь «закрепить» белок на LD после начальной локализации из области N-концевого 11-мерного повтора.

2. Материалы и методы

2.1. Очистка белка

Полноразмерные (аминокислоты 1–434, PLN3A) и укороченные (аминокислоты 187–434, PLN3D) конструкции перилипина 3 получали и хранили, как описано в Mirheydari and Rathnayake et al. 2016 [44]. Гели SDS-PAGE использовали для проверки экспрессии белка на каждом этапе хроматографии. Концентрацию белка проверяли с помощью 1-позиционного спектрофотометра Nanodrop (ND-2000), и конструкции отправляли в лабораторию протеомики Научно-исследовательского института (Cleveland Clinic Foundation) для секвенирования с помощью LC-MS / MS.Все конструкции оказались достаточно чистыми (> 85%) для биофизической характеристики.

2.2. Приготовление буфера

Буфер, используемый для всех экспериментов, был приготовлен из 150 мМ KCl, 10 мМ Трис, 0,25 мМ EDTA, 1 мМ КОН (все чистота> 99%, Sigma Aldrich) в воде, пригодной для ВЭЖХ, pH доведен до 7,20 ± 0,05. Перед использованием соли обрабатывали нагреванием при 100 ° C под вакуумом в течение не менее 24 часов [45]. Буфер хранят в экспериментальной комнате при температуре 21 ± 0,1 ° C, чтобы минимизировать изменения плотности. Плотность трех партий буфера, изготовленных в разные дни, измеряли с помощью измерителя плотности DE45 Delta Range (Mettler Toledo), и было обнаружено, что она находится в пределах 0.001 г / см ³ . Чтобы гарантировать минимальное загрязнение поверхностно-активными компонентами, свежий буфер готовили не реже одного раза в неделю.

2.3. Образование везикул

Все фосфолипиды были приобретены у Avanti Polar Lipids (Алабастер, Алабастр, США). Триолеин был приобретен в Nu-Chek-Prep (Elysian, MN, USA). Чистый липид растворяли в смеси хлороформ: метанол 2: 1 (чистота> 99%, Thermo Fisher Scientific, Уолтем, Массачусетс) в концентрации ~ 0,1 мМ для приготовления исходных липидов. Липидные пленки получали в пробирке из боросиликатного стекла путем сушки определенного объема исходного раствора (ов) липидов в токе азота.Пленки выдерживали в вакууме в течение ночи для удаления остаточных следов органического растворителя и хранили при -20 ° C. Липидные пленки регидратировали 4 мл воды, пригодной для ВЭЖХ, и встряхивали в течение ~ 30 с. После встряхивания смесь подвергали пяти циклам быстрого замораживания-оттаивания. Затем эту смесь экструдировали через фильтр 200 и 100 нм, следуя стандартной процедуре (T&T Scientific, Ноксвилл, Теннесси, США). Размер образовавшихся везикул измерялся с помощью DLS (дифференциальная сканирующая калориметрия, серия Horiba DLS 7100, SZ-100) и составлял 50–250 нм.Мы не обнаружили существенной разницы между адсорбцией липидов на поверхности масла при этих различиях в размерах.

2.4. Установка тензиометра с подвесной каплей

Установка тензиометра с подвесной каплей состоит из кюветы из боросиликатного стекла, шприца Hamilton емкостью 100 мкл, удерживаемого вертикально программируемым шприцевым насосом Legato 130 от KD Scientific, закрепленного на подставке из нержавеющей стали, камеры Pixelink PL-B776F CCD, Источник света Thorlabs, OSL1 High Intensity Fiber Illuminator и стеклянный диффузор. Все агрегаты смонтированы на линейном рельсе на вибростоле Kinetic Systems, Vibraplane 5720E-3036-21.Эта система хранится в помещении с регулируемой температурой, и каждый эксперимент проводился при 21 ± 0,1 ° C. Перед каждым экспериментом корпус протирали метанолом для удаления пыли. Шприц и кювету очищали раствором КОН, состоящим из 24 г чистой воды, 24 г КОН и 164 г этанола, с последующими по крайней мере тремя промывками деионизированной водой и, наконец, тремя промывками водой, пригодной для ВЭЖХ, и затем оставили для полного высыхания в чистой среде при 21 ° C.

2.5. Протокол адсорбции липидов

Пример одного полного эксперимента показан на рисунке 1 с пронумерованными этапами. Соответствующие номера перечислены в следующем описании. Чистый шприц Гамильтона наполняется свежим триолеином при 21 ° C, после чего прямая игла заменяется индивидуальной иглой J-образной формы. Шприц помещается в держатель шприцевого насоса и протирается метанолом. Шприц опускают в свежезаполненную кювету, содержащую 10 мл буфера. Капля объемом 5, 10 или 15 мкл образуется со скоростью 1 мкл / с.После 5–10 мин уравновешивания капель I, 4 мл буфера осторожно удаляют из кюветы и заменяют суспензией липидных везикул до конечной концентрации 0,115 мМ. После ~ 30 мин перемешивания (позволяющего липидам полностью адсорбироваться на поверхности раздела триолеина), II, буфер в кювете последовательно разбавляют по крайней мере 40 мл свежего буфера для удаления несвязанного липида. Обратите внимание, поскольку приток / отток буфера вызывает движение капель, изображения записываются, но не анализируются во время этой промывки буфера.После промывки буфера у капли есть еще 5–10 мин период уравновешивания с ее вновь образованным липидным монослоем III. Размер капли либо увеличивается, либо уменьшается для изменения упаковки липидов со скоростью 0,1 мкл / с, в / в. После расширения / сжатия капли и еще одного 5-10-минутного периода уравновешивания выбранный белок (либо С-конец перилипина 3, либо перилипин 3 полной длины) добавляется в кювету, V, до конечной концентрации 0,15 мкМ в течение 2 ч, VI.

2.6. Анализ осесимметричной формы капли (ADSA)

Форма подвесной капли зависит от баланса между силой тяжести и поверхностным или межфазным натяжением.Межфазное натяжение делает каплю более сферической, а сила тяжести удлиняет ее. Анализируя силуэт капли во времени, мы получаем точные измерения межфазного натяжения данной системы. Мы делаем изображения капли триолеина в буфере каждые 5 с на протяжении всего эксперимента. Каждый эксперимент дает около 2000 изображений; мы используем программу анализа осесимметричной формы капли (ADSA), разработанную лабораторией Neumann в Торонто, чтобы выполнить необходимые расчеты межфазного натяжения [48].ADSA предоставляет оценки межфазного натяжения на основе оптимизированного соответствия силуэта капли жидкости, определенного с помощью алгоритма CANNY [49], уравнению капиллярности Юнга – Лапласа [50,51]:

ΔP = γ (1R1 + 1R2) = ΔP0 + (Δρ) gz

где ΔP относится к лапласовскому или капиллярному давлению на поверхности капли в любой точке; γ представляет собой межфазное натяжение капли; Δρ – разница плотностей триолеина и буфера; 1R1 и 1R2 – главные радиусы кривизны в точке; g – ускорение свободного падения; z – расстояние по оси симметрии между точкой и опорной точкой, где перепад давления равен ΔP0. Воспроизводимость значений межфазного натяжения для каждой капли, которая зависит как от экспериментальной установки, так и от физической химии всех компонентов, составила ≤ 3,3 мН / м. Этот тензиометр с подвесной каплей измеряет не межфазное натяжение напрямую, а, скорее, длину капилляра λc, которая определяется следующим образом: Неопределенность межфазного натяжения, таким образом, определяется как:

(δγγ) 2 = (δλc2λc2) 2+ (δ (Δρ) Δρ) 2

ADSA может применяться только к хорошо деформированным каплям, что количественно определяется путем вычисления безразмерных чисел Неймана (Ne) [52]: в этом уравнении R0 – это радиус кривизны на вершине капли, а H – высота капли.Как правило, более крупные капли будут иметь более деформированную (удлиненную) форму, а более мелкие капли имеют тенденцию быть более сферическими. Для неподвижных капель триолеина без покрытия с относительно большим межфазным натяжением идеально подходит приблизительно 20 мкл. Добавление поверхностно-активных компонентов (например, липидов и белков) увеличивает вероятность отрыва капель, так что максимальный размер капель составляет 15 мкл. Мы обнаружили, что капли триолеина в диапазоне размеров 10–15 мкл дают достаточно деформированные капли (Ne≥0,6) и, таким образом, точные результаты ADSA (рис. 2а).Для экспериментов, в которых мы изменяем π _Lipid , нам нужно начать с меньших капель (примерно 5 мкл), чтобы гарантировать стабильность капель во время и после расширения. Когда липидный монослой добавляется к большой капле и эта капля сжимается, мы обнаруживаем, что капля достаточно деформирована. Мы также обнаружили достаточную деформацию небольших капель после добавления липидного монослоя по сравнению с чистыми масляными каплями того же размера (таблица 1). Мы обнаружили, что 5 мкл капель триолеина без покрытия недостаточно удлинены для обеспечения точных результатов ADSA по сравнению с каплями того же размера после добавления липида / белка (рис. 2b, c).Из-за этого мы измерили межфазное натяжение чистого триолеина в 150 мМ буфере KCl с использованием трех отдельных капель по 15 мкл, 38,3 ± 2,4 мН / м, и использовали это значение в качестве начального межфазного натяжения для каждого эксперимента, включающего расширение или сжатие капли.

4. Обсуждение

Привлечение и встраивание LD связывающих белков является критическим для биогенеза и функции LDs, но этот процесс полностью не изучен. На сегодняшний день существует очень мало публикаций, в которых подробно описывается взаимодействие связывающих LD белков in vitro с соответствующими модельными системами, имитирующими LD [11,23,45,46,47,56].Предыдущая работа, проведенная несколькими группами, пришла к выводу, что для перилипиновых белков область N-концевого 11-мерного повтора является доменом нацеливания и связывания LD [23,41,42,43]. Ранее мы показали, на границе раздела воздух-вода, что в контексте полноразмерного белка С-конец перилипина 3, по-видимому, не взаимодействует с липидным монослоем. Однако один только С-конец показал сильную вставку в фосфолипидные монослои на границе раздела воздух-вода [44]. Как и если этот C-концевой амфипатический пучок α-спирали, присутствующий в перилипинах 2, 3 и 5, помогает в локализации и связывании LD, остается неоднозначным. Влияние липидной композиции монослоя LD на связывание специфических доменов перилипина 3 было неизвестно. Здесь мы используем perilipin 3, чтобы пролить новый свет на взаимодействие этого C-терминального домена с физиологически релевантными модельными системами LD.

4.1. Ненасыщенность липидной ацильной цепи способствует связыванию перилипина 3 и вставке монослоя в интерфейс LD

Недавние данные моделирования молекулярной динамики предполагают, что в монослоях LD могут быть «пробелы», которые открывают внутреннее гидрофобное ядро ​​LD для LD-связывающих белков [57 , 58].Взаимодействие нейтрального масла с фосфолипидным монослоем LD может способствовать связыванию определенных белковых доменов или аминокислотных остатков. Увеличение ненасыщенности фосфолипидов может способствовать большей текучести в монослое LD и, таким образом, большему количеству взаимных пересечений триолеина из-за согласования ацильных цепей олеиновой кислоты в монослое PC и триацилглицерина внутри LD. -длина белка и C-концевой домен перилипина 3 показали большую вставку в более насыщенные монослои POPC [44], в противоположность тому, что мы находим здесь.В монослойной системе Ленгмюра на границе раздела воздух-вода масло (триолеин) отсутствует. Наши наблюдения, таким образом, предполагают, что перилипин 3 значительно взаимодействует с триолеином, возможно, за счет взаимного пересечения триолеина в более жидком монослое. Важность триолеинового ядра также поддерживает тензиометрию висячей капли как более подходящую модельную систему для изучения взаимодействий LD-белок. Мы также показываем, что Δπ _MAX , которая является мерой сродства монослоя белка к монослою DOPC, значительно выше. чем Δπ для белка только на масляной границе (~ 6 мН / м для С-конца и ~ 7 мН / м для перилипина 3 полной длины, что показано красными точками данных на Фигуре 4).Это означает, что связывание перилипина 3 как с С-концом, так и с полноразмерным белком является кооперативным [45] для монослоя DOPC. Однако C-конец, по-видимому, не показывает кооперативную вставку для монослоя POPC. Липидный монослой с DOPC, но не с POPC, способствует связыванию и встраиванию белка на границе раздела масло-фосфолипид. Это контрастирует с нашей предыдущей работой по доменам пучка α-спиралей аполипопротеинов apoE 3 и apoLp-III, которые не проявляют значительной кооперативности [46] ни с частично, ни с полностью ненасыщенными липидами.Из представленных здесь данных мы не можем исключить возможность того, что длина ацильной цепи также играет роль во взаимодействии перилипин-липид. Для перилипина 3 или других перилипинов такой специфичности не наблюдалось, но могут потребоваться дальнейшие исследования.

4.2. PE способствует привлечению связки C-концевой α-спирали перилипина 3 к LD, но не к белку полной длины

Добавление 30 мол.% POPE к монослою POPC увеличивает Δπ _MAX (~ 10 мН / м), и MIP (~ 8 мН / м) для домена пучка амфипатической α-спирали.Напротив, перилипин 3 полной длины не различает фосфолипиды с одинаковым составом ацильной цепи, но с различной головной липидной группой. Это наблюдение предполагает, что в контексте полноразмерного белка С-концевой домен перилипина 3 может не взаимодействовать напрямую с фосфолипидным монослоем на границе раздела липид-масло. Это будет следовать нашим предыдущим результатам в монослоях Ленгмюра на границе раздела воздух-вода, где мы наблюдали, что C-конец имеет значительно более высокий MIP, чем полноразмерный белок, что явно указывает на то, что C-конец не участвует в связывании липидного монослоя и вставка в этом конкретном случае [44].Однако, поскольку полноразмерный белок имеет более высокие Δπ _MAX и MIP на границе липид-масло, просто нет зависимости от PE, возможно, что C-конец все еще участвует в распознавании LD и начальном связывании. Тем не менее, в контексте полноразмерного белка не наблюдается конечного эффекта липидной головной группы. ПЭ представляет собой липид с отрицательной спонтанной кривизной, и хорошо известно, что связывающие мембраны белки лучше связываются с липидным бислоем в зависимости от увеличения отрицательного (спонтанное) искривление [54,55,59,60]. В самом деле, мы также наблюдали более высокие значения MIP для липидов с отрицательной спонтанной кривизной на границе раздела воздух-вода для С-конца перилипина 3 [44]. В случае полноразмерного белка этот эффект был значительно снижен [44]. Отрицательная кривизна увеличивает доступ гидрофобных белковых доменов или аминокислотных остатков к гидрофобной внутренней части мембраны. На границе раздела масло-липид, вероятно, разворачивается похожий сценарий. На границе масло-липид PE может также способствовать взаимному переходу триолеина в липидный монослой, что должно быть исследовано в дальнейшем с помощью МД моделирования [57,58].PE позволяет C-концевому домену легче достигать нефти. Неясно, почему мы не наблюдаем такой же эффект для полноразмерного белка, но он может быть связан с распределением больших гидрофобных аминокислот и амфипатичностью взаимодействующих амфипатических α-спиралей между обоими доменами [56]. Ясно то, что С-конец перилипина 3 демонстрирует значительно большее кооперативное связывание и встраивание, чем полноразмерный белок. Hickenbottom et al. показали, что в кристаллической структуре С-концевого домена перилипина 3 гидрофобная щель присутствует между спиральным пучком и так называемым α / β-доменом на N-конце спирального пучка [30].Эта гидрофобная щель выстлана несколькими большими гидрофобными остатками (W и F), которые могут управлять PE-чувствительностью этого домена. Недавно было предположено, что PE облегчает связывание перилипина 2 липидными каплями [61]. Однако это первое наблюдение PE-опосредованного связывания липидов с перилипином 3. Наши результаты предполагают, что C-конец перилипина 3 избирательно рекрутируется в монослои LD, содержащие PE. Обладает ли С-концевой амфипатический пучок α-спирали, присутствующий в перилипине 5, сходным сродством к липидным монослоям, содержащим PE, все еще неизвестно.Дальнейшая работа по обменным перилипинам должна исследовать специфичность встраивания липидного монослоя in vitro с использованием модели подвесной капельной модели, чтобы получить более полное представление о том, как LD-связывающие белки нацелены и связываются с LD in vivo. Следует отметить, что, хотя мы не наблюдали значительного эффекта POG диацилглицерина (липид с сильной отрицательной спонтанной кривизной [62,63]) при связывании и вставке перилипина 3, это могло быть вызвано экспериментальным артефактом. Ранее мы наблюдали, что липосомы, содержащие значительные количества (> 15 мол.%) Диацилглицерина, не образуют нормальных однослойных структур [59].Вместо этого эти липосомальные дисперсии содержат не менее 25% липосом с огромным количеством внутренних мембран. Таким образом, возможно, что концентрация POG на границе раздела модели LD была значительно ниже, чем 30 мол.% PE и PA. Будущие эксперименты с использованием меньшего количества диацилглицерина прояснят этот вопрос. Привлечение перилипина 3 к LD не вызвано отрицательным зарядом, поскольку мы не наблюдаем никакого эффекта от добавления 30 мол.% POPA к нашим монослоям POPC. Это контрастирует с нашими результатами с аполипопротеинами, apoE 3 и apoLp-III, которые показали значительно более высокое Δπ _MAX для монослоев, содержащих PA.С-концевой домен пучка α-спирали перилипина 3, как и у апоЕ 3, имеет положительный заряд, но мы не наблюдаем никакого влияния на Δπ _MAX . Однако наша C-концевая конструкция также содержит домен α / β, как обнаружено в кристаллической структуре [30], который содержит 9 анионных и только 3 потенциальных катионных остатка. Следовательно, С-концевой домен содержит значительный отрицательный заряд в отличие от аполипопротеинов, которые мы изучали ранее. Кроме того, мы обнаружили, что apoE и apoLp-III не демонстрируют кооперативного связывания с монослоем ПК.Фактически, PC значительно препятствует связыванию монослоя LD как для амфипатических спиральных пучков апоЕ, так и для апоLp-III. С-конец перилипина 3, напротив, демонстрирует кооперативное связывание.

4.3. Предлагаемая модель рекрутирования перилипина 3 в формирующиеся LDs

Наши данные предполагают, что полноразмерный перилипин 3 в целом имеет более высокие уровни ассоциации с масляно-фосфолипидными монослоями, но при определенных условиях C-конец перилипина 3 демонстрирует отличное поведение связывания и встраивания. Таким образом, эта работа подчеркивает важность исследования различных доменов перилипинов и намекает на уникальную биологическую функцию домена пучка α-спиралей.Доказано, что перилипин 2 и 3 связывается с возникающими LD [17,40,42]. В этом процессе, как ненасыщенность фосфолипидов ER, так и накопление PE, как было показано, способствуют зарождению триглицеридов внутри бислоя ER [64]. Недавно была предложена модель «иерархического» связывания для перилипинов 1–3, при этом перилипины 2 и 3 замещаются перилипином 1 по мере созревания LDs [41]. Такая модель должна учитывать физико-химические различия в содержании липидов на монослоях LD и влияние, которое это будет иметь на набор и встраивание белка.ЛД, содержащие перилипин 2 и 3, имеют фосфолипидные монослои с более высокими уровнями ненасыщенности по сравнению с ЛД, содержащими перилипин 1 [8], что согласуется с нашими результатами для перилипина 3. Мы предполагаем, что ненасыщенность фосфолипидов ER и накопление PE могут помочь рекрутировать перилипин 3 в почкование. LDs во время их образования через С-концевой домен пучка спиралей. Это контрастирует с предположением, что N-конец перилипина 3 является областью, которая локализуется и первоначально связывается с LDs in vivo [23,41]. Это трудно проверить с использованием методов in vitro, потому что, в то время как C-концевой домен может быть легко экспрессирован и очищен, N-концевой участок 11-мерного повтора не может [30,42].Однако гидрофобность области 11-мерного повтора по сравнению с гидрофобностью С-концевого домена (см. Дополнительную информацию для определения амфипатических α-спиралей на N-конце с использованием вторичной структуры PREDiction (PSIPRED) на основе PSI-blast, и их расчетная гидрофобность по сравнению с таковыми для спиралей в домене спирального пучка) не обнаруживает разительных различий, которые подтверждали бы данные in vivo. Одна возможность состоит в том, что результаты in vivo по рекрутированию перилипина 3 и связыванию с LD искажаются экспериментальными условиями.Нацеливание на LD отслеживается с помощью слитых белков зеленого флуоресцентного белка (GFP), что может приводить к артефактам связывания LD. В то время как C-конец перилипина 3 стабилен в растворе в виде пучка амфипатической α-спирали, третичная структура N-конца неизвестна, но, судя по профилю рассеяния рентгеновских лучей, скорее протяженная, чем компактная. Присоединение высокогидрофильного β-цилиндрического белка, такого как GFP, к домену спирального пучка может сделать эту конструкцию почти полностью цитозольной. Напротив, тот же эксперимент с 11-мерной повторяющейся областью белка может привести к конструкциям, которые сохраняют значительное связывание LD.Таким образом, мы предлагаем, чтобы внутриклеточное (in vivo) нацеливание на LD перилипинами было дополнительно изучено с использованием подходов, которые не полагаются на большие гидрофильные флуоресцентные молекулы (GFP примерно такого же размера, как C-концевой домен, примерно 27 кДа и 28 кДа соответственно. ).

Химические и биомедицинские сенсоры, использующие двумерные материалы

Аннотация

Мы находимся на пороге революции в химических и медицинских датчиках. Традиционные датчики громоздки и сложны в использовании.Многие исследователи начали создавать простые в использовании домашние системы мониторинга здоровья, такие как носимые датчики пота. Чтобы сделать такую ​​систему практичной, датчики должны сочетать в себе высокую чувствительность, высокую избирательность, быстрое время отклика и небольшой дрейф сигнала. Датчики также должны охватывать широкий спектр распознаваемых химических веществ и молекул. Двумерные материалы являются идеальным кандидатом в качестве чувствительных материалов следующего поколения из-за их уникальных электрических, оптических, механических и химических свойств.В этой диссертации обсуждалась технология изготовления и устройства современного химического сенсора на основе графена. Также были изучены новая технология формирования 2D-рисунка материалов и различные подходы к пассивации. Используя эти новые технологии, были разработаны три типа сенсорных устройств, цель которых – способствовать разработке более совершенной системы мониторинга здравоохранения. Создан биосенсор на основе графена для обнаружения лиганда с высокой чувствительностью и широким диапазоном обнаружения. Также были разработаны матрицы графеновых сенсоров в сочетании с различными типами ионоселективных мембран.Высокая чувствительность, селективность и обратимость были достигнуты при обнаружении ионизированного кальция, натрия и калия в электролите. Наконец, были исследованы MoS 2 для усиления сигнала и достижения высокой чувствительности при низкой концентрации, а также более простой схемы измерения. Все три датчика будут служить строительными блоками для реализации систем химических и биомедицинских датчиков следующего поколения.

Описание

Диссертация: S.M., Массачусетский технологический институт, факультет электротехники и информатики, 2019

Каталогизируется из версии диссертации в формате PDF.

Включает библиографические ссылки (страницы 73-82).

Отдел

Массачусетский Институт Технологий. Кафедра электротехники и информатики

Издатель

Массачусетский технологический институт

Ключевые слова

Электротехника и информатика.

Произошла ошибка при настройке пользовательского файла cookie

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности.Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.

---

Настройка вашего браузера для приема файлов cookie

Существует множество причин, по которым cookie не может быть установлен правильно. Ниже приведены наиболее частые причины:

• В вашем браузере отключены файлы cookie. Вам необходимо сбросить настройки своего браузера, чтобы он принимал файлы cookie, или чтобы спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
• Ваш браузер спрашивает вас, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались.Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, нажмите кнопку «Назад» и примите файлы cookie.
• Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Если вы подозреваете это, попробуйте другой браузер.
• Дата на вашем компьютере в прошлом. Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г., браузер автоматически забудет файл cookie. Чтобы исправить это, установите правильное время и дату на своем компьютере.
• Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie.Вы должны отключить приложение при входе в систему или проконсультироваться с системным администратором.

---

Почему этому сайту требуются файлы cookie?

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу. Чтобы предоставить доступ без файлов cookie потребует, чтобы сайт создавал новый сеанс для каждой посещаемой страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.

---

Что сохраняется в файле cookie?

Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в cookie; никакая другая информация не фиксируется.