Указатели напряжения фото: Указатель напряжения – принцип работы и особенности применения (100 фото)

Виды указателей для определения напряжения

В настоящее время существует несколько видов указателей напряжения, изображенных на фото, которые разделяются по следующим категориям:

• по мощности напряжения: до 1 кВ и свыше 1 кВ;
• по количеству полюсов: одно- и двухполюсные;
• по типу индикатора: с использованием светодиодов и цифровые;
• по виду тока для измерения: для переменного и постоянного тока.

К тому же можно использовать бесконтактные указатели напряжения.

Конструкция и способ применения

Особенности конструкции и механизм действия стоит рассмотреть более детально для некоторых видов.

Однополюсные указатели оснащены соответственно одним полюсом, при помощи которого и узнают показатели напряжение в электросети. Как проверить это напряжение? Для этого нужно полюсом коснуться токоведущей части устройства.

При этом процесс замыкания с заземлением происходит непосредственно через человеческое тело в момент его прикосновения к контакту, расположенному на указателе, пальцем. Ток в этот момент возникает не значительный, практически минимальный около 0,3 миллиампера, но лампочка однако, включается.

Внешне данный указатель низкого напряжения напоминает отвертку либо школьную ручку, которая изготавливается из бесцветного материала-диэлектрика или оснащается небольшим смотровым оконцем.

Внутри корпуса располагается резистор и неоновая лампочка, а нижняя его часть оборудована пружинкой и щупом, при этом верхняя имеет площадку для контакта с пальцем при соприкосновении.

Однополюсный прибор предназначен проверять исключительно переменный ток, потому что при токе постоянном неоновый свет не появиться (лампа не включиться), несмотря на наличие напряжения. Чаще всего такой прибор применяют для проверки фаз патронов, выключателей, розеток и пр.

Без средств индивидуальной защиты, в частности без защиты рук резиновыми перчатками, можно применять указатель при напряжении до 1000 вольт. В соответствии с правилами электробезопасности запрещается применять контрольную лампу, которая вставляется в патрон с присоединенными к ней отрезками провода. В результате внезапного увеличения напряжения в электросети, колба лампы разорвется, что может привести к травматизму работника электросети.

Недостатком однополюсного прибора является малая чувствительность и определение напряжения лишь до 90 В.

Указатель напряжения двухполюсный

Этот вид указателя имеет две части, отдельные друг от друга. Для их изготовления используется материал-диэлектрик и изолированный гибкий проводник из меди, который соединяет две отдельные части.

Принцип работы двухполюсного указателя совершенно несложный, необходимо слегка коснуться к токопроводящим частям полюсами и устройство покажет есть напряжение или нет.

Если результат положительный и ток в сети присутствует, значит лампа загорится неоновым светом, при этом разность потенциалов, возникающая между этими токопроводящими элементами, оказывает значительное влияние на сам ток.

Значение тока, протекающего через лампу, составляет всего несколько миллиампер, но этого вполне достаточно для устойчивого светового сигнала. Для предотвращения увеличения напряжения в лампе необходимо подключить к ней обычный резистор.

Кроме выпускаемых указателей, можно использовать схожие с ними приборы – индикаторы, служащие также для определения показателя напряжения в электросети и оснащенных специальной шкалой с подсветкой светодиодами на корпусе и градуировкой определенных показаний напряжения от 12 до 750 В.

Прибор высокого напряжения (более 1 кВ)

Указатели высокого напряжения функционируют благодаря возникающему эффекту от свечения неона при протекании по лампе емкостного тока конденсатора, который подключается последовательно с ней.

Указатель такого плана называется высоковольтным и подходит он для проверки напряжения переменного, при этом касание происходит только к фазе, место для контакта с пальцем отсутствует.

Все модели обладают разными конструкционными особенностями, но имеют общие для всех элементы.

В соответствии с требованиями правил электробезопасности:

• работы необходимо выполнять в резиновых защитных средствах для рук, указатель должен быть в технически исправном состоянии, что необходимо заранее проверить;
• запрещается заземлять указатель, чтобы не допустить возможное соприкосновение с частями под напряжением, что может привести к травмированию электромонтера.

Фото указателей напряжения

высокого и низкого, принцип работы

Для начала монтажных или ремонтных работ на электрических станциях и проводах нужно обязательно проверить показатели сети, отсутствие тока или его параметры. Для этого используется указатель напряжения, который может определить наличие вольтажа и его совпадения до 1000в.

Описание и принцип работы

Указатель высокого напряжения и низкого – это универсальный прибор переносного типа, предназначенный для определения напряжения на токоведущих проводах или клеммах отдельных электрических устройств (УВН 10, УНК, УВНК-10, BN-020022 Profipol Benning и прочие).

Данное приспособление необходимо при работе на различных предприятиях или выезде электромонтажников на объект. Главным отличием этого указателя от стандартных измерителей является то, что он поможет определить только наличие нагрузки, но не её показатели, в отличие от моделей, которые устанавливаются на дин-рейку.

В основном сейчас используются только устройства напряжения до 1000 Вольт, такой указатель может быть двухполюсный и однополюсный, у них схожая схема, но разные области применения. Во время работы устройства с двумя полюсами нужно подключать к двум токоведущим жилам или контактам, в то время как однополюсный только к одной. Следует знать, что двухполюсные указатели более точные, поэтому они называются высоковольтные и применяются во время сложных работ.

Помимо этого также есть бесконтактный указатель. Проверка с его помощью проводится без подключения к токоведущим клеммам. Это значительно увеличивает безопасность во время определения напряжения. Устройство оснащено цифровой индикацией, причем на ней отмечается не только наличие вольтажа, но и приблизительный размер благодаря магнитному полю.

Бывают переносные модели на батарейках и варианты, требующие подключения к сети (например, указатель или индикатор напряжения типа Контакт 55ЭМ, УВНУ-10 кВ СЗИП, ЭЛИН-1-СЗ ВЛ). В первом случае питание осуществляется при помощи двух или более батареек, реже от аккумулятора (это УВНК, УННО, УНК, ЭИ-9000/1, Duspol digital LC, Ратон). Это позволяет использовать прибор на местности, при выезде или на ремонтных работах вдали от рабочей сети электропитания.

Принцип работы прибора довольно простой. Во время подключения к сети (при помощи соединения с токоведущими частями) производится сравнение потенциалов. Это повышает или понижает сопротивление в резисторах указателя. Из-за этого индикатор, который потребляет самые малые доли ампер, протекающих в проводах или клеммах, загорается либо издает звуковой сигнал. Если при работе индикатор молчит – то нагрузки нет. В отдельных случаях наблюдается планомерное затухание сигнала – это значит, что в проводах была остаточная энергия.

Требования к указателям напряжения ГОСТ 20493-2001:

1. У приборов до 1000 Вольт обязательно нагрузка индикаторов должно быть не выше 90 В;
2. Однополюсное устройство находится в одном корпусе, в то время как двухполюсное располагается в двух, соединенных между собой шнуром;
3. Любой указатель наличия нагрузки (бортовой, комби и прочие) должны иметь три поверхности: рабочую, изолированную, определяющую и держатель;
4. В отдельных моделях рабочая часть соединяется с индикатором;
5. Поверка указателей производится каждый раз перед использованием при помощи напряжения 2 кВ, при этом она длиться не более минуты.

Нужно помнить, что инструкция по безопасности требует полной подготовки перед использованием аппарата. В частности, необходимо надеть энергокомплект, включающий диэлектрические перчатки и ботинки. Эти требования указаны для электрического прибора, и они отличаются от моделей индикаторов в УАЗ, ВАЗ и прочих авто, судов и т. д.

Видео: UT 15В индикатор напряжения

Технические характеристики

Указатели напряжения для фазировки обязательно имеют сертифицированные параметры качества. Они зависят от конкретной модели прибора, рассмотрим данные на примере УННУ-40-1000:

Двухполюсный указатель рабочего напряжения типа УНН Комби имеет параметры аналогичные УННДП 12 660 (кроме максимального напряжения 660 В и рабочих температур до +35):

Схожие технические характеристики имеет двухполюсный указатель напряжения УНН 1, ПИН 90, УНК 04, Лоцман-2 и УВНИ 150 А. Их паспорт качества отличается лишь по данным нагрузки и сроку эксплуатации.

Параметры однополюсного УВН 80:

Технические данные однополюсного УВНБУ 6–35:

Очень интересная модель УНВЛ-0,4 используется в основном на воздушных линиях электропередач. У него следующие параметры:

Помимо этого, все модели имеют гарантию год, но только при условии регулярной проверки перед началом работы. При покупке всегда обращайте внимание на наличие данных ГОСТ, сертификата и соответствия качества и возможности проверку перед приобретением. Каждые полгода нужно производить калибровку датчика на специальном оборудовании.

Его особенностью является то, что рабочий контакт выполнен в виде крюка, который цепляется на провод независимо от высоты. Сейчас в продаже есть более новая модель для определения напряжения – это указатель УВНУ-10ФБ Поиск 1, где за крепление контактов на токоведущих частях проводов или машин отвечает штанга. Пользоваться прибором этого типа очень просто – высота регулируется при помощи ручных манипуляций, кроме того, можно зафиксировать длину выдвигающейся части.

Купить указатель напряжения можно в любом городе в специализированных электрических магазинах, но цена будет зависеть от того, кто производитель и типа прибора. Двухполюсные устройства дороже, чем однополюсники. Стоимость также варьируется от города покупки. Например, в Москве определенный УН может стоить выше, чем в Екатеринбурге или Новосибирске.

Указатель высокого напряжения (УВН) | Заметки электрика

Дорогие читатели, приветствую Вас на своем ресурсе «Заметки электрика».

Сегодня мы поговорим с Вами об указателе высокого напряжения, или сокращенно его называют УВН.

Данную статью пишу, так сказать, по горячим следам.

Несколько дней назад проводили фазировку электрооборудования с классом напряжения от 0,4 (кВ) до 10 (кВ).

Обойтись без указателей высокого и низкого напряжения там просто невозможно. Читайте мою подробную статью о применении, конструкции и испытании указателей низкого напряжения (УНН).

Применение УВН

Напомню сразу, что указатель высокого напряжения, да и не только высокого, но и низкого, является основным изолирующим электрозащитным средством. Об этом более подробно Вы можете прочитать в статье средства защиты в электроустановках.

Указатели высокого напряжения (УВН) применяются для проверки наличия, либо отсутствия высокого напряжения в распределительном устройстве на тех токоведущих частях, где будут производиться работы. А также УВН используют для проверки совпадения фаз, т.е. фазировки высоковольтного электрооборудования.

Из чего состоит указатель высокого напряжения?

Чтобы научиться правильно пользоваться указателем высокого напряжения, необходимо знать его конструкцию.

Вот об этом мы сейчас и поговорим.

В своей работе и практики чаще всего приходится пользоваться указателем высокого напряжения типа УВН-10 и УВНУ-10. Поэтому в данной статье основной упор я буду делать на конструкцию, испытание и применение указателей напряжения УВН-10 и УВНУ-10.

Указатель высокого напряжения УВН-10 и УВНУ-10 состоит из следующих основных частей:

• рабочая часть
• индикаторная часть (газоразрядная или светодиодная лампа, прорезь-окно для лампы или затенитель)
• изолирующая часть
• рукоятка с ограничительным кольцом

Рабочая и индикаторная части крепятся к изолирующей части с помощью резьбы. На фото выше показан УВНУ-10 транспортировочного вида.

Чтобы его привести в рабочий вид необходимо выкрутить резьбу, перевернуть рабочую и индикаторную часть и закрутить наоборот. Что из этого получится — смотрите картинку ниже.

Рабочая часть состоит из элементов, которые реагируют на присутствие напряжения в контролируемой цепи. Корпус рабочей части выполняется из электроизоляционного материала с улучшенными диэлектрическими свойствами.

Указатели могут быть:

• контактного типа (УВН-10)
• бесконтактного типа
• комбинированного типа (УВНУ-10)

В первом случае в рабочей части УВН имеется электрод-наконечник (щуп) для прямого контакта с токоведущей частью. Во втором случае — электрод-наконечник отсутствует.

Индикаторная часть указателей высокого напряжения состоит из элементов световой или свето-звуковой индикацией.

Световая индикация выполняется с помощью:

• газоразрядных ламп
• светодиодных ламп (более новые конструкции УВНУ-10)

Изолирующая часть указателей напряжения выше 1000 (В) выполняется из электроизоляционного материала, отталкивающих влагу, с улучшенными диэлектрическими и механическими свойствами. Ее поверхность должна быть гладкой.

На изолирующей части указателей высокого напряжения должны отсутствовать различные трещины, царапины, расслоения и другие дефекты.

Запрещено в качестве изолирующей части использовать бумажно-бакелитовые трубки.

Рукоятка УВН может входить в состав изолирующей части, а может быть и отдельным звеном. Все зависит от типа и конструкции применяемого указателя напряжения.

Существуют нормы по минимальной длине рукояток и изолирующих частей указателей высокого напряжения в зависимости от класса напряжения. Все данные приведены в таблице ниже.

И еще, забыл упомянуть, что напряжение индикации УВН должно быть не более 25% от номинального напряжения сети.

Испытание указателей высокого напряжения (УВН)

Все УВН в процессе эксплуатации должны периодически проходить электрические испытания. Испытаниям повышенным напряжением подлежит изолирующая часть, а также проверяется напряжение индикации.

Рабочую часть УВН испытывают только по требованию руководства по эксплуатации.

Если же по характеру работы с УВН рабочая часть может стать причиной замыкания фазы на землю или двух фаз между собой, то в этом случае необходимо проводить электрические испытания рабочей части УВН.

В нашей электролаборатории мы проводим электрические испытания только изолирующей части УВН и проверку напряжения индикации УВН.

Испытание изолирующей части указателей напряжения выше 1000 (В) проводится следующим образом.

Испытательное напряжение от испытательного трансформатора прикладывают на место соединения ее с рабочей частью (резьба или разъем) и  на временный электрод, который предварительно устанавливается около ограничительного кольца рукоятки.

Например, для указателей напряжения:

• до 10 (кВ) испытательное напряжение составляет 40 (кВ)
• от 10 — 20 (кВ) испытательное напряжение составляет 60 (кВ)
• от 20 – 35 (кВ) испытательное напряжение составляет 105 (кВ)
• 110 (кВ) испытательное напряжение составляет 190 (кВ)
• от 110 — 220 (кВ) испытательное напряжение составляет 380 (кВ)

Во всех случаях продолжительность испытания указателей напряжения составляет 5 минут.  Ток, проходящий через изделие не нормируется. Периодичность испытаний УВН — 1 раз в год.

Проверка напряжения индикации УВН с газоразрядной лампой проводится следующим образом.

Испытательное напряжение прикладывают на электрод-наконечник (если такой имеется, об этом читай выше) и на место соединения рабочей части с изолирующей частью (резьба или разъем). Испытательное напряжение плавно поднимают до значения, которое соответствует 25% от номинального напряжения сети.

Проверка напряжения индикации УВН со светодиодной лампой немного отличается от предыдущей проверки. Разница заключается в том, что напряжение от испытательного трансформатора прикладывается только на электрод-наконечник. Устанавливать вспомогательный электрод и заземлять его в этом случае нет необходимости.

Правила пользования указателем высокого напряжения

Перед применением указателя высокого напряжения нужно проверить его состояние — исправен он или нет, а также наличие штампа о прохождении испытания.

Как это сделать?

Исправное состояние УВН можно проверить путем кратковременного прикосновения им к токоведущим частям, находящимся под напряжением.

Как проверить отсутствие напряжения?

Проверка отсутствия напряжения указателем высокого напряжения производится в контролируемой цепи на токоведущих частях путем непосредственного контакта. Время контакта должно быть не менее 5 секунд.

Пользоваться указателем напряжения выше 1000 (В) следует только в диэлектрических перчатках.

Указатели напряжения (УВН) реагируют на емкостной ток. При внесении указателя высокого напряжения в электрическое поле, которое создается от токоведущих частей, находящихся под напряжением, емкостной ток проходит через УВН по цепи: токоведущая часть — щуп — газоразрядная лампа (светодиодная лампа) – конденсатор, встроенный в трубку – проводимость изолирующей части — проводимость человека — земля.

P.S. На этом статью на тему указатель высокого напряжения я завершаю. Думаю, что данный материал будет Вам полезен, т.к. повторяю еще и еще, что электробезопасность превыше всего, а тем более в электроустановках высокого напряжения.

Если статья была Вам полезна, то поделитесь ей со своими друзьями:

Для чего нужен двухполюсный индикатор напряжения. Какие бывают указатели напряжения

2. 4.23. Общие технические требования к указателям напряжения до 1000 В изложены в государственном стандарте.

2.4.24. В электроустановках напряжением до 1000 В применяются указатели двух типов: двухполюсные и однополюсные.

Двухполюсные указатели, работающие при протекании активного тока, предназначены для электроустановок переменного и постоянного тока.

Однополюсные указатели, работающие при протекании емкостного тока, предназначены для электроустановок только переменного тока.

Применение двухполюсных указателей является предпочтительным.

Применение контрольных ламп для проверки отсутствия напряжения не допускается.

2.4.25. Двухполюсные указатели состоят из двух корпусов, выполненных из электроизоляционного материала, содержащих элементы, реагирующие на наличие напряжения на контролируемых токоведущих частях, и элементы световой и (или) звуковой индикации. Корпуса соединены между собой гибким проводом длиной не менее 1 м. В местах вводов в корпуса соединительный провод должен иметь амортизационные втулки или утолщенную изоляцию.

Размеры корпусов не нормируются, определяются удобством пользования.

Каждый корпус двухполюсного указателя должен иметь жестко закрепленный электрод-наконечник, длина неизолированной части которого не должна превышать 7 мм, кроме указателей для воздушных линий, у которых длина неизолированной части электродов-наконечников определяется техническими условиями.

2.4.26. Однополюсный указатель имеет один корпус, выполненный из электроизоляционного материала, в котором размещены все элементы указателя. Кроме электрода-наконечника, соответствующего требованиям п. 2.4.25, на торцевой или боковой части корпуса должен быть электрод для контакта с рукой оператора.

Размеры корпуса не нормируются, определяются удобством пользования.

Индикация наличия напряжения может быть ступенчатой, подаваться в виде цифрового сигнала и т.п.

Световой и звуковой сигналы могут быть непрерывными или прерывистыми и должны быть надежно распознаваемыми.

Для указателей с импульсным сигналом напряжением индикации является напряжение, при котором интервал между импульсами не превышает 1,0 с.

2.4.28. Указатели напряжения до 1000 В могут выполнять также дополнительные функции: проверка целостности электрических цепей, определение фазного провода, определение полярности в цепях постоянного тока и т.д. При этом указатели не должны содержать коммутационных элементов, предназначенных для переключения режимов работы.

Расширение функциональных возможностей указателя не должно снижать безопасности проведения операций по определению наличия или отсутствия напряжения.

2.4.34. При проверке отсутствия напряжения время непосредственного контакта указателя с контролируемыми токоведущими частями должно быть не менее 5 с.

Некоторые работы в доме могут выполнять люди без специальной подготовки, не прибегая к услугам профессиональных электриков. Замена розеток, выключателей, ремонт настольных и потолочных светильников не требуют высокой квалификации.

Но, выполняя эти работы, нужно соблюдать правила безопасности, которые требуют проверять отсутствие напряжения на контактах электроприборов перед началом работ.

Однополюсный указатель напряжения – самый простой и доступный каждому прибор, показывающий наличие или отсутствие «фазы». Некоторые модели применяются и для поиска мет обрывов в проводах, шнурах и кабелях. Так как некоторые однополюсные указатели совмещают в себе функцию простенькой отвертки, их называют «индикаторными отвертками», а иногда – просто «индикаторами».

Достоинство индикаторов – для их работы не требуется второго провода. Они используют ток, проходящий от «фазы» к «земле» через указатель и тело человека, соединенные последовательно. Для человека этот ток не представляет опасности. Ему не препятствуют ни сопротивление обуви, ни материал пола, но пользоваться указателем в диэлектрических перчатках нельзя, работать он не будет. На практике были единичные случаи, когда индикаторная отвертка не определила наличие «фазы» в светильнике, если электрик стоял на сухой деревянной стремянке.

Виды указателей напряжения

Индикаторы напряжения бывают:

• с неоновой лампой;
• со светодиодами, работающие от батареек;
• с жидкокристаллическим дисплеем;
• бесконтактные;
• многофункциональные.

Указатели с неоновыми лампами – самые дешевые . Их недостатки – малое напряжение зажигания и недостаточная яркость свечения. При ярком освещении их приходится прикрывать рукой, чтобы увидеть, светится ли лампа.

У светодиодных индикаторов порог зажигания меньше. Наличие батарейки позволяет выполнять с их помощью «прозвонку» цепей и использовать указатель, как бесконтактный. Если взяться за жало индикаторной отвертки и поднести ее торец с проводу, находящемуся под напряжением, лампочка загорится. Но, если она не загорится, это не будет доказательством отсутствия напряжения.

Недостаток светодиодных указателей – они светятся от наводок в проверяемой цепи, показывая «фазу» там, где ее нет.

Общий недостаток неоновых и светодиодных указателей – наличие пружинки, которая со временем ослабевает. Контакт внутри индикатора нарушается, и он перестает работать.

Этого недостатка лишены индикаторы с дисплеями и бесконтактные указатели напряжения. У индикаторов с дисплеями та же чувствительность, что и у светодиодных. Но они распознают наводки в цепях, указывая на дисплее значение напряжения ниже, чем 220В. Зато их показания не видно в темноте.

Бесконтактные указатели работают от батареек. Если их включить и поднести к фазному проводнику, они издают световой и звуковой сигналы. Это удобно при проверке полного отсутствия напряжения, но неприменимо в случаях определения «фазы» на проводниках, находящихся близко друг к другу. Для этого нужен контактный указатель.

Многофункциональные индикаторы представляют собой мультиметр, совмещающий функции омметра, вольтметра и бесконтактного указателя.

Каждый из указателей имеет недостатки и достоинства. Выбирая индикатор напряжения для собственных нужд, помните: хороший указатель – это тот, которым Вы. Главное – научиться верно понимать сигналы указателя.

Как пользоваться указателем напряжения?

Каждый раз перед началом работы с индикатором напряжения надо:

• осмотреть прибор, убедиться в целостности корпуса;
• прикоснуться к «фазе» и удостовериться, что прибор показывает ее наличие.
• после проверки отсутствия напряжения в месте работы нужно повторить проверку исправности .

Такая последовательность действий указателя в ходе проверки. Ее придерживаются и профессиональные электрики при работе в промышленных электроустановках.

Не забывайте специального контакта на корпусе прибора при проверке. Иначе указатель работать не будет.

Указатель напряжения называются переносные устройства, которые предназначены для выявления отсутствия или наличия напряжения в сети или на токоведущих элементах электрических установок. Такую проверку производят перед подключением переносного заземления или включением заземляющих ножей, а также перед началом электромонтажных работ. В этих случаях не обязательно определять значение напряжения, требуется знать только его наличие или отсутствие.

От указателя напряжения зависит жизнь электромонтера, так как по его показаниям определяют наличие напряжения. Только убедившись, что на токоведущих частях устройства нет напряжения, можно приступать к работе по ремонту светильника, выключателя или розетки.

Рассмотрим существующие виды указателей напряжения, и как они разделяются.

По напряжению:

• До 1 кВ.
• Свыше 1 кВ.

Указатели напряжения до 1 кВ делятся по числу полюсов:

• Однополюсные.
• Двухполюсные.

Универсальные указатели делятся по виду измеряемого тока:

• Для переменного тока.
• Для постоянного тока.

По виду индикатора:

• Светодиодные.
• Цифровые.

Также, существуют бесконтактные указатели.

Рассмотрим подробнее конструктивные особенности всех перечисленных видов указателей, и их принцип работы.

Такие указатели имеют один полюс. Для определения наличия напряжения достаточно прикоснуться этим полюсом к токоведущему элементу. Соединение с заземлением создается по телу человека, когда он пальцем руки касается контакта на указателе. При этом возникает очень малый ток, не более 0,3 миллиампера, лампа начинает светиться.

Чаще всего однополюсный указатель изготавливается в виде отвертки или авторучки из диэлектрического прозрачного материала, или со смотровым окошком. В корпусе расположен резистор и неоновая лампочка. Внизу корпуса находится пружина и щуп, а вверху контактная площадка для касания пальцем.

Указатель с одним полюсом используется только для проверки переменного тока, так как при постоянном токе неоновая лампа не будет гореть, даже если есть напряжение. Его целесообразно использовать для контроля фазных проводников, фазы в выключателе, розетке или патроне и в других аналогичных местах.

Допускается использование указателя до 1000 вольт без резиновых перчаток и других средств защиты. Согласно правилам безопасности, нельзя использовать в качестве указателя напряжения контрольную лампу («контрольку» ), установленную в патрон, с подключенными двумя небольшими кусками провода. При случайной подаче большого напряжения на эту лампу, или при ее механическом повреждении, колба лампы может лопнуть и нанести травму электромонтеру.

Из недостатков однополюсных указателей можно отметить их малую чувствительность. Они показывают наличие напряжения только от 90 В.

Состоит из 2-х отдельных частей, выполненных из диэлектрического материала и медного гибкого изолированного проводника, соединяющего эти части.

На этом рисунке показано устройство двухполюсного указателя. Неоновая лампа зашунтирована сопротивлением. Это снижает чувствительность указателя к воздействию наведенного напряжения.

Чтобы определить отсутствие или наличие напряжения с помощью двухполюсного указателя, необходимо прикосновение к двум элементам устройства, между которыми может быть напряжение. Если напряжение присутствует, то неоновая лампа будет светиться при протекании через нее тока, который зависит от разности потенциалов между элементами устройства, к которым выполнено прикосновение указателем.

Ток, протекающий через лампу, имеет очень малую величину (несколько миллиампер). Это достаточно, чтобы лампа выдавала устойчивый сигнал света. Чтобы ограничить увеличивающийся ток в лампе, последовательно к ней подключен резистор.

На основе вышеописанного указателя производятся индикаторы, которые определяют значение напряжения.

В этом указателе применяется специальная светодиодная шкала на корпусе, имеющая градуировку на конкретные значения напряжения: 12 … 750 В.

Работают за счет эффекта свечения неоновой лампы во время прохождения по ней зарядного тока конденсатора (емкостного тока). Конденсатор подключается по последовательной схеме с неоновой лампой. Такой указатель напряжения еще называют высоковольтным. Он годится только для контроля переменного напряжения, им касаются только к фазе. Никаких контактных площадок для пальцев на них нет.

Различные модели указателей имеют свои особенности конструкции, но все они состоят из основных общих для любых указателей элементов:

Согласно правилам безопасности, при работе с таким указателем необходимо использовать . Всегда перед использованием указателя необходимо произвести его внешний осмотр на предмет отсутствия повреждений, а также проверить его работоспособность и подачу сигнала.

Такой контроль выполняется путем подноса щупа к токоведущим элементам устройства, которые точно находятся под напряжением. Также проверку работоспособности иногда проводят с использованием источников повышенного напряжения, либо мегомметром. Высоковольтный указатель в условиях гаража можно проверить следующим образом: приблизить указатель к работающему двигателю мотоцикла или автомобиля, а именно, к одной из свеч зажигания.

Согласно правилам безопасности указатель напряжения запрещается заземлять, так как провод заземления может случайно прикоснуться к частям, находящимся под напряжением, вследствие чего произойдет поражение электромонтера электрическим током. Высоковольтный указатель напряжения и без подключения заземления образует четкий сигнал работы.

Заземление указателя напряжения допускается заземлять только в случае, когда емкость указателя относительно земли очень незначительная, и ее не достаточно для контроля наличия напряжения. Это бывает при работах с воздушными линиями, находясь на деревянных опорах.

Используются для контроля нуля и фазы, а также проверки напряжения и его значения в интервале 12-750 вольт для переменного тока, и до 0,5 кВ для постоянного тока.

Такие указатели применяют также для прозвонки соединений различных электрических цепей.

В этих устройствах в качестве индикаторов применяют , а вместо источника напряжения – конденсатор повышенной емкости.

Указатель напряжения может оснащаться цифровым ЖК дисплеем с выводом напряжения в вольтах. При наибольшем значении напряжения 220 В на дисплее отображаются все значения от наименьшего до наибольшего. Этот прибор отображает ориентировочное значение, и имеет низкую точность показаний. Преимуществом такого устройства является отсутствие источника питания.

Бесконтактный указатель напряжения служит для выявления проводов, находящихся под действием напряжения. Они могут быть скрыты в стеновых панелях или стенах. Устройство такого прибора реагирует на электромагнитное переменное поле. Имеется звуковая и световая индикация.

Перед применением указателя нужно убедиться в его работоспособности и правильных показаниях. Чтобы это проверить, необходимо произвести контроль напряжения в сети, которая точно находится под напряжением, и убедиться в том, что прибор работает. Только после этого допускается его применение в работе.

Запрещается применять лампу накаливания вместо индикатора в указателе напряжения. Эта лампа является травмоопасной и ненадежной.

Чтобы найти фазу на токоведущих элементах или проводах с помощью однополюсного указателя, необходимо взять указатель в правую руку за диэлектрическую рукоятку, прикоснуться щупом к проверяемому проводнику или токоведущему элементу. При этом левую руку нужно отвести за спину, чтобы ей случайно не прикоснуться к токоведущим элементам или заземлению. Пальцем правой руки коснуться металлического контакта однополюсного указателя. Прикасаться удобнее большим пальцем.

Если неоновая лампочка при этом светится, это значит, что проверяемый вами токоведущий элемент находится под напряжением фазы. Если лампа не горит, значит это ноль, либо напряжение отсутствует вовсе.

В случае с двухполюсным указателем, щуп того корпуса указателя, где есть индикатор, устанавливают на проверяемый элемент. Вторым щупом касаются другой . По свечению лампы также определяют отсутствие или наличие питания. Пользование таким прибором не составляет никакой трудности.

При проверке напряжения необходимо работать аккуратно и осторожно, соблюдая правила безопасности, так как это очень опасно для жизни человека.

Для начала монтажных или ремонтных работ на электрических станциях и проводах нужно обязательно проверить показатели сети, отсутствие тока или его параметры. Для этого используется указатель напряжения, который может определить наличие вольтажа и его совпадения до 1000в.

Описание и принцип работы

Указатель высокого напряжения и низкого – это универсальный прибор переносного типа, предназначенный для определения напряжения на токоведущих проводах или клеммах отдельных электрических устройств (УВН 10, УНК, УВНК-10, BN-020022 Profipol Benning и прочие).

Данное приспособление необходимо при работе на различных предприятиях или выезде электромонтажников на объект. Главным отличием этого указателя от стандартных измерителей является то, что он поможет определить только наличие нагрузки, но не её показатели, в отличие от моделей, которые устанавливаются на дин-рейку.

В основном сейчас используются только устройства напряжения до 1000 Вольт, такой указатель может быть двухполюсный и однополюсный, у них схожая схема, но разные области применения. Во время работы устройства с двумя полюсами нужно подключать к двум токоведущим жилам или контактам, в то время как однополюсный только к одной. Следует знать, что двухполюсные указатели более точные, поэтому они называются высоковольтные и применяются во время сложных работ.

Помимо этого также есть бесконтактный указатель. Проверка с его помощью проводится без подключения к токоведущим клеммам. Это значительно увеличивает безопасность во время определения напряжения. Устройство оснащено цифровой индикацией, причем на ней отмечается не только наличие вольтажа, но и приблизительный размер благодаря магнитному полю.

Бывают переносные модели на батарейках и варианты, требующие подключения к сети (например, указатель или индикатор напряжения типа Контакт 55ЭМ, УВНУ-10 кВ СЗИП, ЭЛИН-1-СЗ ВЛ). В первом случае питание осуществляется при помощи двух или более батареек, реже от аккумулятора (это УВНК, УННО, УНК, ЭИ-9000/1, Duspol digital LC, Ратон). Это позволяет использовать прибор на местности, при выезде или на ремонтных работах вдали от рабочей сети электропитания.

Принцип работы прибора довольно простой. Во время подключения к сети (при помощи соединения с токоведущими частями) производится сравнение потенциалов. Это повышает или понижает сопротивление в резисторах указателя. Из-за этого индикатор, который потребляет самые малые доли ампер, протекающих в проводах или клеммах, загорается либо издает звуковой сигнал. Если при работе индикатор молчит – то нагрузки нет. В отдельных случаях наблюдается планомерное затухание сигнала – это значит, что в проводах была остаточная энергия.

Требования к указателям напряжения ГОСТ 20493-2001:

1. У приборов до 1000 Вольт обязательно нагрузка индикаторов должно быть не выше 90 В;
2. Однополюсное устройство находится в одном корпусе, в то время как двухполюсное располагается в двух, соединенных между собой шнуром;
3. Любой указатель наличия нагрузки (бортовой, комби и прочие) должны иметь три поверхности: рабочую, изолированную, определяющую и держатель;
4. В отдельных моделях рабочая часть соединяется с индикатором;
5. Поверка указателей производится каждый раз перед использованием при помощи напряжения 2 кВ, при этом она длиться не более минуты.

Нужно помнить, что инструкция по безопасности требует полной подготовки перед использованием аппарата. В частности, необходимо надеть энергокомплект, включающий диэлектрические перчатки и ботинки. Эти требования указаны для электрического прибора, и они отличаются от моделей индикаторов в УАЗ, ВАЗ и прочих авто, судов и т. д.

Видео: UT 15В индикатор напряжения

Технические характеристики

Указатели напряжения для фазировки обязательно имеют сертифицированные параметры качества. Они зависят от конкретной модели прибора, рассмотрим данные на примере УННУ-40-1000:

Двухполюсный указатель рабочего напряжения типа УНН Комби имеет параметры аналогичные УННДП 12 660 (кроме максимального напряжения 660 В и рабочих температур до +35):

Схожие технические характеристики имеет двухполюсный указатель напряжения УНН 1, ПИН 90, УНК 04, Лоцман-2 и УВНИ 150 А. Их паспорт качества отличается лишь по данным нагрузки и сроку эксплуатации.

Параметры однополюсного УВН 80:

Технические данные однополюсного УВНБУ 6–35:

Очень интересная модель УНВЛ-0,4 используется в основном на воздушных линиях электропередач. У него следующие параметры:

Помимо этого, все модели имеют гарантию год, но только при условии регулярной проверки перед началом работы. При покупке всегда обращайте внимание на наличие данных ГОСТ, сертификата и соответствия качества и возможности проверку перед приобретением. Каждые полгода нужно производить калибровку датчика на специальном оборудовании.

Его особенностью является то, что рабочий контакт выполнен в виде крюка, который цепляется на провод независимо от высоты. Сейчас в продаже есть более новая модель для определения напряжения – это указатель УВНУ-10ФБ Поиск 1, где за крепление контактов на токоведущих частях проводов или машин отвечает штанга. Пользоваться прибором этого типа очень просто – высота регулируется при помощи ручных манипуляций, кроме того, можно зафиксировать длину выдвигающейся части.

Купить указатель напряжения можно в любом городе в специализированных электрических магазинах, но цена будет зависеть от того, кто производитель и типа прибора. Двухполюсные устройства дороже, чем однополюсники. Стоимость также варьируется от города покупки. Например, в Москве определенный УН может стоить выше, чем в Екатеринбурге или Новосибирске.

Определить есть или нет электричество в сети или токопроводящих частях электроустановок помогут мобильные устройства, которые называются указателями напряжения. Обычно такие проверки выполняют в случаях подключения мобильных заземлений либо ножей для заземления, или для выполнения работ по электромонтажу. При этом особо важным является определение именно наличия или отсутствия электричества в сети, а не его цифрового значения.

Указатель напряжения имеет большое значение, особенно в работе электромонтера, можно даже сказать, что его жизнь зависит от его показаний. Ведь начинать работы можно лишь в тех случаях, когда прибор показывает полное отсутствие электрического напряжения в токопроводящих элементах источника освещения, розетки или обычного выключателя.

Виды указателей для определения напряжения

В настоящее время существует несколько видов указателей напряжения, изображенных на фото, которые разделяются по следующим категориям:

• по мощности напряжения: до 1 кВ и свыше 1 кВ;
• по количеству полюсов: одно- и двухполюсные;
• по типу индикатора: с использованием светодиодов и цифровые;
• по виду тока для измерения: для переменного и постоянного тока.

К тому же можно использовать бесконтактные указатели напряжения.

Конструкция и способ применения

Особенности конструкции и механизм действия стоит рассмотреть более детально для некоторых видов.

Однополюсные указатели оснащены соответственно одним полюсом, при помощи которого и узнают показатели напряжение в электросети. Как проверить это напряжение? Для этого нужно полюсом коснуться токоведущей части устройства.

При этом процесс замыкания с заземлением происходит непосредственно через человеческое тело в момент его прикосновения к контакту, расположенному на указателе, пальцем. Ток в этот момент возникает не значительный, практически минимальный около 0,3 миллиампера, но лампочка однако, включается.

Внешне данный указатель низкого напряжения напоминает отвертку либо школьную ручку, которая изготавливается из бесцветного материала-диэлектрика или оснащается небольшим смотровым оконцем.

Внутри корпуса располагается резистор и неоновая лампочка, а нижняя его часть оборудована пружинкой и щупом, при этом верхняя имеет площадку для контакта с пальцем при соприкосновении.

Однополюсный прибор предназначен проверять исключительно переменный ток, потому что при токе постоянном неоновый свет не появиться (лампа не включиться), несмотря на наличие напряжения. Чаще всего такой прибор применяют для проверки фаз патронов, выключателей, розеток и пр.

Без средств индивидуальной защиты, в частности без защиты рук резиновыми перчатками, можно применять указатель при напряжении до 1000 вольт. В соответствии с правилами электробезопасности запрещается применять контрольную лампу, которая вставляется в патрон с присоединенными к ней отрезками провода. В результате внезапного увеличения напряжения в электросети, колба лампы разорвется, что может привести к травматизму работника электросети.

Недостатком однополюсного прибора является малая чувствительность и определение напряжения лишь до 90 В.

Указатель напряжения двухполюсный

Этот вид указателя имеет две части, отдельные друг от друга. Для их изготовления используется материал-диэлектрик и изолированный гибкий проводник из меди, который соединяет две отдельные части.

Принцип работы двухполюсного указателя совершенно несложный, необходимо слегка коснуться к токопроводящим частям полюсами и устройство покажет есть напряжение или нет.

Если результат положительный и ток в сети присутствует, значит лампа загорится неоновым светом, при этом разность потенциалов, возникающая между этими токопроводящими элементами, оказывает значительное влияние на сам ток.

Значение тока, протекающего через лампу, составляет всего несколько миллиампер, но этого вполне достаточно для устойчивого светового сигнала. Для предотвращения увеличения напряжения в лампе необходимо подключить к ней обычный резистор.

Кроме выпускаемых указателей, можно использовать схожие с ними приборы – индикаторы, служащие также для определения показателя напряжения в электросети и оснащенных специальной шкалой с подсветкой светодиодами на корпусе и градуировкой определенных показаний напряжения от 12 до 750 В.

Прибор высокого напряжения (более 1 кВ)

Указатели высокого напряжения функционируют благодаря возникающему эффекту от свечения неона при протекании по лампе емкостного тока конденсатора, который подключается последовательно с ней.

Указатель такого плана называется высоковольтным и подходит он для проверки напряжения переменного, при этом касание происходит только к фазе, место для контакта с пальцем отсутствует.

Все модели обладают разными конструкционными особенностями, но имеют общие для всех элементы.

В соответствии с требованиями правил электробезопасности:

• работы необходимо выполнять в резиновых защитных средствах для рук, указатель должен быть в технически исправном состоянии, что необходимо заранее проверить;
• запрещается заземлять указатель, чтобы не допустить возможное соприкосновение с частями под напряжением, что может привести к травмированию электромонтера.

Фото указателей напряжения

Указатель напряжения Е119.

Сроки доставки:

10 – 20 дней

Производитель: 

Быстрый заказ

Указатель напряжения Е119. 3 предназначен для:

• индикации наличия напряжения постоянного и переменного тока в электрических сетях с номинальным напряжением 0,66 кВ;
• определения фазного провода в цепях переменного тока;
• определения полярности постоянного тока;
• определения целостности (прозвонки) электрической цепи;
• проверка исправности полупроводниковых диодов, транзисторов.

Область применения

Основные области применения указателя – при монтаже и обслуживании электроустановок, электрических сетей, в быту.

В условиях недостаточной освещённости предусмотрена возможность подсветки объекта исследования.

Технические характеристики

• Указатель напряжения обеспечивает определение наличия напряжения постоянного и переменного тока в диапазоне 36-110-220-380-660 В с ориентировочной оценкой величины напряжения с помощью светодиодов.
• Указатель Е119.3 обеспечивает определение целостности (прозвонки) электрической цепи от 0 до 100 кОм с помощью световой и звуковой сигнализации.
• Значение тока, протекающего через указатель в режиме индикации напряжения при верхнем значении рабочего напряжения 730 В, не превышает 10 мА.
• Значение тока, протекающего через индикатор при зарядке встроенного источника питания от сети 220 В, 50 Гц не превышает 10 мА. Время зарядки составляет не более 10 мин.
• Время непрерывной работы звуковой и световой сигнализации от одной зарядки составляет не менее 12 мин., время непрерывной подсветки составляет не менее 5 мин.
• Время сохранения заряда составляет не менее 24 час.
• Указатель выдерживает в течение 1 мин. воздействие испытательного напряжения, равного 876 В.
• Указатель выдерживает падение на бетонный пол с высоты не более 1,5 м.
• Габаритные размеры указателя – 240 70 45 мм.
• Масса указателя – не более 0,25 кг.
• Срок службы указателя составляет не менее 5 лет.

Комплект поставки

1. Указатель напряжения Е119.3 – 1 шт.
2. Чехол – 1 шт.
3. Паспорт – 1 экз.

Указатель напряжения Контакт-55ЭМ в Москве

Указатель напряжения Контакт 55ЭМ является переносным электронным прибором, с помощью которого можно проверить наличие (отсутствие) напряжения на токоведущих частях, как переменного, так и постоянного источника напряжения. Я даже назвал бы его индикатором напряжения, т.к. он еще и показывает приближенное значение проверяемого напряжения с помощью светодиодов: «24», «220» и «380» с сопровождением звукового сигнала.

Функциональные возможности

Указатель Контакт 55ЭМ обеспечивает:

• контроль наличия напряжения постоянного и переменного тока,
• приближенное определение величины контролируемого напряжения,
• определение полярности постоянного напряжения,
• проверку целостности (“прозвонку”) электрических цепей, полупроводниковых приборов (диоды, тиристоры) реле, пускателей, трансформаторов и т. п.,
• определение фазного провода (электрода) в цепях переменного тока.

Модификации и особенности

Контакт 55ЭМ является указателем напряжения до 1000В, которые разделяются на:

• однополюсные
• двухполюсные.

Однополюсный указатель требует контакта только с одной токопроводящей частью. Заземление происходит сквозь тело человека, который прикасается пальцами руки к указателю. Ток при контакте выше 0.3 мА не поднимается. Изготавливаются в виде авторучки. В корпусе размещается лампочка и резистор. Внизу корпуса находится метал. щуп, вверху – плоский метал. контакт.

Применяется однополюсный указатель при измерении переменного тока, т.к. индикация напряжения при постоянном токе будет отсутствовать. Используется при проверке фазного провода, коммутации, патронов, предохранителей и т.п.

Двухполюсный указатель напряжения работает путем контакта к двум частям электроустановок. При наличии напряжения загорается лампочка (накаливания/неоновая), работающая за счет разности потенциала между частями электроустановок. Малое потребление тока указателем (до нескольких мА) обеспечивает четкий, устойчивый сигнал.

В схему указателя последовательно с лампой включен резистор, который ограничивает проходящий ток, что позволяет не перегорать лампе при работе прибора.

Применяется двухполюсный указатель для определения переменного и постоянного тока. При работе от переменного тока металлические части могут создавать емкость относительно других фаз или земли, что приводит к срабатыванию лампы после прикосновения одним щупом. Для избегания данной проблемы в плате задействован шунтирующий резистор равный сопротивлению добавочного резистора.

Использование указателя при проверке напряжения до 1000В позволяет обходиться без средств защиты.

Указатели Контакт 55ЭМ запрещено заземлять, т.к., прикоснувшись к источнику напряжения, оператора может ударить током, что приведет к причине несчастного случая. В условиях низкой емкости прибора относительно заземленных предметов (работа на воздушных линиях, деревянных опорах и т.п.) указатель необходимо заземлить.

Рис. 1. Электрическая схема контакта 55

Комплектация

Купить контакт 55ЭМ можно в комплекте:

• паспорт;
• руководство по эксплуатации.

Указатель напряжения до 1000в и выше — увн 80, унн комби и увн 10

Для начала монтажных или ремонтных работ на электрических станциях и проводах нужно обязательно проверить показатели сети, отсутствие тока или его параметры. Для этого используется указатель напряжения, который может определить наличие вольтажа и его совпадения до 1000в.

Блок: 1/3 | Кол-во символов: 276
Источник: https://www.asutpp.ru/ukazatel-napryazheniya.html

Описание и принцип работы

Указатель высокого напряжения и низкого – это универсальный прибор переносного типа, предназначенный для определения напряжения на токоведущих проводах или клеммах отдельных электрических устройств (УВН 10, УНК, УВНК-10, BN-020022 Profipol Benning и прочие).

Данное приспособление необходимо при работе на различных предприятиях или выезде электромонтажников на объект. Главным отличием этого указателя от стандартных измерителей является то, что он поможет определить только наличие нагрузки, но не её показатели, в отличие от моделей, которые устанавливаются на дин-рейку.

Фото – индикатор с цифровым дисплеем

В основном сейчас используются только устройства напряжения до 1000 Вольт, такой указатель может быть двухполюсный и однополюсный, у них схожая схема, но разные области применения. Во время работы устройства с двумя полюсами нужно подключать к двум токоведущим жилам или контактам, в то время как однополюсный только к одной. Следует знать, что двухполюсные указатели более точные, поэтому они называются высоковольтные и применяются во время сложных работ.

Фото – УН ПИН-90

Помимо этого также есть бесконтактный указатель. Проверка с его помощью проводится без подключения к токоведущим клеммам. Это значительно увеличивает безопасность во время определения напряжения. Устройство оснащено цифровой индикацией, причем на ней отмечается не только наличие вольтажа, но и приблизительный размер благодаря магнитному полю.

Фото – однополюсная модель

Бывают переносные модели на батарейках и варианты, требующие подключения к сети (например, указатель или индикатор напряжения типа Контакт 55ЭМ, УВНУ-10 кВ СЗИП, ЭЛИН-1-СЗ ВЛ). В первом случае питание осуществляется при помощи двух или более батареек, реже от аккумулятора (это УВНК, УННО, УНК, ЭИ-9000/1, Duspol digital LC, Ратон). Это позволяет использовать прибор на местности, при выезде или на ремонтных работах вдали от рабочей сети электропитания.

Фото – импортный УН DT-9902

Принцип работы прибора довольно простой. Во время подключения к сети (при помощи соединения с токоведущими частями) производится сравнение потенциалов. Это повышает или понижает сопротивление в резисторах указателя. Из-за этого индикатор, который потребляет самые малые доли ампер, протекающих в проводах или клеммах, загорается либо издает звуковой сигнал. Если при работе индикатор молчит – то нагрузки нет. В отдельных случаях наблюдается планомерное затухание сигнала – это значит, что в проводах была остаточная энергия.

Требования к указателям напряжения ГОСТ 20493-2001:

1. У приборов до 1000 Вольт обязательно нагрузка индикаторов должно быть не выше 90 В;
2. Однополюсное устройство находится в одном корпусе, в то время как двухполюсное располагается в двух, соединенных между собой шнуром;
3. Любой указатель наличия нагрузки (бортовой, комби и прочие) должны иметь три поверхности: рабочую, изолированную, определяющую и держатель;
4. В отдельных моделях рабочая часть соединяется с индикатором;
5. Поверка указателей производится каждый раз перед использованием при помощи напряжения 2 кВ, при этом она длиться не более минуты.

Нужно помнить, что инструкция по безопасности требует полной подготовки перед использованием аппарата. В частности, необходимо надеть энергокомплект, включающий диэлектрические перчатки и ботинки. Эти требования указаны для электрического прибора, и они отличаются от моделей индикаторов в УАЗ, ВАЗ и прочих авто, судов и т. д.

Видео: UT 15В индикатор напряжения

Блок: 2/3 | Кол-во символов: 3459
Источник: https://www.asutpp.ru/ukazatel-napryazheniya.html

Однополюсные указатели напряжения

Как и индикаторные отвертки они требуют прикосновение только лишь к одной токоведущей части. «Земля» в таком случае будет обеспечиваться через тело человека, который своим прикосновением к специальному контакту указателя напряжения замыкает цепь протекания тока. Как следствие, через человека протекает электрический ток, который не превышает 30 мкА и является безопасным для его жизни и здоровья.

Такие указатели напряжения изготавливают, как правило, в виде автоматических ручек. Их корпус имеет смотровое отверстие и выполнен из изоляционных материалов.

В корпусе, как вы, наверное, уже догадались, размещают резистор и сигнальную лампу. На верхнем конце корпуса закрепляют металлический плоский контакт, для касания пальцем оператора, а на нижнем конце корпуса располагают металлический щуп, которым касаются токоведущих частей.

Его рекомендовано применять в схемах вторичной коммутации – определение фазного провода в электросчетчиках, проверка наличия напряжения на губках автоматических выключателей, предохранителей и других устройств.

Блок: 2/3 | Кол-во символов: 1082
Источник: http://elenergi.ru/princip-dejstviya-i-ustrojstvo-ukazatelej-napryazheniya.html

Разновидности устройств

Указатели до 1000 вольт и выше 1000 вольт имеют разные внешние и конструктивные особенности. Для низковольтных измерений, до 1 кВ, существуют два вида устройств:

• однополюсный, реагирующий на протекание емкостного тока;
• двухполюсный, подает индикацию при протекании через него активного тока.

Однополюсный указатель предназначен для работы в цепях переменного тока, для обнаружения фазного проводника, в цепях освещения, при фазировке электросчетчика, проверке патронов в светильниках. Проще говоря для обнаружения провода под напряжением.

Однополюсные устройства индикации фазы имеют одинаковую конструкцию и, как правило, состоят из газоразрядной лампы индикатора, с порогом зажигания от 90 до 120 вольт и резистора на 1 МОм резистора, подключенного последовательно. Резистор ограничивает ток до безопасной величины, порядка 0.5 мА.

Индикатор ИН — 90 изготовлен в виде отвертки.

К недостаткам таких индикаторов можно отнести низкую чувствительность (порог индикации некоторых приборов начинается от 90 вольт), а также чувствительность к наводкам в соседних проводах.

Для сетей выше 1000 вольт указатели напряжения изготавливаются с рукоятками из изоляционного материала и длинной, исключающую приближение человека к токонесущим элементам. Внешний вид УВН-10 предоставлен на фото ниже:

При измерении напряжений выше 1000 вольт прибегают к использованию дополнительных защитных средств: резиновые рукавицы, боты или изоляционный коврик. Узнать, какие электрозащитные средства используют в установках выше 1000 вольт, вы можете из нашей статьи!

Двухполюсный указатель состоит из двух корпусов из изоляционного материала и гибкого медного проводника в изоляции, который их соединяет. Схема двухполюсного индикатора напряжения типа УНН-10:

В данной схеме газоразрядный индикатор шунтирован резистором, что делает схему нечувствительной к наведенным напряжениям. Также на его основе выпускается индикатор с указателем величины напряжения УН-1:

В данном приборе используется специальная линейная газоразрядная лампа и шкала на корпусе с градуировкой 127, 220, 380, 500 Вольт.

Также существуют указатели напряжения универсальные, для определения фазы и нуля, проверки наличия напряжения и с указанием ее величины от 12 до 380 В. Для работы в цепях постоянного, до 500 вольт и переменного тока, до 380 вольт. Их можно дополнительно использовать для прозвонки целостности соединений.

В данных приборах в качестве световых индикаторов используют светодиоды, а в роли источника питания конденсатор большой емкости.

Цифровой указатель напряжения имеет ЖК экран с нанесенными значениями в вольтах. При максимальном значении 220 вольт на экране светятся все значения от минимального до максимума. Т.е. данный тестер показывает приблизительное значение. Единственный плюс такой модели — отсутствие источника питания.

Бесконтактные индикаторы предназначены для обнаружения проводников под напряжением, в том числе и скрытых в стенах или панелях. Схема данного прибора реагирует на переменное электромагнитное поле, оснащена световой и звуковой индикацией. О данных устройствах мы рассказывали больше, когда говорили о том, как найти электропроводку в стене.

Блок: 2/3 | Кол-во символов: 3176
Источник: https://samelectrik.ru/kakie-byvayut-ukazateli-napryazheniya.html

Правила использования

Перед использованием указателя напряжения необходимо удостовериться в его исправности. Для этого в заведомо рабочей сети нужно проверить индикацию прибора. Только после положительного результата разрешается его использовать.

Запрещено в качестве индикатора использовать лампу накаливания, ввиду ее низкой надежности, и высокой травмоопасности. При поиске фазы необходимо установить щуп указателя на интересующий проводник, прибор держать в правой руке, левую руку спрятать за спину, большим пальцем правой руки дотронутся до торцевого контакта. Это для однополюсного индикатора.

Для двухполюсного щуп с индикатором поставить на интересующий проводник или клемму, а второй щуп на ноль или соседнюю фазу. Как видно ничего сложного нет в работе с данными приборами. Помните об опасности работы под напряжением, и соблюдайте меры личной безопасности.

Напоследок рекомендуем просмотреть видео, в котором специалист рассмотрел существующие типы указателей напряжения и правила пользования данными устройствами:

Вот мы и рассмотрели виды, назначение и правила пользования указателем напряжения. Надеемся, предоставленная информация была для вас познавательной и полезной!

Будет интересно прочитать:

Блок: 3/3 | Кол-во символов: 1217
Источник: https://samelectrik.ru/kakie-byvayut-ukazateli-napryazheniya.html

Двухполюсные указатели напряжения

Такие указатели напряжения требуют прикосновение не к одной, а к двум частям электроустановки. Принцип действия – свечение неоновой лампы или накаливания лампы (мощность не более 10 Вт) при протекании через нее тока, который возникает из-за наличия разности потенциалов между частями электроустановки к которым в данный момент подключен указатель. При этом лампа потребляет очень малый ток (несколько миллиампер), но при этом обеспечивает довольно устойчивый и четкий сигнал.

Для ограничения тока, протекаемого через лампу, в цепь, последовательно лампе, ставят резистор.

Двухполюсные указатели напряжения применимы для установок переменного и постоянного тока. Однако при использовании данного устройства в цепи переменного тока металлические части указателя (щуп, цоколь лампы, провод) могут создавать емкость относительно фазы или земли достаточную для того, чтоб при касании всего лишь к одной фазе электроустановки лампочка загоралась. Поэтому данную схему дополняют шунтирующим резистором, который шунтирует неоновую лампу.

Использовать вместо указателя напряжения обычную лампу накаливания, ввернутую в патрон (ее называют контрольной лампой), заряженный двумя проводами запрещено. Это вызвано тем, что лампа, при включении ее на большее чем она рассчитана напряжение, может произойти разрыв ее колбы защитной, что может привести к травмам оператора или операторов проводящих проверку наличия напряжения сети.

Проверка наличия напряжения однополюсным указателем напряжения:

Проверка наличия напряжения двухполюсным указателем напряжения:

Блок: 3/3 | Кол-во символов: 1624
Источник: http://elenergi.ru/princip-dejstviya-i-ustrojstvo-ukazatelej-napryazheniya.html

Цифровой индикатор напряжения: для чего он нужен, как выбрать

Самым распространенным цифровым двухполюсным индикатором напряжения является мультиметр. Этот электрический измерительный прибор позволяет определить не только напряжение переменного и постоянного тока в сети, но и его силу и частоту. Пользоваться таким прибором очень просто, поэтому его часто выбирают для решения бытовых задач.

Цифровой индикатор напряжения очень просто использовать

К основным критериям выбора бытового мультиметра относят:

1. Процент его погрешности. Так, степень погрешности бытового мультиметра должна быть не более 3%. Для профессиональных моделей этот показатель может быть снижен до 0,025%.
2. Скорость срабатывания прибора. Чем больше выработок может дать прибор в секунду, тем лучше. Качественный мультиметр должен давать от 70 до 300 выборок в секунду.
3. Класс электробезопасности мультиметра. Выбор мультиметра по классу зависит от того в каких цепях его будут использовать. Так современные мультиметры можно использовать в локальных, внутренних низковольтных и внешних распределительных цепях.
4. Уровень пожаробезопасности прибора. Современные измерительные устройства должны оснащаться функциями защиты от перегрузок и автоотключением.

Не стоит забывать и про комплектацию прибора. Большинство современных мультиметров оснащаются специальными щупами или токовыми клещами, позволяющими проводить измерения без выпайки элемента из схемы и не нарушая изоляции проводника.

Блок: 4/7 | Кол-во символов: 1467
Источник: http://6watt.ru/elektrooborudovanie/rele-i-datchiki/ukazatel-napryazheniya

Автомат с индикатором напряжения: виды, советы по выбору

Отдельно выделяют световые индикаторы для установки в электрических распределительных щитах. Такие индикаторы имеют вид автомата, устанавливаются на DIN-рейку, могут использоваться как в однофазных (220 В), так и в трехфазных (380 В) сетях.

В зависимости от возможности подключения фаз автоматы делят на:

• Индикаторы наличия напряжения на 1 фазу;
• Индикаторы наличия напряжения на 2 различные фазы;
• Указатели наличия напряжения в трехфазной сети;
• Устройства для индикации напряжения в сетях на 12В и 24В.

Кроме того, автоматы делят в зависимости типа фазы. Так, отдельно можно установить автомат с индикатором напряжения на А (L1), В (L2) и С (L3) фазу. При этом, световая индикация будет соответствовать по цвету фазе. Так, например, автомат на А фазу будет иметь световую индикацию желтого цвета. Автоматические индикаторы на 3 фазы будут иметь отдельные световые индикаторы под каждую фазу.

Блок: 5/7 | Кол-во символов: 957
Источник: http://6watt.ru/elektrooborudovanie/rele-i-datchiki/ukazatel-napryazheniya

Как работает указатель напряжения (видео)

Индикаторы высокого и низкого напряжения – это наиболее распространенные средства электрозащиты, которые позволяют идентифицировать наличие напряжения на объекте. На сегодня, все индикаторы делятся на низковольтные и высоковольтные. Кроме того, приборы различаются по внешнему виду, диапазону измерений, типу индикации. Выбрать наиболее подходящий индикатор можно, лишь разобравшись в классификации измерительных приборов. А в этом вам помогут представленные выше рекомендации!

Блок: 7/7 | Кол-во символов: 565
Источник: http://6watt.ru/elektrooborudovanie/rele-i-datchiki/ukazatel-napryazheniya

Как выбрать автоматический индикатор напряжения сети

При выборе автомата с индикатором напряжения необходимо обращать внимание на диапазон отображаемых напряжений. Так, устройства на 3 фазы должны определять напряжение в диапазоне от 100 до 415 В. Автоматы на 2 фазы могут определять напряжение в диапазоне от 100 до 300 В. Чем шире диапазон напряжения устройства, тем лучше.

Выбирая прибор, следует обращать внимание на степень погрешности устройства

Кроме того, при выборе автоматических выключателей с индикаторами напряжения следует учитывать:

• Степень погрешности устройства. Стандартные бытовые автоматы с индикацией напряжения должны иметь степень погрешности не более 3%.
• Степень защиты устройства. Для внутренней установки подойдут устройства с маркировкой IP20.
• Тип индикации. Простые модели имеют световую индикацию, представленную светодиодной лампой. Более дорогие модели могут иметь 3-х разрядное цифровое табло для отображения значений.
• Индекс устройства. Простые автоматы обозначаются буквой С. Автоматы с индикацией, чаще всего, имеют маркировки PMT, PH, SVN в зависимости от типа устройства и производителя.

Приобрести автоматы с индикацией можно в специализированных магазинах для электриков или интернет-магазинах. При этом, следует учитывать производителя автомата. Так, наиболее качественными считаются устройства немецкого производства. Среди лучших производителей электроизмерительных приборов можно выделить компанию Hager.

Блок: 6/7 | Кол-во символов: 1457
Источник: http://6watt.ru/elektrooborudovanie/rele-i-datchiki/ukazatel-napryazheniya

1. https://www.asutpp.ru/ukazatel-napryazheniya.html: использовано 2 блоков из 3, кол-во символов 3735 (20%)
2. https://samelectrik.ru/kakie-byvayut-ukazateli-napryazheniya.html: использовано 2 блоков из 3, кол-во символов 4393 (23%)
3. https://elquanta.ru/instrument/ukazatel-napryazheniya.html: использовано 1 блоков из 4, кол-во символов 543 (3%)
4. http://6watt.ru/elektrooborudovanie/rele-i-datchiki/ukazatel-napryazheniya: использовано 6 блоков из 7, кол-во символов 7755 (41%)
5. http://elenergi.ru/princip-dejstviya-i-ustrojstvo-ukazatelej-napryazheniya.html: использовано 2 блоков из 3, кол-во символов 2706 (14%)

Генетические индикаторы напряжения | BMC Biology

Подобно тому, как Лейбниц входит в свою мельницу разума, представьте, что он наблюдает в реальном времени за работой нервной системы, с нейронами, получающими возбуждающий и тормозной постсинаптические потенциалы (EPSP и IPSP соответственно), интегрируя их в общую электрическую систему. ответ и генерирование потенциалов действия (AP), которые передаются другим нейронам. Такой эксперимент в сновидениях, являющийся своего рода «святым Граалем» нейробиологии, можно было провести с помощью визуализации мембранного потенциала.Аромат этого уже можно оценить по визуализации кальция [1,2,3], где, используя либо органические, либо генетически закодированные индикаторы кальция, можно отслеживать активность популяций нейронов у бодрствующих животных, хотя и с медленным разрешением по времени и без способность наблюдать отдельные спайки во время высокочастотных последовательностей спайков или измерять синаптические потенциалы [4,5,6].

Визуализация напряжения нейронов затруднена по многим причинам. Хотя мембранный потенциал весьма значителен по амплитуде (до десятых долей вольта), он существует в ограниченном пространстве, тонкой плазматической мембране и связанной с ней дебаевской длине, толщиной всего несколько нанометров.Из-за этого, чтобы измерить электрическое поле, датчики должны быть нацелены с нанометровой точностью, с небольшой вероятностью ошибки. Более того, сенсоры должны быть специально нацелены на плазматическую мембрану, поскольку подавляющее большинство клеточных мембран являются внутриклеточными, которые, будучи помечены датчиками напряжения, вносят только фоновый вклад в сигнал. Помимо этой задачи нацеливания, абсолютная тонкость мембраны означает, что там можно разместить только несколько сенсорных молекул, поэтому об изменениях напряжения можно сообщить только с использованием очень небольшого количества фотонов, требующих эффективных хромофоров, сильных источников света и временного или пространственного усреднения.Тем не менее, сигналы напряжения мембраны являются миллисекундными, а нейроны имеют богатую дендритную или аксональную морфологию, где сигналы напряжения необходимо измерять, что затрудняет пространственное или временное усреднение. Еще больше усложняет ситуацию то, что даже если нацеливание было эффективным и метило все клетки и процессы, клубок нейропиля млекопитающих остается оптически неразрешимым для традиционной микроскопии. Кроме того, мембранные потенциалы градуированы по амплитуде, поэтому измерения должны иметь значительный динамический диапазон с, в идеале, линейными передаточными функциями в физиологическом диапазоне от – 100 до 100 мВ.Последняя трудность возникает, поскольку плазматическая мембрана – это не просто еще один клеточный компартмент, а именно тот, который защищает нейрон извне и целостность которого имеет первостепенное значение. Это делает его чрезвычайно чувствительным к любым возмущениям, от добавления дополнительных молекул или зарядов, которые могут повлиять на его биохимические или электрические свойства, до фотоповреждений от образования свободных радикалов кислорода из-за фотовозбуждения индикаторов напряжения или эндогенных хромофоров.

Этот запретительный набор трудностей не остановил исследователей от работы с изображениями напряжения [7,8,9], что привело к появлению множества различных методологических подходов, демонстрирующих большую изобретательность [10]. В самом деле, в методах оптического измерения мембранного потенциала использовались самые разные стратегии, такие как (i) повторное разделение, при котором хромофоры перемещаются в мембрану и выходят из нее с изменениями напряжения; (ii) переориентация, при которой электрическое поле изменяет относительное выравнивание хромофора относительно мембраны; (iii) электрохромизм, когда мембранный потенциал модулирует основное и возбужденное состояния хромофора, изменяя длину волны возбуждения или излучения; (iv) резонансный перенос энергии Ферстера (FRET), когда вызванные напряжением конформационные или спектральные изменения изменяют эффективность передачи энергии хромофоров; (v) тушение, когда мембранный потенциал влияет на молекулярные взаимодействия, снижающие интенсивность флуоресценции; (vi) индуцированная напряжением димеризация / агрегация хромофоров, изменяющая их спектры; (vii) электрооптическая модуляция генерации второй гармоники (ГВГ) хромофоров; (viii) плазмонный эффект наночастиц по усилению сигналов от соседних хромофоров; и (ix) отображение показателя преломления или других внутренних оптических изменений клетки из-за ее электрической активности.

Используя некоторые из этих механизмов, за последние четыре десятилетия исследователи синтезировали органические потенциалочувствительные красители для измерения мембранного потенциала in vitro и in vivo [7,8,9, 11,12,13,14]. Эти красители были особенно эффективны в препаратах беспозвоночных с большими и прочными нейронами и с небольшим нейропилем [15,16,17], а также в некоторых препаратах млекопитающих, либо in vitro [18, 19], либо путем инъекции красителей в отдельные клетки [ 20, 21], или использовать их для измерения объема ткани in vitro [22, 23] или in vivo, но без разделения отдельных клеток [8].Несмотря на эту новаторскую работу, вольтажная визуализация препаратов млекопитающих in vivo с разрешением отдельных клеток остается проблемой, а визуализация активности нейронных цепей in vivo вместо этого обычно выполняется с помощью кальциевых индикаторов в сочетании с двухфотонным возбуждением для оптического проникновения и секционирование [4, 24, 25].

Недавняя разработка генетически кодируемых индикаторов напряжения (GEVI) представляет собой новую стратегию, которая с помощью белковой инженерии может преодолеть некоторые ограничения органических красителей, чувствительных к напряжению (рис.1). Основываясь на успешной разработке генетически кодируемых индикаторов кальция [26], открытие чувствительного к напряжению домена (VSD) из фосфатазы [27, 28] позволило создать семейство GEVI, связав его с флуоресцентными белками в различных конфигурациях ( Рис.1, слева). Кроме того, было разработано второе семейство GEVI на основе микробных родопсинов, которые демонстрируют слабую, но чувствительную к напряжению флуоресценцию [29]. Наконец, третья категория генетических датчиков напряжения использует гибридный подход с взаимодействием органических и белковых компонентов [30], используя совместные преимущества химического и генетического дизайна.В следующих разделах мы даем краткий обзор этих трех семейств генетических индикаторов напряжения и приводим сравнение их производительности в таблице 1. Учитывая, насколько быстро эта область развивается, наш обзор является лишь моментальным снимком во времени, и мы поощряем читателя. чтобы быть в курсе новых показателей напряжения по мере их публикации.

Исторический обзор генетических индикаторов напряжения. Датчики делятся на три различных семейства на основе доменов измерения напряжения (VSD; слева, ), микробных родопсинов (, средний ) или хемогенетических зондов ( справа, ) и расположены в хронологическом порядке в соответствии с годом первого отчета.Цвет рамки относится к длине волны активации, указанной в документе или полученной из спектра флуоресцентного белка. Черные звезды обозначают зарегистрированные двухфотонные измерения. Обратите внимание, что HAPI-Nile Red и Voltron также основаны на родопсине. См. Текст для ссылок

GEVI на основе чувствительных к напряжению доменов

Индикаторы напряжения на основе VSD состоят из VSD и флуоресцентного белка (рис.2а). Первый индикатор напряжения на основе VSD, FlaSh, использовал VSD из потенциалзависимого калиевого канала [31], но имел ограниченное применение в препаратах для млекопитающих. Совсем недавно VSD фосфатазы из Ciona Кишечник [27] систематически использовался для создания GEVI с улучшенным переносом через мембрану и повышенной производительностью [32, 33]. Скрининг флуоресцентных белков, слитых с этим VSD, привел к созданию ArcLight, состоящему из VSD и мутантного суперэклиптического pHluorin [34]. Хотя ArcLight обладает хорошей чувствительностью к напряжению, его медленная кинетика флуоресценции приводит к низкой амплитуде сигнала и ограниченному временному разрешению для обнаружения пиков.Для ускорения кинетики в VSD Ciona были внесены мутации, что дало улучшенные варианты ArcLight [35,36,37]. В качестве альтернативы VSD Ciona , VSD другой потенциалочувствительной фосфатазы из Gallus gallus был использован для вставки GFP суперпапки с круговой перестановкой во внеклеточную петлю VSD между третьей и четвертой трансмембранными спиралями, чтобы получить более быстрое индикаторы напряжения, получившие название ускоренного датчика потенциалов действия (ASAP) [38,39,40,41].В последнее время были предприняты попытки изменить полярность оптических сигналов; в отличие от некоторых из более ранних индикаторов, эти новые индикаторы напряжения (Marina, FlicR1 и FlicR2) увеличивают яркость, когда мембрана деполяризована, и демонстрируют более низкую флуоресценцию при потенциалах покоя мембраны (рис. 2b, c) [42, 43]. Кроме того, недавно были разработаны GEVI на основе VSD (рис. 2b) [42, 44, 45].

Последние GEVI на основе VSD. a Схематический чертеж двух конфигураций GEVI на основе VSD. Слева : слияние VSD с внутриклеточным флуоресцентным белком (FP). Справа : Вставка ДМЖП с внеклеточной циркулярной перестановкой FP. b Слева : Экспрессия FlicR1, индикатора с красным смещением и обратной полярностью, в диссоциированном нейроне гиппокампа. Справа : оптический ( красный, ) и электрический ( черный, ) ответы на потенциалы действия с частотой 5 Гц, зарегистрированные с помощью однофотонной визуализации. Изменено с разрешения [43]. c Слева : Экспрессия Марины, зеленого индикатора с обратной полярностью в культивируемых нейронах гиппокампа. Справа : Спонтанная импульсная активность в корковом нейроне острого среза головного мозга, записанная с помощью однофотонной визуализации. Изменено из [44] с разрешения

VSD успешно использовались для измерений как одиночных нейронов, так и нейронных цепей, что позволяет регистрировать динамику мембранного потенциала в небольших нейрональных компартментах, труднодоступных с помощью обычных электрофизиологических методов. Например, измерения мембранного потенциала в дендритных шипах in vitro были выполнены с помощью ArcLight, сочетая однофотонную визуализацию напряжения с двухфотонным снятием каркаса глутамата [46].Кроме того, потенциалы действия в дендритах, распространяющиеся в обратном направлении, регистрировались с помощью ASAP2s с двухфотонной микроскопией [40]. GEVI на основе VSD также использовались in vivo. С помощью одно- или двухфотонной визуализации напряжения в широком поле можно отобразить сенсорно-вызванные или спонтанные потенциалы с больших территорий, хотя и без разрешения отдельных клеток [47,48,49]. Мониторинг подпороговой динамики мембранного потенциала и потенциалов действия с клеточным разрешением был достигнут in vivo с использованием VSD на основе GEVI у Drosophila [39, 50].Но визуализация напряжения с разрешением отдельных клеток in vivo была сложной задачей для препаратов млекопитающих из-за рассеяния света и плохого отношения сигнал / шум (SNR). Недавно и ArcLight-MT, и недавно разработанный ASAP3 были использованы для регистрации подпороговых потенциалов и потенциалов спонтанного действия у бодрствующих или анестезированных мышей in vivo при двухфотонном возбуждении с разрешением одной клетки [49]. Также недавно у плодовых мушек in vivo были объединены вольтамперная визуализация и кальциевая визуализация [39].

Хотя производительность GEVI на основе VSD улучшилась, создание изображений напряжения с их помощью все еще остается сложной задачей. Необходимы дальнейшие успехи, особенно в области визуализации in vivo. В частности, желательны лучшие характеристики при двухфотонном возбуждении и разработка индикаторов с красным смещением для многоцветной визуализации и комбинации с оптогенетикой. Также представляется важным разработать более яркие GEVI на основе VSD для получения более высоких SNR, сравнимых с визуализацией кальция. Наконец, как и в случае с другими индикаторами напряжения, быстрое фотообесцвечивание GEVI на основе VSD может помешать долгосрочному мониторингу динамики мембранного потенциала.Чтобы преодолеть фотообесцвечивание, улучшение GEVI типа Marina и FlicR кажется особенно многообещающим, поскольку они показывают низкую флуоресценцию в состоянии покоя и становятся ярче при деполяризации мембранного потенциала.

GEVI на основе родопсина

GEVI на основе микробных родопсинов делятся на два различных класса. Один использует родопсин и как датчик напряжения и как флуоресцентный репортер, в то время как другой использует чувствительный к напряжению родопсин, связанный с флуоресцентной меткой (рис. 3a). Первым микробным датчиком напряжения на основе родопсина был PROPS (оптический датчик протонов протеородопсина) [51].Авторы обнаружили, что в протеородопсине, поглощающем зеленый цвет, состояние протонирования основания Шиффа сетчатки (RSB), которое ковалентно прикрепляет хромофор к апопротеину, в значительной степени определяет цвет и флуоресценцию родопсина. Они пришли к выводу, что изменение мембранного напряжения должно влиять на локальный электрохимический потенциал вокруг RSB и тем самым изменять флуоресценцию белка [51]. Посредством мутагенеза естественная светоактивированная ионная транспортная активность микробного родопсина была отменена, и RSB pk _a был сдвинут, чтобы воспринимать мембранные потенциалы в физиологическом диапазоне.Использование PROPS было ограничено Escherichia coli , но, используя аналогичный механизм восприятия, Archaerhodopsin 3 haloarchaea Halorubrum sodomense , известный как Arch, был впоследствии разработан для визуализации напряжения нейронов млекопитающих [29]. В последние годы усовершенствования сенсоров на основе родопсина в основном связаны с мутациями в Arch [52, 53], что привело к улучшенным индикаторам, таким как QuasAr 1-3 [54, 55], NovArch [56] и, недавно, Archon 1 и 2. [57] (рис. 1). И QuasAr3, и Archon1 использовались для успешной регистрации поездов потенциала действия in vitro с хорошим SNR [55, 57] (Таблица 1) и использовались in vivo, хотя и с однофотонным возбуждением [55, 57].

Недавние ГЭВИ на основе родопсина. a Представление двух типов GEVI на основе родопсина с GEVI типа PROPS ( слева, ) и GEVI на основе eFRET ( справа, ). b Слева : конфокальные изображения экспрессии QuasAr3 в срезах мозга; стержень 50 мкм. Средний : записи патч-зажим ( черный, ) с соответствующими следами флуоресценции ( красный, ) в острых срезах головного мозга. Справа : наложение электрического и оптического сигнала для одной точки доступа.Изменено с разрешения [55]. c Слева : Экспрессия Archon1 в острых срезах головного мозга; стержень 25 мкм. Середина : флуоресценция Archon1 ( розовый, ; одно испытание) и соответствующие электрические следы ( черный, ) в культивируемых клетках с наложением обоих сигналов для AP, указанных стрелкой. Справа : Изменения флуоресценции (однократное испытание) Archon 1 после изменения напряжения, подобного потенциалу действия (, черный, ), на 200 Гц в нейроне с ограниченным напряжением в культуре.Изменено с разрешения [57]. d Слева : конфокальное изображение экспрессии VARNAM в пирамидных нейронах в фиксированных постнатальных срезах головного мозга. Середина : одновременные оптические ( красный, ) и электрические записи (, черный, ), вызванные подачей тока 10 Гц ( слева, ) и 50 Гц ( справа, ) с наложением обоих сигналов для указанной точки доступа. Справа : Изменения мембранного потенциала, вызванные активацией канала родопсина Cheriff ( синий, ), отслеживаются электрически ( черный, ) и оптически ( красный, ).Изменено с разрешения [44]

Комбинация сенсора и репортера в одном небольшом белке в микробных родопсинах кажется элегантной и обеспечивает время отклика в субмиллисекундном диапазоне [29, 51, 54, 58] и, кроме того, большую чувствительность ( как ΔF / F на 100 мВ) от 30 до 90% [53,54,55,56,57] делают их очень многообещающими. Тем не менее, как индикаторы напряжения, микробные родопсины страдают недостатками, которые не смогли преодолеть даже самые последние варианты. Поскольку белки оптимизированы для переноса ионов, а не флуоресценции, их квантовый выход обычно на порядки ниже, чем у флуоресцентных белков, таких как GFP [29], что создает низкую яркость и требует высокой интенсивности освещения в диапазоне от нескольких десятков до сотен Вт / см. ² , даже для последних вариантов [55, 57].Чтобы улучшить яркость, микробные родопсины были объединены с флуоресцентными белками, в результате чего получилась вторая подгруппа сенсоров на основе родопсина: электрохромные FRET (eFRET) GEVI (рис. 3a), где родопсин, по сути, служит VSD. Здесь флуоресцентный белок слит на С-конце с седьмой трансмембранной спиралью, обеспечивая чувствительное к напряжению безызлучательное тушение флуорофора с помощью родопсина, механизм, уже исследованный ранее с органическими красителями [59]. Первоначальные подходы объединили макродопсин, световой протонный насос из L.maculans (пик поглощения 550 нм) до mCitrine или mOrange2 [60]. Хотя MacQ-mCitrine и mOrange2 немного медленнее, чем сенсоры чистого родопсина, они все же генерируют полный амплитудный ответ в течение 5 мс и достоверно сообщают о потенциалах действия в культивируемых нейронах с 5-7% ΔF / F на спайк [60]. Следуя тому же подходу, QuasAr2 был слит с несколькими флуоресцентными белками (eGFP, Citrine, mOrange2, mRuby2), что дало сенсоры со сходной кинетикой и чувствительностью [61]. Использование более быстрого родопсина Acetabularia (Ace) в качестве тушителя для mNeonGreen позволило значительно ускорить время отклика без потери чувствительности [62].Последним дополнением к GEVI eFRET является недавно опубликованный VARNAM, который также использует Ace, связанный с флуоресцентным белком mRuby3. VARNAM требует низкой интенсивности света (1,5 Вт / см2), сохраняет быструю кинетику Ace-mNeonGreen и демонстрирует высокую фотостабильность [44], в то время как его активация с красным смещением делает его легко комбинируемым с оптогенетическими приводами, активируемыми синим светом. Однако даже VARNAM не смог преодолеть недостаток GEVI на основе родопсина: слабую производительность при двухфотонном освещении [44].

Хемогенетические индикаторы

Хотя GEVI имеют то преимущество, что они могут быть генетически нацелены на плазматические мембраны и клеточные популяции, они могут иметь недостатки из-за низкой яркости, плохой фотостабильности и медленной кинетики. Но, как уже упоминалось, оптические измерения потенциала клеточной мембраны выполнялись на протяжении десятилетий с небольшими органическими синтетическими молекулами [12, 13, 15]. Эти красители чувствительны к напряжению, часто из-за электрохромизма, и могут иметь большие частичные изменения флуоресценции и отличные кинетические характеристики и фотофизические свойства [8, 11, 63].В то же время эти маленькие липофильные молекулы вызывают неспецифическое окрашивание ткани, серьезно нарушая SNR и разграничение клеток. Чтобы обойти эти проблемы, появилась гибридная стратегия, использующая вместе химические и генетические индикаторы: сочетание оптических свойств низкомолекулярных флуорофоров с генетическим нацеливанием (рис. 1) [30, 64, 65, 66]. Термин «хемогенетика», обычно используемый для небольшой молекулы, которая активирует генно-инженерные белки, был применен к этим гибридным индикаторам напряжения [67].Мы рассматриваем три общих класса индикаторов хемогенетики в соответствии с молекулярным механизмом сенсорного домена и флуоресцентного репортера.

Хемогенетические датчики на основе FRET

Один из первых хемогенетических датчиков, названный гибридным датчиком напряжения (hVOS), использовал экзогенно добавленную липофильную молекулу, которая в зависимости от напряжения подавляла флуоресцентные белки, рекрутированные на мембрану. hVOS использовала двухкомпонентную стратегию на основе FRET, изначально разработанную без генетических компонентов [68], но адаптированную для генетического нацеливания (рис.4а) [69,70,71,72,73]. Первый компонент состоит из флуоресцентного белка с присоединенными фарнезилированными и пальмитоилированными мотивами, которые прикрепляют его к плазматической мембране [70, 72]. Второй компонент – нефлуоресцентное синтетическое соединение дипикриламин (DPA), которое служит в качестве чувствительного к напряжению акцептора FRET (тушителя). Поскольку DPA является липофильным, но отрицательно заряженным, он распределяется в мембране в зависимости от напряжения, перемещаясь во внутренний слой во время деполяризации, что гасит флуоресценцию белка.Но поскольку DPA увеличивает емкость мембраны, следует использовать низкую концентрацию, чтобы не нарушать естественные физиологические реакции [73]. Недавнее использование этого сенсора показывает большую универсальность для представления активности нервной популяции с использованием клеточно-специфического генетического нацеливания у трансгенных мышей (рис. 4b).

Хемогенетические индикаторы напряжения. a Схематическое изображение hVOS, состоящего из флуоресцентного белка, прикрепленного к плазматической мембране, в сочетании с нефлуоресцентным синтетическим соединением дипикриламином (DPA), которое служит в качестве чувствительного к напряжению акцептора FRET. b Сотовая визуализация напряжения с разрешением hVOS. Срезы гиппокампа мышей hVOS :: Fos, экспрессирующие зонд hVOS в гранулярных клетках Cre-Fos-зависимым образом. Слева : флуоресценция в срезах мозга после скрещивания Ai35-hVOS с мышами Cre-Fos, демонстрирующая нейроны, экспрессирующие hVOS, в слое гранулярных клеток гиппокампа. Справа : Ответ четырех нейронов в срезе гиппокампа от мыши hVOS :: Fos на электрическую стимуляцию. c Схематическое изображение VoltageSpy, состоящего из экспрессии SpyCatcher на клеточной поверхности и последующего внеклеточного взаимодействия с красителем VF. d Визуализация субклеточного напряжения с помощью VoltageSpy. Культивированные нейроны гиппокампа, коэкспрессирующие SpyCatcher и ядерный mCherry и меченные VoltageSpy, были захвачены при 500 Гц под широкопольным флуоресцентным микроскопом. Слева : VoltageSpy показано зеленым и окрашивание ядер красным . Середина : большее увеличение выбранных дендритных областей. Шкала 20 мкм. Справа : отображение напряжения в дендритах, показывающее вызванные потенциалы действия в выбранных областях интереса, закодированные цветами, указанными на панели.Изображения и следы изменены с разрешения [69] ( b ) и [82] ( d )

Второй тип хемогенетических сенсоров на основе FRET использует микробные родопсины в качестве сенсоров [61, 62]. Как уже упоминалось, колебания мембранного напряжения вызывают изменение абсорбции родопсинов, которое можно считывать с помощью сайт-специфически лигированного органического флуорофора. Электрохромный FRET родопсина с помощью лигирования флуорофора (FlareFRET) действует как флуорофор, селективно присоединенный к неприродной аминокислоте, кодируемой внутри родопсина [74].Этот датчик обладает широкой универсальностью, позволяя добавлять цветовую палитру и достигать 35,9% ΔF / F на 100 мВ и отклик в миллисекундах.

Наконец, недавняя разработка новых родаминовых красителей с высокой фотостабильностью и яркостью, таких как серия Janelia Fluor (JF), привела к разработке Voltron [42]. JFs совместимы с белковыми метками и преодолевают гематоэнцефалический барьер в экспериментах на млекопитающих in vivo. Voltron сочетает в себе чувствительный к напряжению микробный родопсин с самомеченным белковым доменом, который ковалентно связывает синтетический флуорофор JF [75, 76].Зависимые от напряжения изменения в спектре поглощения родопсина обратимо модулируют степень тушения флуоресценции красителя посредством FRET. С помощью Voltron можно измерять импульсные нейронные импульсы и подпороговые напряжения в личиночных рыбках данио, плодовых мушках и мозге мышей [42].

Хемогенетические сенсоры на основе ферментов

Эта конструкция основана на генетически закодированном ферменте на поверхности клетки, который активирует предшественник органического индикатора напряжения. Например, водорастворимый краситель-предшественник гидролизуется щелочной фосфатазой, которая отщепляет полярную группу, усиливая ее липофильный характер [30].Это значительно улучшает нацеливание и накопление модифицированного электрохромного красителя в мембране клетки, экспрессирующей фосфатазу. Хромофор аминостирилпиридиния (ASP) является примером предшественника чувствительного к напряжению красителя с фосфатной группой, присоединенной к его головной группе [30, 65]. Первое поколение красителей на основе ASP приводило к окрашиванию внутренних органелл за секунды. Используя ту же стратегию, второе поколение сенсоров с использованием ANNINE-6, одного из наиболее чувствительных к напряжению красителей, показало изменение интенсивности ΔF / F на 50% на 100 мВ и могло быть использовано для нацеливания in vivo [66].Одним из основных преимуществ этих методов является то, что мембраны можно маркировать большим количеством молекул.

Новое поколение сенсоров на основе ферментов (VF-EX) представляет собой хемогенетический зонд, в котором генетически кодируемая эстераза выводит из клетки краситель VF в определенных нейронах [77]. Затем VF использует фотоиндуцированный перенос электронов (PeT) в качестве триггера интенсивности флуоресценции, зависящего от мембранного потенциала [78,79,80]. VF обладает скоростью, яркостью и чувствительностью, чтобы сообщать о потенциалах действия в нейронах в единичных испытаниях.Кроме того, VF химически модифицирован, чтобы он был минимально флуоресцентным в качестве предшественника и активируется при ферментативной активности. Нацеленная эстераза печени свиньи (PLE) на мембране расщепляет VF на поверхности клетки [81]. Используя этот подход, можно измерить потенциалы действия в культивируемых нейронах [77]. Кроме того, по сравнению с некоторыми GEVI [70], VF-EX демонстрирует улучшенное соотношение сигнал / шум и изменение флуоресценции, маркируя дендриты и дендритные шипы [77].

Хемогенетические датчики с привязкой к метке

Последняя категория хемогенетических зондов улавливает химические флуорофоры в плазматической мембране с помощью белкового каркаса.В системе VoltageSpy используется сконструированная молекула клеточной адгезии, взаимодействующая с красителем VF, содержащим саркозин (рис. 4a). Это взаимодействие стало возможным благодаря линкеру полиэтиленгликоля (ПЭГ) между небольшим пептидом из 13 остатков и красителем VF [82]. Локализация VoltageSpy определяется экспрессией белка SpyCatcher на клеточной поверхности. Об улучшении обнаружения напряжения по сравнению с обычно используемыми генетическими индикаторами напряжения в культуральных клетках сообщалось для VoltageSpy [82].Используя этот датчик, можно измерять напряжения в терминалах аксонов, дендритах и ​​шипах (рис. 4d). Наконец, гибридный сенсор, прикрепленный к белковой метке, HAPI-Nile, основанный на индикаторе напряжения Nile Red, демонстрирует флуоресцентные изменения в физиологическом диапазоне мембранного потенциала [83]. С помощью этого зонда можно обнаруживать запускаемые потенциалы действия и над / подпороговую активность в культивируемых нейронах.

Селективная локализация синтетического индикатора напряжения в интересующих клетках с использованием генетически закодированных белковых тегов кажется многообещающей.Некоторые проблемы, связанные с этими гибридными хемогенетическими стратегиями, связаны с их потенциальной токсичностью и избирательным применением экзогенного липофильного соединения к нейрональным мембранам в интактной ткани для использования in vivo.

Шаблон для электронной подачи в журналы ACS

% PDF-1.7 % 1 0 объект > / Метаданные 4 0 R / ViewerPreferences 5 0 R >> эндобдж 6 0 obj / CreationDate (D: 20181107214634-08’00 ‘) / ModDate (D: 20181107214634-08’00 ‘) /Режиссер / Ключевые слова () >> эндобдж 2 0 obj > эндобдж 3 0 obj > эндобдж 4 0 obj > транслировать Microsoft® Word 2016

C4282 индикатор напряжения >> 57 шт купить недорого у производителя

Внимание !!! Доставка всех инструментов, представленных на сайте, осуществляется по всей территории следующих стран: Россия, Украина, Беларусь, Казахстан и другие страны СНГ.

По России существует налаженная система доставки в города: Москва, Санкт-Петербург, Сургут, Нижневартовск, Омск, Пермь, Уфа, Норильск, Челябинск, Новокузнецк, Череповец, Альметьевск, Волгоград, Липецк, Магнитогорск, Тольятти, Когалым. Кстово Новый Уренгой Нижнекамск, Нефтеюганск, Нижний Тагил, Ханты-Мансийск, Екатеринбург, Самара, Калининград, Надым, Ноябрьск, Выкса, Нижний Новгород, Калуга, Новосибирск, Ростов-на-Дону, Верхний Чеарскма, Казань, Пышкма, Мурманский, Красноярский, Красноярский , Всеволожск Ярославль, Кемерово, Рязань, Саратов, Тула, Усинск, Оренбург, Новотроицк, Краснодар, Ульяновск, Ижевск, Иркутск, Тюмень, Воронеж, Чебоксары, Нефтекамск, Новгород, Тверь, Астрахань, Новомосковск, Пеномосковск, Ульяновск Первоуральск, Белгород, Курск, Таганрог, Владимир, Нефтегорск, Киров, Брянск, Смоленск, Саранск, Улан-Удэ, Владивосток, Воркута, Подольск, Красногорск, Новоуральск, Новороссийск, Хабаровск, Железногорск, Зеленогорск, Кострома, Кострома. ол, Светогорск, Жигулевск, Архангельск и другие города РФ.

Украина имеет налаженную систему доставки в городах: Киев, Харьков, Днепр (Днепропетровск), Одесса, Донецк, Львов, Киев, Николаев, Луганск, Винница, Симферополь, Херсон, Полтава, Чернигов, Черкассы, Сумы, Житомир, Кировоград, Хмельницкий, Ровно, Черновцы, Тернополь, Ивано-Франковск, Луцк, Ужгород и другие города Украины.

На территории Беларуси налажена система доставки в города: Минск, Витебск, Могилев, Гомель, Мозырь, Брест, Лида, Пинск, Орша, Полоцк, Гродно, Жодино Молодечно и другие города Беларуси.

В Казахстане налажена система доставки в города Астана, Алматы, Экибастуз, Павлодар, Актобе, Караганда, Уральск, Актау, Атырау, Аркалык, Балхаш, Жезказган, Кокшетау, Костанай, Тараз, Шымкент, Кызылорда, Петропавтовск, Лисаковск, Шахтинск. , ридер, Руда, Семьи, Талдыкорган, Темиртау, Усть-Каменогорск и другие города Казахстана. Продолжаются поставки устройств в такие страны: Азербайджан (Баку), Армения (Ереван), Кыргызстан (Бишкек), Молдова (Кишинев), Таджикистан ( Душанбе), Туркменистан (Ашхабад), Узбекистан (Ташкент), Литва (Вильнюс), Латвия (Рига), Эстония (Таллинн), Грузия (Тбилиси).

Иногда заказчики могут ввести название нашей компании неправильно – например, западприбор, западприлад, западприбор, западприлад, західприбор, західприбор, захидприбор, захидприлад, захидприбор, захидприбор, захидприлад. Правильно – Западприбор или західприлад.

Если на сайте нет нужной описательной информации по устройству, вы всегда можете обратиться к нам за помощью. Наши квалифицированные менеджеры обновят для вас технические характеристики устройства из его технической документации: руководство пользователя, сертификат, форма, инструкция по эксплуатации, схема.При необходимости мы сфотографируем ваше устройство или подставку под устройство. Вы можете оставить отзыв о приобретенном у нас устройстве, счетчике, приборе, индикаторе или продукте. Ваш отзыв для утверждения будет опубликован на сайте без контактной информации.

Описание приборов взято из технической документации или технической литературы. Большинство фотографий товаров делается непосредственно нашими специалистами перед отгрузкой товара. В описании прибора приведены основные технические характеристики прибора: номинальный диапазон измерения, класс точности, шкала, напряжение питания, габариты (габариты), вес.Если на сайте вы увидите несоответствие названия устройства (модели) техническим характеристикам, фото или приложенных документов – сообщите нам – вы получите полезный подарок вместе с проданным устройством.

При необходимости уточнить общий вес и размер или размер отдельного счетчика вы можете в нашем сервисном центре. При необходимости наши инженеры помогут подобрать наиболее полный аналог или подходящую замену интересующему вас устройству. Все аналоги и замены будут проверены в одной из наших лабораторий на полное соответствие вашим требованиям.

В технической документации на каждое устройство или изделие указывается перечень и количество содержания драгоценных металлов. В документации указан точный вес в граммах драгоценных металлов: золота Au, палладия Pd, платины Pt, серебра Ag, тантала Ta и других металлов платиновой группы (МПГ) на единицу единицы. Эти драгоценные металлы встречаются в природе в очень ограниченном количестве и поэтому имеют такую ​​высокую цену. На нашем сайте вы можете ознакомиться с техническими характеристиками устройств и получить информацию о содержании драгоценных металлов в устройствах и радиодетали, произведенных в СССР.Обращаем ваше внимание, что зачастую фактическое содержание драгоценных металлов на 10-25% отличается от эталонного в меньшую сторону! Цена на драгоценные металлы будет зависеть от их стоимости и массы в граммах.

Вся текстовая и графическая информация на сайте носит информативный характер. Цвет, оттенок, материал, геометрические размеры, вес, комплектация, комплект поставки и другие параметры товаров, представленных на сайте, могут различаться в зависимости от партии и года выпуска.За дополнительной информацией обращайтесь в отдел продаж.

ООО «Западприбор» – огромный выбор измерительного оборудования по оптимальной цене и качеству. Так что вы можете покупать недорогие устройства, мы следим за ценами конкурентов и всегда готовы предложить более низкую цену. Мы продаем только качественную продукцию по лучшим ценам. На нашем сайте вы можете недорого купить как последние новинки, так и проверенное оборудование от лучших производителей.

На сайте действует специальное предложение «купи по лучшей цене» – если на других интернет-ресурсах (доска объявлений, форум или анонс другого онлайн-сервиса) в товарах, представленных на нашем сайте, цена ниже, то мы продадим вам ее еще дешевле. ! Покупателям также предоставляется дополнительная скидка за оставление отзыва или фото использования нашей продукции.

В прайс-листе указан не весь ассортимент предлагаемой продукции. О ценах на товары, не включенные в прайс-лист, можете узнать у менеджера. Также у наших менеджеров Вы можете получить подробную информацию о том, насколько дешево и выгодно купить КИП оптом и в розницу. Телефон и электронная почта для консультации по поводу покупки, доставки или получения указаны в описании товара. У нас самый квалифицированный персонал, качественное оборудование и лучшая цена.

ООО «Западприбор» – официальный дилер-производитель испытательного оборудования.Наша цель – продавать нашим покупателям товары высокого качества по оптимальным ценам и сервису. Наша компания может не только продать вам необходимый прибор, но и предложить дополнительные услуги по его калибровке, ремонту и установке. Чтобы у вас были приятные впечатления от покупок на нашем сайте, мы предусмотрели специальные подарки, гарантированные для самых популярных товаров.

Завод «МЕТА» – самый надежный производитель оборудования для обследования. Тормозной стенд СТМ производится на этом заводе.

Производитель ТМ «Инфракар» – производитель многофункциональных приборов газоанализатора и дымомера.

Также мы обеспечиваем такие метрологические процедуры: калибровка, тарирование, градуировка, поверка средств измерений.

По запросу каждому измерительному устройству предоставляется метрологическая аттестация или поверка. Наши сотрудники могут представлять ваши интересы в таких организациях, как метрологический Ростест (Росстандарт), Госстандарт, Государственный стандарт (Госпоживстандарт), ЦЛИТ, ОГМетр.

Если вы можете произвести ремонт устройства самостоятельно, наши инженеры могут предоставить вам полный комплект необходимой технической документации: принципиальную схему ТО, ЭР, ФД, ПС.Также у нас есть обширная база технических и метрологических документов: технические условия (ТЗ), техническое задание (ТЗ), ГОСТ (ДСТУ), отраслевой стандарт (ОСТ) методика испытаний, метод сертификации, схема поверки на более 3500 наименований измерительной техники от производителя данного оборудования. С сайта вы можете скачать все необходимое программное обеспечение (драйверы программного обеспечения), необходимое для приобретенного продукта.

Наша компания выполняет ремонт и обслуживание измерительной техники на более чем 75 различных заводах бывшего Советского Союза и СНГ.

У нас также есть библиотека юридических документов, относящихся к нашей сфере деятельности: закон, кодекс, постановление, указ, временная должность.

ООО «Западприбор» является поставщиком амперметров, вольтметров, измерителей мощности, частотомеров, фазометров, шунтов и других устройств таких производителей измерительной техники, как: ПО «Электроточприбор» (М2044, М2051), г. Омск, ОАО «Прибор». -Завод «Вибратор» (М1611, Ц1611), г. Санкт-Петербург, ОАО «Краснодарский ЗИП» (Е365, Е377, Е378), ООО «ЗИП Партнер» (Ц301, Ц302, Ц300) и «ЗИП» Юримова »(М381, г. C33), г. Краснодар, ОАО «ВЗЭП» («Витебский завод электротоваров») (E8030, E8021), г. Витебск, ОАО «Электроприбор» (M42300, M42301, M42303, M42304, M42305, M42306), г. Чебоксары, ОАО «Электроизмеритель» (Ц4342, Ц4352, Ц4353) Житомир, ПАО «Уманский завод« Меггер »(F4102, F4103, F4104, M4100), г. Умань.

Горячих плазмид – март 2019 г.

Каждые несколько месяцев мы выделяем подмножество новых плазмид в репозитории в наших статьях о горячих плазмидах. Эти статьи содержат краткое изложение недавних отложений плазмид, и мы надеемся, что они упростят вам поиск и использование необходимых плазмид. Если вы когда-нибудь захотите написать о недавнем депонировании плазмид, зарегистрируйтесь здесь.

Послушайте этот выпуск Hot Plasmids!

Оптогенетический контроль CRISPR-Cas9 с помощью CASANOVA

Статья предоставлена ​​ Кэри Вэлли

Anti-CRISPR (Acr) эффективно ингибируют системы CRISPR типа II, включая популярный S.pyogenes Cas9 (Rauch et al., 2017, Hynes et al., 2017). Однако ингибирование Acr пространственно и временно повсеместно, что делает их довольно грубым инструментом для управления CRISPR. Чтобы усилить контроль над активностью Acr как биологического инструмента, Ниопек и его коллеги обратились к оптогенетике. Используя светочувствительные белковые домены, они разработали систему для контроля активности CRISPR-Cas9 с использованием синего света (Bubeck et al., 2018).

Они достигли этого, вставив фоточувствительный домен LOV2 из A.sativa в область петли белка Acr AcrIIA4. В темноте AcrIIA4 подавляет активность CRISPR. При добавлении синего света концевые спирали домена LOV2 разворачиваются, нарушая конформацию белка и, таким образом, ингибируя функцию Acr. Это позволяет CRISPR-Cas9 работать на своей цели. Они называют свой самый мощный ингибитор слитого белка Acr-LOV CASANOVA за «переключение активности CRISPR-Cas9 с помощью нового оптогенетического варианта AcrIIA4». CASANOVA быстро реагирует на синий свет.В течение нескольких минут после инактивации комплекса CASANOVA наблюдались флуоресцентные комплексы CRISPR, связывающие теломерную ДНК. Что хорошего в CASANOVA? Он работает с S. pyogenes Cas9, dCas9-эффекторными слияниями и xCas9 и не требует дополнительных химикатов или модификаций. Эта универсальность открывает возможности для пространственного и временного контроля во многих экспериментах по нацеливанию и редактированию генетических данных.

Найдите плазмиды CASANOVA здесь!

Бубек Ф. и др., Nature Methods 2018.PubMed PMID: 30377362.

Изучение активности нейронов с помощью флуоресцентного индикатора напряжения Archon

Статья предоставлена ​​ Шрейя Ведантам

Нейроны мозга используют электрические импульсы для координации эмоций, мыслей и поведения. Исторически сложилось так, что ученые изучают электрическую активность мозга, вставляя электроды в мозг. Но этот процесс трудоемкий и дорогостоящий.Таким образом, ученые обратились к генетически закодированным индикаторам напряжения.

Чтобы расширить набор инструментов индикатора напряжения, лаборатория Эда Бойдена разработала способ быстрого скрининга тысяч белков на предмет того, который может регистрировать электрическую активность с помощью изображений. Они взяли светочувствительный белок QuasAr2 и систематически мутировали его. Используя роботизированный подход для отбора клеток с различными характеристиками, которые они хотели, команда определила Archon1, новый флуоресцентный индикатор напряжения на основе опсина.Archon1 может встраиваться в клеточную мембрану, где затем можно измерить напряжение клетки. Archon1 яркий, демонстрирует хорошую локализацию, имеет высокое соотношение сигнал / шум, высокую чувствительность, быстро реагирует, фотостабилен и совместим с оптогенетическим контролем. Исследователи также показали, что Archon1 функционирует в широком диапазоне моделей животных, таких как мыши C . elegans, и данио.

Найдите плазмиды Archon1 в Addgene!

Пяткевич К.Д. и др., Nat Chem Biol 2018.PubMed PMID: 29483642.

Облегчение исследований белок-белкового взаимодействия с помощью системы клонирования вектора 2in1

Статья предоставлена ​​ Мишель Кронен

Недавно лаборатория Грефена представила систему клонирования вектора «2in1» – подход, совместимый со шлюзом, позволяющий одновременно клонировать два представляющих интерес гена (GOI) в две независимые кассеты экспрессии на одной плазмиде (Grefen and Blatt, 2012).Подобно традиционному клонированию Gateway ™, GOI сначала необходимо клонировать в вектор входа. Система клонирования 2in1 содержит два вектора входа (pUC57-L1L4 и pUC57-L3L2), которые предлагают преимущество использования рестрикционного клонирования для введения GOI в вектор 2in1 вместо реакции клонирования BP Gateway ^TM , где вставка GOI происходит путем рекомбинации.

Система клонирования 2in1 хорошо подходит для исследований межбелкового взаимодействия (PPI) на растениях, основанных на системах временной трансфекции с использованием Agrobacterium (таких как Nicotiana benthamiana или Arabidopsis thaliana ( Xing et al., 2016)). Во время опосредованного Agrobacterium переноса ДНК каждый GOI обычно экспрессируется из другой плазмиды, что может приводить к неодинаковой дозировке генов и высокой вариабельности коэкспрессии белков. Путем введения одной плазмиды, содержащей оба ГОИ, уровни экспрессии контролируются более равномерно. Лаборатория Грефена использовала систему клонирования 2in1 для создания серии плазмид для изучения PPI с использованием передачи энергии резонанса Ферстера (FRET, Heckler et al., 2015) или ратиометрической бимолекулярной флуоресцентной комплементации (rBiFC, Grefen and Blatt, 2012).Набор инструментов для плазмид 2in1 состоит из 4 наборов плазмид, созданных с помощью 4 различных бинарных векторов 2in1 со всеми возможными комбинациями ориентации тегов (NN, NC, CN и CC). 4 набора также содержат два вектора входа pUC-L1L4 и pUC-L3L2.

Найдите наборы плазмид 2in1 в Addgene!

Mehlhorn DG и др., Methods Mol Biol, 2018. PubMed PMID: 2

Открытие новых инструментов связывания белков для фотосопеременных белков cPYP и AsLOV2

Статья предоставлена ​​ Анжелой Абитуа

Обратимый контроль светопереключаемых белков, которые изменяют конформацию белков в ответ на свет, предлагает способ пространственного и временного контроля клеточных процессов in vivo . Многие фотоактивные белки существуют в природе, но превратить их в оптогенетические инструменты может быть сложно, потому что это требует подробных структурных знаний белков.Чтобы преодолеть эту проблему, лаборатория Уппалапати и Вулли разработала метод фагового дисплея с использованием небольших каркасных белков для идентификации новых связывающих белков, которые связываются либо со светлым, либо с темным состояниями фотопереключаемого cPYP, конформация которого изменяется в ответ на синий свет ( 445 нм). Открытие и применение белков-партнеров, которые связываются только с световым или темным состоянием светопереключаемых белков, предлагает мощный подход к контролю белок-белковых взаимодействий в клетках, поскольку связывающие белки можно настроить для визуализации, перемещения, деградации, модификации белков. , и строительные леса.

В своем исследовании лаборатория Вулли показала, что эти фотообратимые белок-белковые взаимодействия могут контролировать процессы субклеточной локализации in vivo . Они депонировали полученные оптогенетические плазмидные инструменты, которые включают плазмиды, кодирующие слияние cPYP и tgRFP (PLL7.0 tgRFP cPYP), и плазмиды, которые кодируют связывающие белки (которые связываются либо со светом, либо с темным состоянием фотопереключаемых белков), слитых к mVenus, связанной с митохондриальной последовательностью локализации TOM20 (pTriEX Tom20 mVenus BoPD).В адаптированных к темноте клетках, экспрессирующих эти плазмиды, флуоресценция tgRFP локализуется в митохондриях, поскольку cPYP связывается с BoPD. Аналогичный набор недавно идентифицированных свето- и темновых плазмидных инструментов был также депонирован для фотосопереключаемого AsLOV2.

Найдите здесь плазмиды связывания белков cPYP и AsLOV2!

Reis JM, et al. Синтетическая биология ACS. PMID в PubMed 2018: 30203962.

Цифровые индикаторы напряжения, считывающие до 500 кВ

«После отключения электричества, полностью остановившего нашу деятельность на несколько часов чуть более двух лет назад, G&W Electric осознала финансовые преимущества установки микросети для обеспечения бесперебойной подачи электроэнергии премиум-класса для поддержки. наши критически важные предприятия, а также наши клиенты », – сказал Джон Мюллер, председатель и владелец G&W Electric.«В конечном счете, это специально разработанное G&W Electric решение микросети под ключ станет примером того, как G&W Electric может оказывать поддержку другим предприятиям, сообществам и государственным учреждениям в создании собственного надежного источника энергии и предотвращении дорогостоящих последствий простоев во время катастрофических отключение. ”

Для выработки электроэнергии для микросети G&W Electric установит около 6000 солнечных панелей на крыше компании. Микросеть также будет содержать маховик мощностью 1,3 МВА для обеспечения сквозной мощности и проточную батарею мощностью 2 МВт, которая может работать при 150% своей номинальной нагрузки.Эта система обеспечит установку тремя МВт почти на два часа.

Эта микросеть будет использовать программное обеспечение для участия в регулировании частоты через соединение PJM. Региональная передающая организация, которая координирует движение оптовой электроэнергии, PJM Interconnection помогает поддерживать стабилизацию сети на частоте 60 Гц.

Эта микросеть может служить резервной копией в случае сбоя, но она также сокращает расходы, позволяя G&W Electric быть более энергонезависимой и экологически чистой.

«Во время пикового спроса на электроэнергию микросеть G&W Electric будет участвовать в Программе добровольного снижения нагрузки ComEd и изолируется от сети, чтобы помочь снизить пиковые нагрузки ComEd, устраняя ее зависимость от энергии в период роста цен», – сказал Пэт Эйвери. вице-президент по автоматизации электросетей компании G&W Electric. «Кроме того, это одна из крупнейших солнечных фотоэлектрических систем на крыше в Северной Америке, что также приведет к достижению компанией G&W Electric своих производственных целей с нулевым выбросом углерода.«

G&W Electric будет использовать передовые технологии с двухсторонними солнечными панелями, которые будут генерировать энергию с обеих сторон. Солнечные панели площадью более 370 000 кв. Футов оптимизируют использование прямого солнечного света и отражения от совершенно новых и хорошо отражающих белая кровельная мембрана, которая будет генерировать на 18-20% больше энергии, чем стандартная монолитная солнечная панель.

«Солнечная энергия стала высоконадежным и экономичным источником энергии будущего. Производство собственной энергии – лучший способ обеспечить первоклассное бесперебойное питание для наших критически важных операций, чтобы избежать ненужных простоев, переделок и брака, ведущих к недовольству клиентов », – добавил Эйвери.

Эта микросеть представляет собой еще один большой шаг к углеродной нейтральности для G&W Electric, организации, приверженной устойчивой деловой практике. Завод в Болингбруке также сертифицирован по стандарту ISO 14001 в области управления окружающей средой, имеет сертификат LEED Gold и не имеет свалок.

Ожидается, что строительство микросети будет завершено в начале 2022 года.

Для получения дополнительной информации об этом объявлении щелкните здесь.

ХИМИЧЕСКИЕ ИНДИКАТОРЫ НАПРЯЖЕНИЯ – МЕДИЦИНСКИЙ ИНСТИТУТ HOWARD HUGHES

Это приложение заявляет права на U.S. Предварительная заявка сер. № 62/428 066, поданной 30 ноября 2016 г., полное описание которой включено в настоящий документ посредством этой ссылки.

Это приложение содержит список последовательностей, который был представлен в формате ASCII через EFS-Web и полностью включен сюда посредством ссылки. Копия списка последовательностей в формате ASCII, созданная 30 ноября 2017 г., называется 18074N-16049.txt и имеет размер 112 килобайт.

Раскрытый в настоящее время предмет изобретения в целом относится к индикаторам напряжения и способам их использования.Более конкретно, раскрытый в настоящее время предмет изобретения относится к хемогенетическим индикаторам напряжения и способам измерения напряжения с использованием хемигенетических индикаторов напряжения.

Оптическое отображение мембранного потенциала позволяет непосредственно визуализировать быстрые электрические сигналы, которые нейроны используют для связи. Поскольку электрические сигналы в нейронах бывают быстрыми, современные оптические методы ограничены количеством фотонов, которые могут быть собраны камерой формирования изображений для каждого изображения фильма. ¹ Следовательно, индикаторы напряжения, которые излучают больше фотонов во время каждого изображения и которые делают это для большего количества изображений, прежде чем произойдет необратимое фотообесцвечивание, обеспечивают качественное улучшение точности и продолжительности измерений напряжения.

Современная коллекция низкомолекулярных красителей-индикаторов напряжения яркая и дает большие изменения флуоресценции с изменениями потенциала клеточной мембраны. Однако они не могут быть легко нацелены на конкретные нейроны, что ограничивает их полезность in vivo, потому что все клеточные мембраны окрашены красителем, и отдельные нейроны не могут быть четко видны. И наоборот, индикаторы на основе белков (генетически закодированные индикаторы напряжения, GEVI) могут быть нацелены на отдельные нейроны или определенные популяции нейронов, но имеют ограниченную яркость и фотостабильность.

Соответственно, остается потребность в целевых индикаторах напряжения, обеспечивающих повышенную яркость и фотостабильность.

Раскрытый в настоящее время предмет изобретения удовлетворяет некоторые или все указанные выше потребности, что станет очевидным для специалистов в данной области после изучения информации, представленной в этом документе.

Это краткое изложение описывает несколько вариантов осуществления раскрытого в настоящее время предмета изобретения и во многих случаях перечисляет варианты и перестановки этих вариантов осуществления.Это краткое изложение является просто примером многочисленных и разнообразных вариантов осуществления. Упоминание одной или нескольких характерных особенностей данного варианта осуществления также является примерным. Такой вариант осуществления обычно может существовать с указанными признаками или без них; Подобным образом, эти особенности могут быть применены к другим вариантам осуществления раскрытого в настоящее время предмета изобретения, независимо от того, перечислены они в этом Кратком описании или нет. Чтобы избежать излишнего повторения, в этом Резюме не перечислены и не предложены все возможные комбинации таких функций.

В некоторых вариантах осуществления раскрытый в настоящее время предмет направлен на индикатор напряжения. В некоторых вариантах реализации индикатор напряжения включает локализованный на мембране чувствительный к напряжению белок, связанный с захватывающим белком. В некоторых вариантах реализации белок захвата устроен и расположен для захвата низкомолекулярных флуоресцентных красителей. В одном варианте флуоресцентные красители включают азетидинсодержащие красители Janelia Fluor ™. В другом варианте красители Janelia Fluor ™ выбраны из группы, состоящей из Janelia Fluor ™ ₅₀₅ , Janelia Fluor ™ ₅₂₅ , Janelia Fluor ™ ₅₄₉ , Janelia Fluor ™ ₅₈₅ , Janelia Fluor ™ ₆₄₆ и их комбинации.

В некоторых вариантах реализации потенциал-чувствительный белок представляет собой опсин, такой как, без ограничения, микробный опсин. Подходящие микробные опсины включают, но не ограничиваются ими, QuasAr2, Ace2N или их комбинацию. В некоторых вариантах реализации, белок, чувствительный к напряжению, включает в себя по меньшей мере один чувствительный к напряжению домен, выбранный из группы, состоящей из чувствительного к напряжению домена Ciona Кишечника (CiVSD), Danio rerio потенциал-чувствительного домена (DrVSD), Gallus gallus Voltage-Sensing. -чувствительный домен (GgVSD) и их комбинация.

В некоторых вариантах реализации белок захвата представляет собой белок ковалентного захвата. В одном варианте осуществления белок ковалентного захвата выбран из группы, состоящей из HaloTag, SNAP-tag, TMP-tag, Kac-tag, CLIP-tag или их комбинации. В некоторых вариантах реализации белок захвата представляет собой нековалентный белок захвата. В одном варианте осуществления белок нековалентного захвата выбран из группы, состоящей из ТМР-метки, биотин-авидина и их комбинации.

В некоторых вариантах реализации раскрытый в настоящее время предмет относится к способу измерения напряжения, причем способ включает введение индикатора напряжения, включающего локализованный на мембране белок, чувствительный к напряжению, связанный с белком захвата, и определение изменений флуоресценции низкомолекулярный флуоресцентный краситель, захваченный захватывающим белком.В некоторых вариантах реализации изменения флуоресценции наблюдают с помощью микроскопа. В некоторых вариантах реализации способ дополнительно включает определение изменений напряжения на основе изменений флуоресценции.

В некоторых вариантах реализации индикатор напряжения дополнительно содержит линкер между чувствительным к напряжению белком и захватывающим белком. В некоторых вариантах реализации способ дополнительно включает изменение длины линкера. В одном варианте изменение длины линкера включает удаление по меньшей мере одного аминокислотного остатка.В другом варианте осуществления удаление по меньшей мере одного аминокислотного остатка включает удаление от 1 до 22 аминокислотных остатков. В другом варианте осуществления изменение длины линкера изменяет размер флуоресцентного ответа.

Новые признаки изобретения подробно изложены в прилагаемой формуле изобретения. Лучшее понимание особенностей и преимуществ настоящего изобретения будет получено при обращении к нижеследующему подробному описанию, в котором излагаются иллюстративные варианты осуществления, в которых используются принципы изобретения, и прилагаемые чертежи, на которых:

Фиг.1 представляет собой схематическое изображение индикаторов химиогенетического напряжения согласно варианту осуществления изобретения.

РИС. 2A-F показаны химические структуры различных флуоресцентных красителей-лигандов согласно варианту осуществления настоящего описания. Эти структуры включают лиганд JF ₅₀₅ -HaloTag (фиг. 2A), лиганд JF ₅₂₅ -HaloTag (фиг. 2B), лиганд JF ₅₄₉ -HaloTag (фиг. 2C), лиганд JF ₅₈₅ -HaloTag ( Фиг.2D), лиганд JF ₆₃₅ -HaloTag (фиг. 2E) и лиганд JF ₅₄₉ -SNAP-Tag (фиг.2F).

РИС. 3A-B показаны графики, сравнивающие яркость флуоресценции (A) и скорость фотообесцвечивания флуоресценции (B) ASAP1, Ace2N-mNeonGreen и Ace2N-HaloTag-JF ₅₄₉ в нейронах гиппокампа крысы в ​​культуре.

РИС. 4 показан график, иллюстрирующий размер флуоресцентного отклика индикаторов напряжения QuasAr2-HaloTag с линкерами разного размера, соединяющими QuasAr2 и HaloTag. Отклик флуоресценции измерен относительно ASAP1.

РИС. 5A-B показаны графики и изображения, иллюстрирующие флуоресценцию нейронов гиппокампа крысы, экспрессирующих QuasAr-HaloTag, меченных JF ₅₄₉ .(A) Флуоресцентная микрофотография нейронов гиппокампа крысы в ​​культуре, экспрессирующей QuasAr-HaloTag, меченный JF ₅₄₉ . (B) Трассы флуоресценции из трех областей на изображении из (A), показывающие зависимые от напряжения изменения флуоресценции в результате деполяризации нейронов, вызванной полевым электродом.

РИС. 6A-B показаны графики и изображения, иллюстрирующие флуоресценцию нейронов гиппокампа крысы, экспрессирующих QuasAr2-HaloTag-16, меченных JF ₅₄₉ . (A) Флуоресцентная микрофотография нейронов гиппокампа крысы в ​​культуре, экспрессирующей QuasAr2-HaloTag-16, меченный JF ₅₄₉ .(B) Трассы флуоресценции из четырех областей на изображении из (A), показывающие зависимые от напряжения изменения флуоресценции в результате спонтанных потенциалов действия нейронов.

РИС. 7A-B показаны графики и изображения, иллюстрирующие флуоресценцию нейронов гиппокампа крысы, экспрессирующих QuasAr-cpHaloTag, меченных JF ₅₄₉ . (A) Флуоресцентная микрофотография нейронов гиппокампа крысы в ​​культуре, экспрессирующей QuasAr-cpHaloTag, меченный JF ₅₄₉ . (B) Трассы флуоресценции из трех областей на изображении из (A), показывающие зависимые от напряжения изменения флуоресценции в результате деполяризации нейронов, вызванной полевым электродом.

РИС. 8A-B показаны графики и изображения, иллюстрирующие флуоресценцию нейронов гиппокампа крысы, экспрессирующих QuasAr2-SNAP-Tag, меченных JF ₅₄₉ . (A) Флуоресцентная микрофотография нейронов гиппокампа крысы в ​​культуре, экспрессирующей QuasAr2-SNAP-Tag, меченную JF ₅₄₉ . (B) Трассы флуоресценции из трех областей на изображении из (A), показывающие зависимые от напряжения изменения флуоресценции в результате индуцированных полевым электродом потенциалов действия нейронов.

РИС. 9A-B показаны графики и изображения, иллюстрирующие флуоресценцию нейронов гиппокампа крысы, экспрессирующих HaloTag-QuasAr2, меченных JF ₅₄₉ .(A) Флуоресцентная микрофотография нейронов гиппокампа крысы в ​​культуре, экспрессирующей HaloTag-QuasAr2, меченный JF ₅₄₉ . (B) Трассы флуоресценции из одной области на изображении из (A), показывающие зависимые от напряжения изменения флуоресценции в результате деполяризации нейронов, вызванной полевым электродом.

РИС. 10A-D показаны графики и изображения, иллюстрирующие визуализацию напряжения in vivo у личинок рыбок данио (6 дней после оплодотворения). (A) Флуоресцентная микрофотография флуоресценции нейронов вентрального среднего мозга личинок рыбок данио, экспрессирующих Ace2N-HaloTag и маркированных JF ₅₂₅ .Использовали световой микроскоп с возбуждением 488 нм. (B) То же, что (A), но с наложенными интересующими областями, которые соответствуют следам флуоресценции на (C) и (D). (C) Состояние визуального стимула, отображаемого для рыбы, и электрофизиологическая запись, показывающая предполагаемое плавание рыбы (вверху), со следами флуоресценции от 12 отдельных нейронов, показанными на (B). (D) Увеличение (C) указанной области.

РИС. 11 показан график, иллюстрирующий реакцию флуоресценции на скачки напряжения (вставка) Ace2N-HaloTag, меченного JF ₅₂₅ , в нейронах гиппокампа крысы в ​​культуре.

РИС. 12A-C показаны графики и изображения, иллюстрирующие флуоресценцию нейрона гиппокампа крысы, экспрессирующего Ace2N-HaloTag, меченного JF ₅₀₅ . (A) Флуоресцентная микрофотография нейрона гиппокампа крысы в ​​культуре, экспрессирующей Ace2N-HaloTag, меченный JF ₅₀₅ . (B) Зависимость флуоресценции от напряжения для клеток, как в (A). (C) Флуоресценция (вверху) по сравнению с напряжением (внизу, при измерении с помощью пипетки с зажимом для цельной клетки) от нейронов, как на (A), демонстрируя всплески потенциала действия и подпороговую деполяризацию.

РИС. 13A-C показаны графики и изображения, иллюстрирующие флуоресценцию нейрона гиппокампа крысы, экспрессирующего Ace2N-HaloTag, меченного JF ₅₂₅ . (A) Флуоресцентная микрофотография нейрона гиппокампа крысы в ​​культуре, экспрессирующей Ace2N-HaloTag, меченный JF ₅₂₅ . (B) Зависимость флуоресценции от напряжения для клеток, как в (A). (C) Флуоресценция (вверху) по сравнению с напряжением (внизу, при измерении с помощью пипетки с зажимом для цельной клетки) от нейронов, как на (A), демонстрируя всплески потенциала действия и подпороговую деполяризацию.

РИС. 14A-C показаны графики и изображения, иллюстрирующие флуоресценцию нейрона гиппокампа крысы, экспрессирующего Ace2N-HaloTag, меченного JF ₅₄₉ . (A) Флуоресцентная микрофотография нейрона гиппокампа крысы в ​​культуре, экспрессирующей Ace2N-HaloTag, меченный JF ₅₄₉ . (B) Зависимость флуоресценции от напряжения для клеток, как в (A). (C) Флуоресценция (вверху) по сравнению с напряжением (внизу, при измерении с помощью пипетки с зажимом для цельной клетки) от нейронов, как на (A), демонстрируя всплески потенциала действия и подпороговую деполяризацию.

РИС. 15A-C показаны графики и изображения, иллюстрирующие флуоресценцию нейрона гиппокампа крысы, экспрессирующего Ace2N-HaloTag, меченного JF ₅₈₅ . (A) Флуоресцентная микрофотография нейрона гиппокампа крысы в ​​культуре, экспрессирующей Ace2N-HaloTag, меченный JF ₅₈₅ . (B) Зависимость флуоресценции от напряжения для клеток, как в (A). (C) Флуоресценция (вверху) по сравнению с напряжением (внизу, при измерении с помощью пипетки с зажимом для цельной клетки) от нейронов, как на (A), демонстрируя всплески потенциала действия и подпороговую деполяризацию.

РИС. 16A-C показаны графики и изображения, иллюстрирующие флуоресценцию нейрона гиппокампа крысы, экспрессирующего Ace2N-HaloTag, меченного JF ₆₃₅ . (A) Флуоресцентная микрофотография нейрона гиппокампа крысы в ​​культуре, экспрессирующей Ace2N-HaloTag, меченный JF ₆₃₅ . (B) Зависимость флуоресценции от напряжения для клеток, как в (A). (C) Флуоресценция (вверху) по сравнению с напряжением (внизу, при измерении с помощью пипетки с зажимом для цельной клетки) от нейронов, как на (A), демонстрируя всплески потенциала действия и подпороговую деполяризацию.

РИС. 17A-B показаны графики и изображения, иллюстрирующие флуоресценцию нейрона гиппокампа крысы, экспрессирующего CiVSD-HaloTag, меченного JF ₆₃₅ . (A) Флуоресцентная микрофотография нейронов гиппокампа крысы в ​​культуре, экспрессирующей CiVSD-HaloTag, меченный JF ₆₃₅ . (B) Трассы флуоресценции из шести областей на изображении из (A), показывающие зависимые от напряжения изменения флуоресценции в результате спонтанных потенциалов действия нейронов.

РИС. 18A-B показаны графики и изображения, иллюстрирующие флуоресценцию нейрона гиппокампа крысы, экспрессирующего CiVSD-cpHaloTag, меченного JF ₆₃₅ .(A) Флуоресцентная микрофотография нейронов гиппокампа крысы в ​​культуре, экспрессирующей CiVSD-cpHaloTag, меченный JF ₆₃₅ . (B) Трассы флуоресценции из трех областей на изображении из (A), показывающие зависимые от напряжения изменения флуоресценции в результате спонтанных потенциалов действия нейронов.

РИС. 19A-B показаны графики и изображения, иллюстрирующие флуоресценцию нейрона гиппокампа крысы, экспрессирующего DrVSD-HaloTag, меченного JF ₆₃₅ . (A) Флуоресцентная микрофотография нейронов гиппокампа крысы в ​​культуре, экспрессирующей DrVSD-HaloTag, меченный JF ₆₃₅ .(B) Трассы флуоресценции из четырех областей на изображении из (A), показывающие зависимые от напряжения изменения флуоресценции в результате спонтанных потенциалов действия нейронов.

РИС. 20A-B показаны графики и изображения, иллюстрирующие флуоресценцию нейрона гиппокампа крысы, экспрессирующего GgVSD-HaloTag, меченного JF ₆₃₅ . (A) Флуоресцентная микрофотография нейронов гиппокампа крысы в ​​культуре, экспрессирующей GgVSD-HaloTag, меченный JF ₆₃₅ . (B) Трассы флуоресценции из пяти областей на изображении из (A), показывающие зависимые от напряжения изменения флуоресценции в результате спонтанных потенциалов действия нейронов.

Подробности одного или нескольких вариантов осуществления раскрытого в настоящее время предмета изобретения изложены в этом документе. Модификации вариантов осуществления, описанных в этом документе, и других вариантов осуществления будут очевидны для специалистов в данной области техники после изучения информации, представленной в этом документе. Информация, представленная в этом документе, и, в частности, конкретные детали описанных примерных вариантов осуществления, предоставлены в первую очередь для ясности понимания, и из этого не следует понимать никаких ненужных ограничений.В случае конфликта спецификация этого документа, включая определения, будет иметь преимущественную силу.

Хотя предполагается, что используемые здесь термины хорошо понятны специалистам в данной области техники, некоторые определения даны для облегчения объяснения раскрытого в настоящее время предмета изобретения.

Если не указано иное, все технические и научные термины, используемые в данном документе, имеют то же значение, которое обычно понимается специалистом в данной области техники, к которой принадлежит изобретение (я).

Все патенты, заявки на патенты, опубликованные заявки и публикации, последовательности GenBank, базы данных, веб-сайты и другие опубликованные материалы, упоминаемые во всем раскрытии здесь, если не указано иное, полностью включены посредством ссылки.

Если делается ссылка на URL-адрес или другой такой идентификатор или адрес, она понимает, что такие идентификаторы могут изменяться, и конкретная информация в Интернете может приходить и уходить, но эквивалентную информацию можно найти, выполнив поиск в Интернете.Ссылка на нее свидетельствует о доступности и публичном распространении такой информации.

Используемые здесь сокращения для любых защитных групп, аминокислот и других соединений, если не указано иное, в соответствии с их обычным использованием, являются признанными сокращениями или Комиссией IUPAC-IUB по биохимической номенклатуре (см. Biochem. ( 1972) 11 (9): 1726-1732).

Хотя любые методы, устройства и материалы, подобные или эквивалентные тем, которые описаны в данном документе, могут быть использованы на практике или при тестировании раскрытого в настоящее время предмета, в нем описаны типичные методы, устройства и материалы.

Настоящая заявка может «содержать» (открытая) или «состоять по существу из» компонентов настоящего изобретения, а также других ингредиентов или элементов, описанных в данном документе. Используемый здесь термин «содержащий» является открытым и означает перечисленные элементы или их эквивалент по структуре или функции, а также любой другой элемент или элементы, которые не перечислены. Термины «имеющий» и «включающий» также следует толковать как неограниченные, если контекст не предполагает иное.

В соответствии с давней конвенцией о патентном праве, термины «a», «an» и «the» относятся к «одному или нескольким» при использовании в этой заявке, включая формулу изобретения.Таким образом, например, ссылка на «ячейку» включает в себя множество таких ячеек и так далее.

Если не указано иное, все числа, выражающие количества ингредиентов, свойства, такие как условия реакции и т.д., используемые в описании и формуле изобретения, следует понимать как измененные во всех случаях термином «примерно». Соответственно, если не указано иное, числовые параметры, изложенные в этом описании и формуле изобретения, являются приближениями, которые могут варьироваться в зависимости от желаемых свойств, которые стремятся получить с помощью раскрытого в настоящее время предмета изобретения.

Используемый здесь термин «примерно», когда он относится к значению или количеству массы, веса, времени, объема, концентрации или процента, означает, что в некоторых вариантах реализации изобретения ± 20%, в некоторых вариантах реализации ± 10%, в некоторых вариантах реализации ± 5%, в некоторых вариантах реализации ± 1%, в некоторых вариантах реализации ± 0,5% и в некоторых вариантах реализации ± 0,1% от указанного количества, поскольку такие варианты подходят для реализации раскрытого способа.

В данном контексте диапазоны могут быть выражены как от «примерно» одного конкретного значения и / или до «примерно» другого конкретного значения.Также понятно, что существует ряд значений, раскрытых в данном документе, и что каждое значение также раскрывается здесь как «около» этого конкретного значения в дополнение к самому значению. Например, если раскрывается значение «10», то также раскрывается «около 10». Также понятно, что также раскрывается каждый блок между двумя конкретными блоками. Например, если раскрыты 10 и 15, то также раскрываются 11, 12, 13 и 14.

При использовании в данном документе «необязательный» или «необязательно» означает, что описываемое далее событие или обстоятельство происходит или не происходит, и что описание включает случаи, когда указанное событие или обстоятельство происходит, и случаи, когда это не происходит.Например, необязательно вариантная часть означает, что часть является вариантной или невариантной.

Раскрытый в настоящее время предмет изобретения включает в себя индикаторы напряжения и способы измерения напряжения с помощью индикаторов напряжения. В некоторых вариантах реализации индикаторы напряжения включают локализованные на мембране чувствительные к напряжению белки, связанные с ферментами, сконструированными для захвата низкомолекулярных флуоресцентных красителей (фиг. 1). В одном варианте осуществления эти индикаторы напряжения сочетают яркость и фотостабильность низкомолекулярных красителей с генетической целевой способностью белков.В другом варианте осуществления эти индикаторы напряжения сформированы из любой подходящей комбинации красителей, белков, чувствительных к напряжению, и белков захвата. В дополнительном варианте осуществления индикаторы напряжения включают в себя различные длины междоменных линкеров, топологические вариации или их комбинации. Различные комбинации позволяют модулировать длины волн возбуждения и испускания флуоресценции красителя, кинетику белка ковалентного захвата и кинетику белка, чувствительного к напряжению.

Подходящие низкомолекулярные флуоресцентные красители включают, помимо прочего, один или несколько флуорофорных красителей.В одном варианте осуществления флуорофорный краситель включает флуорофор, содержащий один или несколько заместителей циклического амина. В другом варианте осуществления флуорофорный краситель включает азетидинсодержащий краситель Janelia Fluor ™. В другом варианте осуществления краситель Janelia Fluor ™ включает одно или несколько четырехчленных азетидиновых колец вместо повсеместных диметиламиногрупп существующих флуорофоров, образуя небольшие проницаемые для клеток флуорофоры, имеющие повышенную яркость и фотостабильность. Такие красители Janelia Fluor ™ включают, помимо прочего, Janelia Fluor ™ ₅₀₅ , Janelia Fluor ™ ₅₂₅ , Janelia Fluor ™ ₅₄₉ , Janelia Fluor ™ ₅₈₅ , Janelia Fluor ™ ₆₃₅ и их комбинации. из них (ФИГ.2A-F).

Подходящие чувствительные к напряжению белки включают, но не ограничиваются ими, один или несколько опсинов, одну или несколько других молекул, включая домен, чувствительный к напряжению, или их комбинацию. Например, в одном варианте осуществления потенциал-чувствительный белок включает микробный опсин, такой как, но не ограничиваясь ими, QuasAr2, Ace2N. В другом варианте осуществления белок, чувствительный к напряжению, включает в себя чувствительный к напряжению домен Ciona Кишечника (CiVSD), чувствительный к напряжению домен Danio rerio (DrVSD), Gallus gallus чувствительный к напряжению домен (GgVSD) или их комбинацию.

Подходящие белки захвата включают любой белок, сконфигурированный для связывания желаемого лиганда. Например, в одном варианте осуществления белок захвата включает белок ковалентного захвата. В другом варианте осуществления белок ковалентного захвата включает, но не ограничивается, HaloTag (фиг. 2A-E), SNAP-tag (фиг. 2F) или их комбинацию. Другие подходящие белки ковалентного захвата включают, но не ограничиваются ими, TMP-tag, βLac-tag, CLIP-tag или их комбинацию. Дополнительно или альтернативно, белок захвата может включать нековалентные белки захвата, которые захватывают или связывают желаемый лиганд с нековалентными взаимодействиями.Подходящие белки нековалентного захвата включают, но не ограничиваются ими, определенную ТМР-метку, биотин-авидин или их комбинацию.

Красители, протеины, чувствительные к напряжению, и протеины захвата, описанные выше, демонстрируют модульность и универсальность конструкции индикатора мгновенного напряжения. В некоторых вариантах реализации это позволяет модулировать длины волн возбуждения и испускания флуоресценции красителя, химическую природу линкера, соединяющего краситель с белком захвата, кинетику белка захвата и / или кинетику белка, чувствительного к напряжению. .Например, в одном варианте осуществления потенциал-чувствительный белок QuasAr2 может быть объединен с белком захвата HaloTag или SNAP-tag вместе с любым подходящим красителем. В другом варианте реализации потенциал-чувствительный белок Ace2N может быть объединен с белком захвата HaloTag или SNAP-tag вместе с любым подходящим красителем. Как будет понятно специалистам в данной области, красители, протеины, чувствительные к напряжению, и протеины захвата, обсужденные выше, предназначены только для иллюстрации и не предназначены для ограничения объема настоящего раскрытия.Соответственно, индикаторы напряжения, включая любой подходящий краситель, белок, чувствительный к напряжению, и / или заменитель белка захвата явно предусмотрены здесь.

Раскрытый в настоящее время предмет изобретения также включает в себя способы измерения напряжения с использованием индикаторов напряжения. В некоторых вариантах реализации способы включают введение индикаторов напряжения и измерение изменений флуоресценции красителя любым подходящим способом. Изменения флуоресценции можно измерить с помощью любого подходящего метода, такого как, помимо прочего, наблюдение с помощью микроскопа, захват изображения, видеозапись или их комбинация.В одном варианте осуществления описанные здесь индикаторы напряжения существенно ярче и более фотостабильны, чем существующие GEVI (фиг. 3A-B). В другом варианте осуществления амплитуда индикаторного ответа может быть увеличена за счет укорочения или удаления линкерного пептида между потенциалочувствительным белком и белком ковалентного захвата. В дополнительном варианте укорачивание линкерного пептида включает удаление из него по меньшей мере одного аминокислотного остатка. Как будет понятно специалистам в данной области, количество удаленных аминокислотных остатков может быть определено желаемой амплитудой и / или конкретным линкерным пептидом.В некоторых вариантах реализации количество удаленных аминокислотных остатков составляет от по меньшей мере 1 до всех, кроме 1, от 1 до 22, от 2 до 22, 4, 8, 12, 16, 18, 20, 22 или любой подходящей комбинации. , их подкомбинация, диапазон или поддиапазон.

Раскрытый в настоящее время предмет изобретения дополнительно проиллюстрирован следующими конкретными, но не ограничивающими примерами. Следующие ниже примеры могут включать в себя компиляции данных, которые представляют данные, собранные в разное время в ходе разработки и экспериментов, относящихся к раскрытому в настоящее время предмету.

Следующие ниже примеры описывают свойства различных химиогенетических индикаторов напряжения согласно настоящему раскрытию.

В этом примере сравнивается реакция флуоресценции различных индикаторов напряжения QuasAr2-HaloTag, имеющих линкеры разной длины, соединяющие QuasAr2 и HaloTag. Для образования разной длины аминокислотные остатки были удалены из линкера. Всего было сформировано 8 индикаторов напряжения с разной длиной линкера, включая QuasAr2-HaloTag (SEQ ID NO: 1 и SEQ ID NO: 2), QuasAr2-HaloTag-4 (SEQ ID NO: 3 и SEQ ID NO: 4), QuasAr2-HaloTag-8 (SEQ ID NO: 5 и SEQ ID NO: 6), QuasAr2-HaloTag-12 (SEQ ID NO: 7 и SEQ ID NO: 8), QuasAr2-HaloTag-16 (SEQ ID NO: 9 и SEQ ID NO: 10), QuasAr2-HaloTag-18 (SEQ ID NO: 11 и SEQ ID NO: 12), QuasAr2-HaloTag-20 (SEQ ID NO: 13 и SEQ ID NO: 14) и QuasAr2-HaloTag- 22 (SEQ ID NO: 15 и SEQ ID NO: 16).Число в конце каждого индикатора напряжения отражает количество аминокислотных остатков, которые были удалены из линкера. Например, QuasAr2-HaloTag-4 представляет собой индикатор напряжения, в котором из линкера были удалены 4 аминокислотных остатка, а QuasAr2-HaloTag-12 представляет собой индикатор напряжения, в котором из линкера удалены 12 аминокислотных остатков.

Флуоресценция этих индикаторов напряжения измерялась относительно ASAP1. Как показано на фиг. 4, каждая разная длина линкера обеспечивала флуоресцентный ответ разного размера.

В этом примере флуоресценцию различных JF ₅₄₉ , меченных QuasAr2, содержащих индикаторы напряжения, измеряли в нейронах гиппокампа крысы в ​​культуре. В частности, фиг. 5A-B показана флуоресценция нейронов гиппокампа крысы, экспрессирующих QuasAr-HaloTag (SEQ ID NO: 1 и SEQ ID NO: 2), меченных JF ₅₄₉ (фиг. 5A), и изменения флуоресценции, зависящие от напряжения, в результате индуцированной полевым электродом. деполяризация нейронов (фиг. 5B). Фиг. 6A-B показана флуоресценция нейронов гиппокампа крысы, экспрессирующих QuasAr2-HaloTag-16 (SEQ ID NO: 9 и SEQ ID NO: 10), меченных JF ₅₄₉ (фиг.6A) и зависимые от напряжения изменения флуоресценции в результате спонтанных потенциалов действия нейронов (фиг. 6B). Фиг. 7A-B показана флуоресценция нейронов гиппокампа крысы, экспрессирующих QuasAr-cpHaloTag (SEQ ID NO: 17 и SEQ ID NO: 18), меченных JF ₅₄₉ (фиг. 7A), и изменения флуоресценции, зависящие от напряжения, в результате индуцированной полевым электродом. деполяризация нейронов (фиг. 7B). Фиг. 8A-B показана флуоресценция нейронов гиппокампа крысы, экспрессирующих QuasAr2-SNAP-Tag (SEQ ID NO: 19 и SEQ ID NO: 20), меченных JF ₅₄₉ (фиг.8A) и зависимые от напряжения изменения флуоресценции в результате деполяризации нейронов, вызванной полевым электродом (фиг. 8B). Фиг. 9A-B показана флуоресценция нейронов гиппокампа крысы, экспрессирующих HaloTag-QuasAr2 (SEQ ID NO: 21 и SEQ ID NO: 22), меченных JF ₅₄₉ (фиг. 9A), и изменения флуоресценции, зависящие от напряжения, в результате индуцированного полевым электродом. деполяризация нейронов (фиг. 9B).

В этом примере измеряли флуоресценцию индикаторов напряжения Ace2N-HaloTag (SEQ ID NO: 23 и SEQ ID NO: 24), помеченных различными флуоресцентными красителями.Как обсуждается ниже, изменения потенциала клеточной мембраны вызывали изменения флуоресценции красителя, когда индикаторы тестировали на культивируемых нейронах гиппокампа крысы и живых личинках рыбок данио.

В одном исследовании описанные здесь датчики использовались для отображения сигналов напряжения флуоресценции от 12 нейронов одновременно в бодрствующих личиночных рыбках данио в течение нескольких минут непрерывно. Более конкретно, фиг. 10A-D показана флуоресценция нейронов личинок рыбок данио, экспрессирующих Ace2N-HaloTag, меченных JF ₅₂₅ .ИНЖИР. На фиг.11 показан флуоресцентный ответ на скачки напряжения Ace2N-HaloTag, меченного JF ₅₂₅ , в нейронах гиппокампа крысы в ​​культуре. Фиг. 12A-C показывают флуоресценцию нейрона гиппокампа крысы в ​​культуре, экспрессирующей Ace2N-HaloTag, меченный JF ₅₀₅ (фиг. 12A), флуоресценцию в зависимости от напряжения (фиг. 12B) и флуоресценцию в сравнении с напряжением, показывающим пики потенциала действия и подпороговую деполяризацию (фиг. . 12C). Фиг. 13A-C показана флуоресценция нейрона гиппокампа крысы в ​​культуре, экспрессирующей Ace2N-HaloTag, меченный JF ₅₂₅ (фиг.13A), флуоресценция в зависимости от напряжения (фиг. 13B) и флуоресценция в сравнении с напряжением, показывающая всплески потенциала действия и подпороговую деполяризацию (фиг. 13C). Фиг. 14A-C показана флуоресценция нейрона гиппокампа крысы в ​​культуре, экспрессирующей Ace2N-HaloTag, меченный JF ₅₄₉ (фиг. 14A), флуоресценция в зависимости от напряжения (фиг. 14B) и флуоресценция в сравнении с напряжением, показывающим пики потенциала действия и подпороговую деполяризацию (фиг. 14C). Фиг. 15A-C показана флуоресценция нейрона гиппокампа крысы в ​​культуре, экспрессирующей Ace2N-HaloTag, меченный JF ₅₈₅ (фиг.15A), флуоресценция в зависимости от напряжения (фиг. 15B) и флуоресценция в сравнении с напряжением, показывающая всплески потенциала действия и подпороговую деполяризацию (фиг. 15C). Фиг. 16A-C показывают флуоресценцию нейрона гиппокампа крысы в ​​культуре, экспрессирующей Ace2N-HaloTag, меченный JF ₆₃₅ (фиг. 16A), флуоресценцию в зависимости от напряжения (фиг. 16B) и флуоресценцию в сравнении с напряжением, показывающим пики потенциала действия и подпороговую деполяризацию (фиг. . 16C).

В этом примере флуоресценция индикаторов напряжения HaloTag, меченных JF ₆₃₅ , была измерена с различными различными чувствительными к напряжению белками.Более конкретно, фиг. 17A-B показана флуоресценция нейронов гиппокампа крысы, экспрессирующих CiVSD-HaloTag (SEQ ID NO: 25 и SEQ ID NO: 26), меченных JF ₆₃₅ (фиг. 17A), и изменения флуоресценции, зависящие от напряжения, в результате потенциалов спонтанного действия нейроны (фиг. 17B). Фиг. 18A-B демонстрируют флуоресценцию нейронов гиппокампа крысы, экспрессирующих CiVSD-cpHaloTag (SEQ ID NO: 27 и SEQ ID NO: 28), меченных JF ₆₃₅ (фиг. 18A), и зависимые от напряжения изменения флуоресценции, возникающие в результате потенциалов спонтанного действия нейроны (фиг.18Б). Фиг. 19A-B показана флуоресценция нейронов гиппокампа крысы, экспрессирующих DrVSD-HaloTag (SEQ ID NO: 29 и SEQ ID NO: 30), меченных JF ₆₃₅ (фиг. 19A), и изменения флуоресценции, зависящие от напряжения, в результате потенциалов спонтанного действия нейроны (фиг. 19B). Фиг. 20A-B показана флуоресценция нейронов гиппокампа крысы, экспрессирующих GgVSD-HaloTag (SEQ ID NO: 31 и SEQ ID NO: 32), меченных JF ₆₃₅ (фиг. 20A), и изменения флуоресценции, зависящие от напряжения, в результате потенциалов спонтанного действия нейроны (фиг.20Б).

Все публикации, патенты и заявки на патенты, упомянутые в данном описании, включены в настоящий документ посредством ссылки в той же степени, как если бы каждая отдельная публикация, патент или заявка на патент были специально и индивидуально указаны для включения посредством ссылки, включая приведенные ссылки. в следующем списке:

• 1. Grimm, JB et al. Общий метод точной настройки флуорофоров для визуализации живых клеток и in vivo. Nat. Методы 14, 987 (2017).
• 2. Платиса, Дж., Васан, Г., Янг, А. и Пиерибон, В. А. Направленная эволюция ключевых остатков флуоресцентного белка меняет полярность чувствительности к напряжению в генетически закодированном индикаторе ArcLight. ACS Chem. Neurosci. 8, 513-523 (2017).
• 3. Chamberland, S. et al. Быстрая двухфотонная визуализация динамики внутриклеточного напряжения в нейрональной ткани с генетически закодированными индикаторами. Элиф 6, e25690 (2017).
• 4. Abdelfattah, A. S. et al.Яркий и быстрый красный флуоресцентный индикатор напряжения белка, который сообщает об активности нейронов в органотипических срезах мозга. J. Neurosci. 36, 2458-2472 (2016).
• 5. Абдельфаттах, А.С., Ранчич, В., Равал, Б., Баллани, К., Кэмпбелл, Р. Е. Ратиометрические и фотопреобразовательные прототипы индикаторов напряжения на основе флуоресцентных белков. Chem. Commun. 104, 40-50 (2016).
• 6. Gong, Y. et al. Высокоскоростная регистрация нервных импульсов у бодрствующих мышей и мух с помощью флуоресцентного датчика напряжения. Наука (80-.). 350, 1361-1366 (2015).
• 7. Grimm, J. B. et al. Общий метод улучшения флуорофоров для микроскопии живых клеток и одиночных молекул. Nat. Методы 12, 244-250 (2015).
• 8. Woodford, C.R. et al. Улучшенные молекулы PeT для оптического восприятия напряжения в нейронах. J. Am. Chem. Soc. 137, 1817-1824 (2015).
• 9. Гренье, В., Уокер, А. С., Миллер, Э. У. Маломолекулярный фотоактивируемый оптический датчик трансмембранного потенциала. J. Am. Chem. Soc. 137, 10894-10897 (2015).
• 10. Хуанг, Ю. Л., Уокер, А. С., Миллер, Э. У. Фотостабильная кремниево-родаминовая платформа для измерения оптического напряжения. J. Am. Chem. Soc. 137, 10767-10776 (2015).
• 11. Zou, P. et al. Яркие и быстрые разноцветные репортеры напряжения через электрохромный FRET. Nat. Commun. 5, 4625 (2014).
• 12. St-Pierre, F. et al. Высокоточная оптическая регистрация электрической активности нейронов с помощью сверхбыстрого флуоресцентного датчика напряжения. Nat. Neurosci. 17, 884-889 (2014).
• 13. Hochbaum, D. R. et al. Полностью оптическая электрофизиология нейронов млекопитающих с использованием инженерных микробных родопсинов. Nat. Методы 11, 825-833 (2014).
• 14. Гонг Ю., Вагнер М. Дж., Чжун Ли Дж. И Шнитцер М. Дж. Визуализация нервных импульсов в ткани мозга с использованием датчиков напряжения белка FRET-опсина. Nat. Commun. 5, 3674 (2014).
• 15. Трегер, Дж. С., Прист, М. Ф., Иеззи, Р., Безанилла, Ф.Визуализация электрических сигналов в реальном времени с помощью инфракрасного красителя, одобренного FDA. Биофизика . J 107, L09-L012 (2014).
• 16. Han, Z. et al. Флуоресцентные датчики напряжения белка, полученные от ArcLight, которые реагируют на изменения напряжения мембраны с быстрой кинетикой. PLoS One 8, e81295 (2013 г.).
• 17. Гонг, Ю., Ли, Дж. З. и Шнитцер, М. Дж. Индикаторы напряжения с улучшенными флуоресцентными белками архаэродопсина. PLoS One 8, e66959 (2013 г.).
• 18. Барнетт, Л., Платиса, Дж., Попович, М., Пиерибоне, В. А. и Хьюз, Т. Флуоресцентный генетически кодируемый датчик напряжения, способный определять потенциалы действия. PLoS One 7, e43454 (2012 г.).
• 19. Akemann, W. et al. Визуализация динамики нейронной цепи с помощью чувствительного к напряжению флуоресцентного белка. J. Neurophysiol. 108, 2323-2337 (2012).
• 20. Encell, L.P. et al. Разработка тега слияния белков на основе дегалогеназы, способного к быстрому, селективному и ковалентному присоединению к настраиваемым лигандам. Curr. Chem. Геномика 6, 55-71 (2012).
• 21. Jin, L. et al. Потенциалы одиночного действия и подпороговые электрические события, отображаемые в нейронах с помощью флуоресцентного белкового датчика напряжения. Нейрон 75, 779-785 (2012).
• 22. Yan, P. et al. Палитра фторированных потенциочувствительных гемицианиновых красителей. Proc. Natl. Акад. Sci. 109, 20443-20448 (2012).
• 23. Miller, E. W. et al. Оптический мониторинг напряжения в нейронах с помощью фотоиндуцированного переноса электронов через молекулярные провода. Proc. Natl. Акад. Sci. 109, 2114-2119 (2012).
• 24. Краль, Дж. М., Хохбаум, Д. Р., Дуглас, А. Д. и Коэн, А. Е. Электрические пики в Escherichia coli , зондированные флуоресцентным белком, указывающим напряжение. Наука (80-.). 333, 345-348 (2011).
• 25. Краль, Дж. М., Дуглас, А. Д., Хохбаум, Д. Р., Маклорин, Д. и Коэн, А. Е. Оптическая регистрация потенциалов действия в нейронах млекопитающих с использованием микробного родопсина. Nat. Методы 9, 90-95 (2011).
• 26. Лебеф, Р., Ферезу, И., Россье, Дж., Арсениядис, С. и Косси, Дж. Непосредственный синтез флуоресцентно-чувствительного красителя Rh2691, чувствительного к напряжению в ближнем инфракрасном диапазоне, и его аналогов. Org. Lett. 11, 4822-4825 (2009).
• 27. Брэдли, Дж., Луо, Р., Отис, Т. С. и ДиГрегорио, Д. А. Субмиллисекундная оптическая передача мембранного потенциала на месте с использованием нейрональной трассирующей краски. J. Neurosci. 29, 9197-9209 (2009).
• 28. Gautier, A. et al. Разработанная белковая метка для мечения нескольких белков в живых клетках. Chem. Биол. 15, 128-136 (2008).
• 29. Los, G. V. et al. HaloTag: новая технология маркировки белков для визуализации клеток и анализа белков. ACS Chem. Биол. 3, 373-382 (2008).
• 30. Фромхерц, П., Хитенер, Г., Кун, Б. и Хиннер, М. J. ANNINE-6plus, чувствительный к напряжению краситель с хорошей растворимостью, прочным мембранным связыванием и высокой чувствительностью. Eur. Биофиз. J. 37, 509-514 (2008).
• 31. Sjulson, L. & Miesenbock, G. Рациональная оптимизация и визуализация in vivo генетически закодированного репортера оптического напряжения. J. Neurosci. 28, 5582-5593 (2008).
• 32. Кнопфель, Т., Томита, К., Шимазаки, Р., Сакаи, Р. Оптические записи мембранного потенциала с использованием генетически нацеленных чувствительных к напряжению флуоресцентных белков. Методы 30, 42-48 (2003).
• 33. Герреро, Г., Сигель, М. С., Роска, Б., Лутс, Э. и Исакофф, Э. Ю. Настройка FlaSh: изменение динамики, диапазона напряжений и цвета генетически закодированного оптического датчика мембранного потенциала. Biophys.J. 83, 3607-3618 (2002).
• 34. Атака К. и Пиерибон В. А. Генетически нацеленный флуоресцентный зонд стробирования каналов с быстрой кинетикой. Biophys. J. 82, 509-516 (2002).
• 35. Keppler, A. et al. Общий метод ковалентного мечения гибридных белков малыми молекулами in vivo. Nat. Biotechnol. 21, 86-89 (2002).
• 37. Siegel, M. S. & Isacoff, E. Y. Генетически закодированный оптический зонд мембранного напряжения. Neuron 19, 735-741 (1997).

Следует понимать, что различные детали раскрытого в настоящее время предмета изобретения могут быть изменены без выхода за пределы объема предмета, раскрытого в данном документе. Кроме того, вышеприведенное описание предназначено только для иллюстрации, а не для ограничения.

Генетические индикаторы напряжения | Meta

Ссылки

1 ноября 1977 г. · Журнал нейрофизиологии · BM SalzbergW N Ross

1 марта 1991 г. · Neuron · R Yuste, LC Katz

30 сентября 1991 · Biochimica Et Biophysica Acta · P Fromherz, A Lambacher

6 апреля 1990 г. · Наука · W DenkW W Webb

1 января 1989 г. · Методы клеточной биологии · D Gross, LM Loew

1 января 1989 г. · Ежегодный обзор физиологии · L Cohen

1 мая , 1981 · Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки · A GrinvaldI Farber

1 сентября 1982 · Биофизический журнал · A GrinvaldL Anglister

22 июня 1995 · Nature · R Yuste, W Denk

Oct 1, 1994 · Журнал методов нейробиологии · W DenkR Yuste

11 февраля 1994 г. · Наука · JY WuC X Falk

1 октября 1995 г. · Биофизический журнал · JE González, RY Tsien

1 сентября 1997 г. · Кора головного мозга · R YusteD Kleinfeld

28 августа 1997 · Природа · A MiyawakiR Y Tsien

14 ноября 1997 · Neuron · MS Siegel, EY Isacoff

5 июня 1999 г. · Методы: дополнение к методам энзимологии · D SmettersR Yuste

1 июня 1991 г. · Европейский журнал нейробиологии · Биргит Альбовиц, Ульрих Кунт

9 июля 2004 г. · Biophysical Journal · Бернд Кун Винфрид Денк

28 сентября 2004 г. · Журнал биомедицинской оптики · Боаз А. Немет Рафаэль Юсте

22 октября 2004 г. · Nature Reviews.Неврология · Амирам Гринвальд, Рина Хильдесхайм

20 мая 2005 г. · Природа · Йошимичи Мурата Ясуси Окамура

6 октября 2005 г. · Нейробиология природы · Барон Чанда Франсиско Безанилья

13 января 2006 г. · Труды Национальной академии наук США Америки · Муцуо Нурия Рафаэль Юсте

28 января 2006 г. · Chembiochem: Европейский журнал химической биологии · Марлон Дж. Хиннер Петер Фромхерц

10 мая 2007 г. · PloS One · Димитар Димитров Томас Нёпфель

23 мая 2008 г. · Журнал неврологии : Официальный журнал Общества нейробиологии · Лукас Сьюлсон, Геро Мизенбёк

16 июля 2008 · Природные методы · Хидеказу Цуцуи Ацуши Мияваки

9 января 2009 · Границы в нейронных цепях · Владимир Николенко, 9000, Рафаэль, 9 февраля 2004 г. Журнал физической химии.B · Марлон Дж. ХиннерПитер Фромхерц

7 октября 2010 г. · Биофизический журнал · Донгшенг ВанМайер Б. Джексон

12 января 2011 г. · Нейрон · Дарси С. Петерка Рафаэль Юсте

18 января 2011 г.

19 июля 2011 г. · Наука · Джоэл М. Кралдж Адам Э. Коэн

21 октября 2011 г. · Фотохимия и фотобиология · Халил Байрактар ​​Адам Э. Коэн

15 ноября 2011 г. · Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки · Франческа Ансельми Валентина Эмилиани

29 ноября 2011 г. · Природные методы · Джоэл М. Краль Адам Э. Коэн

7 февраля 2012 г. · Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки · Эван В. Миллер Роджер И Циен

13 марта 2012 г. · Нейрон · Кристин Гриенбергер, Артур Коннерт

14 марта 2012 г. · Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки · Лин Тиан-Люк Д. Лавис

21 июля 2012 г. · Журнал нейрофизиологии · Вальтер АкеманТомас Knöpfel

11 сентября 2012 г. · Neuron · Lei JinVincent A Pieribone

22 ноября 2012 г. · Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки · Ping YanLeslie M Loew

19 декабря 2012 г. · Современная химическая геномика · Лэнс П. ЭнселлКейт В Вуд

27 марта 2013 г. · Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки · Дугал Маклорин Адам Э. Коэн

3 июля 2013 г. · Отчеты с камер · Сяовей ЧенАртур Коннерт

10 июля 2013 г. · Журнал физиологии · Hidekazu TsutsuiYasushi Okamura

11 июля 2013 · PloS One · Yiyang GongMark J Schnitzer

13 августа 2013 · Cell · Guan CaoMichael N Nitabach

Dec 7, 2013 · PloS One · Zhouib HanVone

24 апреля 2014 г. · Nature Communications · Yiyang GongMark J Schnitzer

Цитаты

29 марта 2020 г. · Датчики · Елена фон Молитор Тициана Чезетти

15 июля 2020 г. · Биотехнологический журнал · Юнъян Лю Цянбин Ван

17 января 2020 г. · Международный журнал молекулярных наук · Бруно СтерлиниАнна Корради

29 декабря 2019 г. · Международный журнал молекулярных наук · Альфонс ПенцкоферПетер Хегеманн

12 сентября 2020 г. · Международный журнал молекулярных наук · Альфонс Пензкофер

30 мая 2020 г. · Неврологические исследования · Тацуо К Сато

29 декабря 2020 г. · Журнал методов нейробиологии · Майкл Венцель, Джордан П. Хамм

28 января 2021 г. · Микромашины · Чаба Форро Габриэлла Пануччио

5 декабря 2020 г. · Нейрофотоника · Qinggong TangYu Chen

4 февраля 2021 г. · Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки · Тереза ​​С. Аличистван Моди

19 февраля 2021 г. · Журнал методов нейробиологии · Йоав Адам

13 марта 2021 г.